一种用于液基免疫细胞化学染色的载玻片的制备方法技术

一种用于液基免疫细胞化学染色的载玻片的制备方法，包括：将载玻片置于模具内，模具包括载玻片固定工装

【技术实现步骤摘要】
一种用于液基免疫细胞化学染色的载玻片的制备方法


[0001]本申请涉及用于作为免疫细胞化学染色的细胞制备
、
染色的载体的
，具体的为一种用于液基免疫细胞化学染色的载玻片的制备方法
。

技术介绍

[0002]免疫细胞化学染色在宫颈癌前筛查中应用广泛，主要是用于免疫细胞化学染色
P16、Ki67
等指标，检测细胞的各因子表达，从而判断是否存在癌变的可能性
。
宫颈癌前筛查免疫组化主要是用于判断宫颈癌的一种方法，如果检查结果出现异常，可以进一步通过阴道镜检查
、
宫颈活检等检查进行确诊
。
[0003]用于免疫细胞化学染色的原理为
:
妇科宫颈细胞切片经抗原热修复处理后与一抗试剂进行孵育，在原位形成一抗与目标抗原的抗原
‑
抗体复合物；抗原
‑
抗体复合物中一抗分子再与辣根过氧化物酶
(HRP)
或碱性磷酸酶
(AP)
标记的聚合物二抗通过孵育结合，在原位进一步形成抗原
‑
抗体
‑
二抗聚合物的复合物；最后通过
HRP
催化二氨基联苯胺
(DAB)
或通过
AP
催化红色碱性磷酸酶底物在抗原部位形成棕色或红色沉积物；光学显微镜下通过观察棕色部位来确定是否有目标抗原及其表达情况
。
[0004]上述的免疫细胞化学染色的步骤基本包括：标本采集
、r/>涂片制备
、
标本固定
、
标本浓缩
、
染色和镜检等；其中的涂片制备
、
标本固定
、
标本浓缩和染色，是以特定的载玻片为载体，具体的过程为：以液基细胞专用载玻片为载体，主要的设计特点为：一个玻璃片，用化学或者物理方法进行载玻片表面修饰
、
化学包被，以防止操作过程中细胞掉片的现象；然后进行染色，在染的的过程中，需要将各种清洗液试剂
、
抗体试剂
、
染色试剂等，一次加到载玻片上的细胞区域内；但是载玻片为一种玻璃制备而成的具有光滑外表面的结构，在添加各种清洗液试剂
、
抗体试剂
、
染色试剂等过程，为了保证对细胞的充分浸润，需要足够量的试剂；而由于载玻片表面是平面结构，试剂滴加上去后，虽然部分被细胞吸收浸润，但是不可不可避免的会有部分的试剂流失或者扩散，而一旦流水和扩散严重，会影响待染色的细胞的染色效果，如这样会导致细胞染色不彻底而影响检测结果的准确性；而且如果试剂流失严重，还会导致细胞发生干化，甚至会会变为不可逆转的破坏而无法修复；为了避免细胞发生染色不彻底的情况，往往需要过量的滴加试剂，这样不仅造成试剂的浪费，还会导致试剂流失的更加严重，后处理也相对复杂
。

技术实现思路

[0005]本申请针对现有技术的上述不足，提供一种染色过程试剂不会发生流失和扩散，能够保证染色彻底，不会导致染色假阴性或者染色色彩偏低的用于液基免疫细胞化学染色的载玻片的制备方法
。
[0006]为了解决上述技术问题，本申请采用的技术方案为：一种用于液基免疫细胞化学染色的载玻片的制备方法，步骤包括：
[0007](1)
首先将载玻片置于模具内，所述的模具包括载玻片固定工装
、
圈外覆盖工装和
圈内覆盖工装；在所述的载玻片固定工装上设置有多个并排设置的固定槽位，将载玻片置于固定槽位内，然后将圈外覆盖工装覆盖于载玻片固定工装上
、
所述的圈外覆盖工装上设置有供载玻片露出的通孔，将圈内覆盖工装覆盖于露出的载玻片上；此时，所述的圈外覆盖工装和圈内覆盖工装之间形成涂覆区域；
[0008](2)
然后在步骤
(1)
形成的涂覆区域内喷涂疏水涂层，从而在涂覆区域内形成与载玻片结合的疏水涂层；
[0009](3)
喷涂完成后进行固化，具体的将喷涂完成后的载玻片进行固化以使得疏水涂层与载波片之间形成稳固的连接，固化完成后获得具有疏水涂层的载波片结构
。
[0010]进一步的，所述的载玻片固定工装包括本体，和设置于本体上的多个并排设置的固定槽位，所述的固定槽位的内轮廓与容置的载玻片相适配；具体的，固定槽位是开设在本体上的凹槽，其凹槽的尺寸与载波片的尺寸相互匹配，将载波片置于固定槽位内之后，正好可以填充整个固定槽位的空间，从而保证载波片位置的稳定性，为后续模具的组装和涂层位置的限位提供保证
。
[0011]进一步的，所述的固定槽位的深度与载波片的厚度相当；这样在载波片容置到固定槽位后，载波片的上表面与固定槽位所在的本体的上表面齐平，方便后续涂层的涂覆
。
[0012]进一步的，所述的圈外覆盖工装上的通孔宽度不大于载波片的横向宽度；采用上述方案，可以保证涂层完整的涂覆于载波片上
。
[0013]进一步的，所述的圈外覆盖工装与载玻片固定工装上设置有定位连接结构，所述的定位连接结构用于圈外覆盖工装与载玻片固定工装之间的固定；采用上述方案，在将二者连接后，可以保证二者连接位置的准确性，并且还可以防止二者在喷涂过程中移位或者脱离
。
[0014]进一步的，所述的圈内覆盖工装包括横向支架和与横向支架垂直连接的竖向支架，所述的竖向支架的前端设置有与通孔配合的内圈板；采用上述方案，可以将圈内覆盖工装置于通孔内，此时内圈板与通孔之间形成涂覆区域，将涂层喷涂于该涂覆区域内，即可实现载波片上涂层的设置，而且可以一次多出，有效的提高效率
。
[0015]进一步的，所述的内圈板的厚度与通孔内壁的轴向高度相等；采用该方案，可以保证涂层的厚度一致性
。
[0016]进一步的，所述的疏水涂层为特氟龙材料或者
QCP0022
‑
C(
为一种易清洁疏水疏油纳米涂层，广州希森美克新材料科技股份有限公司开发的一种特种单组分长效易清洁纳米涂层，采用最新纳米杂化技术，针对玻璃表面特别开发的常温固化的纳米产品
)。
[0017]进一步的，所述的固化具体为将载波片置于烤箱中烘烤，控制烤箱内的温度在
65
‑
81
摄氏度
、
烘干8‑
15
分钟
。
[0018]进一步的，所述的疏水涂层烘干后的厚度在
0.005
‑
0.01mm。
[0019]进一步的，当所述的疏水涂层为特氟龙材料时，将所述的乙烯
‑
四氟乙烯共聚树脂和稀释其的溶剂
(
采用美国杜邦的
953G
‑
401
水性分散体涂料
)
混合，然后将稀释液和涂料进行充分的混合搅拌，搅拌时间在
30
‑...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种用于液基免疫细胞化学染色的载玻片的制备方法，其特征在于：步骤包括：
(1)
首先将载玻片置于模具内，所述的模具包括载玻片固定工装
、
圈外覆盖工装和圈内覆盖工装；在所述的载玻片固定工装上设置有多个并排设置的固定槽位，将载玻片置于固定槽位内，然后将圈外覆盖工装覆盖于载玻片固定工装上
、
所述的圈外覆盖工装上设置有供载玻片露出的通孔，将圈内覆盖工装覆盖于露出的载玻片上；此时，所述的圈外覆盖工装和圈内覆盖工装之间形成涂覆区域；
(2)
然后在步骤
(1)
形成的涂覆区域内喷涂疏水涂层，从而在涂覆区域内形成与载玻片结合的疏水涂层；
(3)
喷涂完成后进行固化，具体的将喷涂完成后的载玻片进行固化以使得疏水涂层与载波片之间形成稳固的连接，固化完成后获得固化有疏水涂层的载波片结构
。2.
根据权利要求1所述的用于液基免疫细胞化学染色的载玻片的制备方法，其特征在于：所述的载玻片固定工装包括本体，和设置于本体上的多个并排设置的固定槽位，所述的固定槽位的内轮廓与容置的载玻片相适配
。3.
根据权利要求2所述的用于液基免疫细胞化学染色的载玻片的制备方法，其特征在于：所述的固定槽位的深度与载波片的厚度相当
。4.
根据权利要求1所述的用于液基免疫细胞化学染色的载玻片的制备方法，其特征在于：所述的圈外覆盖工装上的通孔宽度不大于载波片的横向宽度
。5.
根据权利要求1所述的用于液基免疫细胞化学染色的载玻片的制备方法，其特征在于：所述的圈外覆盖工装与载玻片固定工装上设置有定位连接结构，所述的定位连接结构用于圈外覆盖工装与载玻片固...

【专利技术属性】
技术研发人员：王远，沈雯，吴飞青，
申请(专利权)人：浙江莱阅病理诊断科技有限公司，
类型：发明
国别省市：