一种鳞癌的医学检测方法技术

本发明专利技术属于鳞癌的检测标记技术领域，尤其为一种鳞癌的医学检测方法，包括以下步骤：(1)采集需要检测部位的样本，并对样本进行初步处理；(2)对初步处理的样本进行DNA提取；(3)利用PCR扩增物对提取的DNA进行PCR扩增；(4)对DNA的PCR扩增物进行琼脂糖电泳；(5)读取电泳结果，通过结果来判断检测结果。本发明专利技术通过对样本的DNA进行PCR扩增引物，过程快速、结果准确，经PCR扩增后行2％琼脂糖电泳，根据PCR产物带型即可判定结果，该方法的检测速度块，效率高，操作起来简单方便，可以快速的完成检测，并且检测的结果精确，费用低，方便推广使用。方便推广使用。

【技术实现步骤摘要】
一种鳞癌的医学检测方法


[0001]本专利技术涉及鳞癌的检测标记
，具体为一种鳞癌的医学检测方法。

技术介绍

[0002]鳞癌、原位癌及微小浸润癌可无明显肉眼病灶，宫颈光滑或仅为柱状上皮异位。随病情发展可出现不同体征。外生型宫颈癌可见息肉状、菜花状赘生物，常伴感染，肿瘤质脆易出血；内生型宫颈癌表现为宫颈肥大、质硬、宫颈管膨大；晚期癌组织坏死脱落，形成溃疡或空洞伴恶臭。阴道壁受累时，可见赘生物生长于阴道壁或阴道壁变硬；宫旁组织受累时，双合诊、三合诊检查可扪及宫颈旁组织增厚、结节状、质硬或形成冰冻状盆腔。据相关组织公布全世界每年大约有20万名妇女死于这种疾病。
[0003]因此改善卫生状况，及时就诊，早发现、早治疗极为重要，在日常的检查中需要对疑似病变部位处进行取样检测，通过检测的结果来判断是否病变。但是，在目前的检测过程中通常采用色谱法等等方法进行检测，检测操作繁琐复杂，且费用较高。

技术实现思路

[0004](一)解决的技术问题
[0005]针对现有技术的不足，本专利技术提供了一种鳞癌的医学检测方法，解决了上述
技术介绍
中所提出的问题。
[0006](二)技术方案
[0007]本专利技术为了实现上述目的具体采用以下技术方案：
[0008]一种鳞癌的医学检测方法，包括以下步骤：
[0009](1)采集需要检测部位的样本，并对样本进行初步处理；
[0010](2)对初步处理的样本进行DNA提取；
[0011](3)利用PCR扩增物对提取的DNA进行PCR扩增；
[0012](4)对DNA的PCR扩增物进行琼脂糖电泳；
[0013](5)读取电泳结果，通过结果来判断检测结果。
[0014]进一步地，所述上述步骤1中所取样的样本不立即进行DNA提取，则储存在
‑
70℃或液氮中，最好采用刚刚取样的样本进行提取。
[0015]进一步地，所述上述步骤2中DNA提取采用加热快速制备法，加热温度为： 96℃
‑
100℃，加热五分钟，然后离心处理，离心后取出上层的清液备用即可。
[0016]进一步地，所述步骤3中DNA的PCR扩增，首先，对其DNA提取物进行高温变性使之解链，高温变性的温度为：95℃；接着，对上述解链的DNA进行降温复性，使目的基因与引物杂交，降温复性的温度为：40℃
‑
60℃；最后，在70℃
ꢀ‑
75℃的温度下，DNA聚合酶进行酶促聚合反应，使目的基因DNA序列在3
’
位置上逐渐延伸，新合成的引物延伸链又可以作为下一步反应的模板，如此反复循环进行，按照2^n的指数扩增，短时间内可获得大量的DNA目的基因。
[0017]进一步地，所述步骤4中PCR扩增物的琼脂糖电泳，PCR产物的2％琼脂糖电泳：
200V，电泳15min，得到电泳结果。
[0018]进一步地，所述步骤5中的电泳结果：若同时出现268bp和360bp的条带，则鉴定为rs1136697
‑
G阳性样本；若仅出现360bp的条带，则鉴定为 rs1136697
‑
G阴性样本。
[0019](三)有益效果
[0020]与现有技术相比，本专利技术提供了一种鳞癌的医学检测方法，具备以下有益效果：
[0021]本专利技术，通过对样本的DNA进行PCR扩增引物，过程快速、结果准确，经 PCR扩增后行2％琼脂糖电泳，根据PCR产物带型即可判定结果，该方法的检测速度块，效率高，操作起来简单方便，可以快速的完成检测，并且检测的结果精确，费用低，方便推广使用。
具体实施方式
[0022]下面将结合本专利技术实施例，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0023]实施例
[0024]本专利技术一个实施例提出的一种鳞癌的医学检测方法，包括以下步骤：
[0025](1)采集需要检测部位的样本，并对样本进行初步处理；
[0026](2)对初步处理的样本进行DNA提取；
[0027](3)利用PCR扩增物对提取的DNA进行PCR扩增；
[0028](4)对DNA的PCR扩增物进行琼脂糖电泳；
[0029](5)读取电泳结果，通过结果来判断检测结果。
[0030]步骤1中所取样的样本不立即进行DNA提取，则储存在
‑
70℃或液氮中，最好采用刚刚取样的样本进行提取。
[0031]步骤2中DNA提取采用加热快速制备法，加热温度为：96℃
‑
100℃，加热五分钟，然后离心处理，离心后取出上层的清液备用即可。
[0032]步骤3中DNA的PCR扩增，首先，对其DNA提取物进行高温变性使之解链，高温变性的温度为：95℃；接着，对上述解链的DNA进行降温复性，使目的基因与引物杂交，降温复性的温度为：40℃
‑
60℃；最后，在70℃
‑
75℃的温度下， DNA聚合酶进行酶促聚合反应，使目的基因DNA序列在3
’
位置上逐渐延伸，新合成的引物延伸链又可以作为下一步反应的模板，如此反复循环进行，按照2^n 的指数扩增，短时间内可获得大量的DNA目的基因。
[0033]步骤4中PCR扩增物的琼脂糖电泳，PCR产物的2％琼脂糖电泳：200V，电泳15min，得到电泳结果，其中电泳的操作如下：
[0034]准备干净的配胶板和电泳槽，如果DNA酶污染的仪器可能会降解DNA，造成条带信号弱、模糊甚至缺失的现象，进而导致结果不精确；分辨率高的电泳应该选择聚丙烯酰胺凝胶电泳；对于琼脂糖凝胶电泳，浓度通常在0.5～2％之间，应该采用高浓度的用来进行小片段分析；并使用缓冲液为TBE，电泳时最好使用新制的缓冲液可以提高电泳效果；电泳时电场强度不应该超过20V/cm，电泳温度应该低于30℃；在上样前不要对DNA样品加热，用20mM NaCl缓冲液稀释可以防止DNA变性；DNA电泳一定要使用DNA Marker或已知大小的正对照DNA来估计DNA片段大小，Marker应该选择在目标片段大小附近ladder较密的，这样对目标
片段大小的估计才比较准确，需要注意的是Marker的电泳同样也要符合 DNA电泳的操作标准，如果选择λDNA/HindIII或者λDNA/EcoRI的酶切Marker，需要预先65℃加热5min，冰上冷却后使用，从而避免HindIII或EcoRI酶切造成的粘性接头导致的片段连接不规则或条带信号弱等现象。
[0035]步骤5中的电泳结果：若同时出现268bp和360bp的条带，则鉴定为 rs1136697
‑
G阳性样本；若仅出现360bp的条带，则鉴定为rs113本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种鳞癌的医学检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)采集需要检测部位的样本，并对样本进行初步处理；(2)对初步处理的样本进行DNA提取；(3)利用PCR扩增物对提取的DNA进行PCR扩增；(4)对DNA的PCR扩增物进行琼脂糖电泳；(5)读取电泳结果，通过结果来判断检测结果。2.根据权利要求1所述的一种鳞癌的医学检测方法，其特征在于：所述上述步骤1中所取样的样本不立即进行DNA提取，则储存在
‑
70℃或液氮中，最好采用刚刚取样的样本进行提取。3.根据权利要求1所述的一种鳞癌的医学检测方法，其特征在于：所述上述步骤2中DNA提取采用加热快速制备法，加热温度为：96℃
‑
100℃，加热五分钟，然后离心处理，离心后取出上层的清液备用即可。4.根据权利要求1所述的一种鳞癌的医学检测方法，其特征在于：所述步骤3中DNA的PCR扩增，首先，对其DNA提取物进行高温变性使之解链，高温变性的温度为：95℃；接着...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘永红，
申请(专利权)人：东莞兰卫医学检验实验室有限公司，
类型：发明
国别省市：