一种微流控血液及血制品细菌污染检测方法技术

本发明专利技术涉及一种微流控血液及血制品细菌污染检测方法，包括以下步骤：(1)模拟细菌污染血液标本的制备；(2)细菌计数及细菌基因组DNA的提取：提取上述细菌污染模拟血液标本的DNA，并对提取的DNA进行核酸浓度检测，选取浓度达标的DNA，保存备用；(3)微流控芯片FQ

【技术实现步骤摘要】
一种微流控血液及血制品细菌污染检测方法


[0001]本专利技术涉及医学检测
，尤其涉及一种微流控血液及血制品细菌污染检测方法，其中该血液及血制品尤其为血小板制品。

技术介绍

[0002]血液和血液制品的微生物污染是影响输血安全的重要因素之一，近年来，虽然随着检测试剂及检测技术的发展，经输血途径感染乙肝、艾滋、梅毒等常规血液传染病的风险已明显降低，但是血液细菌污染仍然无法避免。血液及血制品细菌污染主要因素有：静脉采血不当、献血员为无症状菌血症、保存不当等。其中，血小板更易受到细菌的污染，并且造成的临床危害也更严重，此外，血小板必须在22℃振荡培养的条件下以保持其活性，这也为大部分病原菌的生存提供了条件。
[0003]目前，可通过多种方法或工具来对血液及血制品的细菌污染进行检测，例如，申请号为CN201410781842.5(公开号为CN104502589A)的中国专利技术专利《一种检测血小板制品细菌污染的层析试纸条及检测方法》、申请号为CN201910589644.1(公开号为CN110456049A)的中国专利技术专利《一种血小板本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种微流控血液及血制品细菌污染检测方法，其特征在于包括以下步骤，(1)模拟细菌污染血液标本的制备：挑取污染模拟细菌进行培养，培养至一定浓度后与备用的无菌血小板浓缩液混合，混合液经稀释后获得所需的细菌污染模拟血液标本；(2)细菌计数及细菌基因组DNA的提取：提取上述细菌污染模拟血液标本的DNA，并对提取的DNA进行核酸浓度检测，选取浓度达标的DNA，保存备用；(3)微流控芯片FQ
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PCR反应：设计FQ
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PCR引物及Tagman探针，利用微流控芯片进行PCR反应并收集荧光数据。2.如权利要求1所述的微流控血液及血制品细菌污染检测方法，其特征在于，所述步骤(1)中的污染模拟细菌包括革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。3.如权利要求2所述的微流控血液及血制品细菌污染检测方法，其特征在于，所述革兰氏阳性菌为金黄色葡萄球菌，而所述革兰氏阴性菌为铜绿假单胞菌单菌。4.如权利要求1所述的微流控血液及血制品细菌污染检测方法，其特征在于，所述步骤(1)中的细菌污染模拟血液标本中的细菌浓度为100～108CFU/mL。5.如权利要求1所述的微流控血液及血制品细菌污染检测方法，其特征在于，所述步骤(2)中提取的DNA的浓度标准为：A260/A280值在1.8～2.0之间，A230/A260值小于0.7。6.如权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：俞露，贺云蕾，邓刚，沈龙强，张继伟，许德义，刘奕宇，
申请(专利权)人：宁波市中心血站，
类型：发明
国别省市：