【技术实现步骤摘要】
一种类器官或球状体的培养方法
[0001]本专利技术属于生物培养
,具体涉及一种类器官或球状体的培养方法。
技术介绍
[0002]哺乳动物器官和组织的研究一直是一项长期的挑战,因为它们难以实时观察和分析。作为替代,全器官和器官切片已按常规在体外提取和培养。然而,通过这些外植体的有限扩散限制了这种方法对胚胎或薄器官的使用。最近,干细胞生物学的重大进展表明,当在三维基质中培养时,成体干细胞和多能干细胞具有在体外存活、生长和分化成稳态组织模拟结构或类器官的能力。这项技术进步正在成为了解体内发生的各种生物过程的重要工具,例如组织发育和体内平衡、干细胞生态位功能以及组织对药物、突变或损伤的反应。然而,这些培养物仍在开发中,这阻碍了它们在药物筛选和治疗开发中的标准应用。目前可用的体外类器官或球状体的三个主要限制;当前的培养条件无法模拟天然微环境,即生物力学、生长因子、信号梯度,这强烈限制了对类器官生长的控制,由 Matrigel
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为代表的的生长基质是一种常用的癌症衍生基质,常常作为类器官或球状体生长的支架在活 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种培养类器官或球状体的培养方法,其特征在于,包括以下步骤:将重组蛋白配置成培养基质溶液,将培养基质溶液与类器官或球状体混合后,培养基质溶液自行或在辅助因子的作用下形成固态凝胶,将凝胶与液态培养基接触进行培养。2.根据权利要求1所述的一种培养类器官或球状体的培养方法,其特征在于,所述的培养物可在光照条件下从固态凝胶中释放出来。3.一种类器官或球状体的培养基,其特征在于,包含基础培养基,重组光敏蛋白 (0.01
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200mg/mL)、辅助因子 (0.01
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100 mM)。4.根据权利要求3所属的一种类器官或球状体的培养基,可进一步包括明胶 0.01
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200mg/mL、胶原蛋白0.01
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200mg/mL、层黏连蛋白0.01
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200μg/mL或巢蛋白0.01
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200μg/mL或它们的组合。5.根据权利要求3所述的一种类器官或球状体的培养基,其特征在于,所述的重组光敏蛋白为一种或多种重组光敏蛋白的混合物,为重组蛋白组分1和重组蛋白组分2,将重组蛋白组分1和重组蛋白组分2冻干粉末分别用PBS溶解成5%重量分数的溶液,在无光照、低光照或仅有红光条件下,混合两种溶液并加入腺嘌呤钴胺素水溶液(0.1~100 mM),即可生成重组光敏蛋白水凝胶。6.根据权利要求3所述的一种类器...
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