偶联抗体的化合物及其应用制造技术

本发明专利技术内容涉及化学合成小分子免疫激动剂和抗体偶联缀合物，属于化学生物学领域。本发明专利技术提供了偶联抗体的化合物及其应用。本发明专利技术应用抗体Fc亲和肽诱导的抗体偶联法，一步达到对抗体Fc区的限定偶联，或一步增倍对抗体的Fc区亲和作用。本发明专利技术的偶联方法能够较大提高ADC的制备效率及产品均一性、偶联小分子的Fc分布比例高，偶联产物的抗肿瘤效果很大提高。偶联产物的抗肿瘤效果很大提高。偶联产物的抗肿瘤效果很大提高。

【技术实现步骤摘要】
偶联抗体的化合物及其应用


[0001]本
技术实现思路
涉及化学合成小分子免疫激动剂，和抗体偶联缀合物，属于化学生物学领域。
技术背景
[0002]抗体偶联药物(ADC)作为大分子靶向药物，具有靶向性强和特异性高等优点。但是抗体随机偶联小分子化合物的位点不确定性，造成了产品均一性差的问题，这对于生产的稳定性和产品质量控制带来了很大的困难，也影响抗体的靶向活性。
[0003]本专利技术应用抗体Fc亲和肽诱导的抗体偶联法，一步达到对抗体Fc区的限定偶联，或一步增倍对抗体的Fc区亲和作用。比较随机偶联方法，本专利技术的偶联方法能够较大提高ADC的制备效率及产品均一性、偶联小分子的Fc分布比例高，偶联产物的抗肿瘤效果很大提高。
[0004]本专利技术在前期研究经验基础上，筛选合成了新的系列小分子免疫激动剂，验证了免疫激活效果和偶联抗体的免疫激活效果及其抗肿瘤效果。

技术实现思路

[0005]本专利技术第一方面提供了一种化合物，其结构如式I所示：
[0006][0007]其中，Fc
‑
亲和肽表示和抗体的Fc区具有亲和力的多肽；Y表示具有免疫调节功能和/或抗肿瘤作用的的非羧基部分；X＝O或NH；n＝1
‑
10；
[0008]优选地，所述抗体为IgG抗体；
[0009]优选地，所述Fc
‑
亲和肽选自：
[0010][0011]优选地，选自表1：
[0012][0013][0014][0015][0016][0017][0018][0019]本专利技术第二方面提供了一种制备抗体偶联缀合物的方法，其中使用第一方面所述的化合物与抗体在抗体的Fc区发生偶联反应，从而获得抗体偶联缀合物，其合成路线如下所述：
[0020][0021]其中，Fc
‑
亲和肽和Y如第一方面所述；X＝O或NH；n＝1
‑
10。
[0022]本专利技术第三方面提供了一种化合物，其结构如式II所示：
[0023][0024]其中Fc
‑
亲和肽如第一方面所述；X＝O或NH；
[0025]优选地，所述化合物的结构如式III或式III
‑
1所示：
[0026][0027]本专利技术第四方面提供了一种化合物，其选自以下：
[0028][0029][0030]本专利技术第五方面提供了第四方面所述的化合物在制备第一方面所述的化合物中的用途；和/或在制备抗体偶联缀合物、蛋白偶联缀合物和多肽偶联缀合物中的用途。
[0031]本专利技术第六方面提供了第一方面或第三方面所述的化合物在制备抗体偶联缀合物、蛋白偶联缀合物和多肽偶联缀合物中的用途。
[0032]本专利技术第七方面提供了第一方面所述的表1中的化合物，在制备第一方面所述的化合物中的用途；和/或在制备抗体偶联缀合物、蛋白偶联缀合物和多肽偶联缀合物中的用途；和/或在制备免疫调节药物中的用途。
[0033]本专利技术第八方面提供了一种化合物，其结构如式IV或V所示：
[0034][0035]其中的Fc
‑
Peptide表示对抗体的Fc区具有亲和力的多肽；优选地，Fc
‑
Peptide选自：
[0036][0037]优选地，所述抗体为IgG抗体。
[0038]本专利技术第九方面提供了一种制备抗体偶联缀合物的方法，其中，使用第八方面所述的化合物与抗体在抗体的Fc区发生偶联反应，生成偶联抗体产物VI；随后，偶联抗体产物VI在还原剂的存在下生成还原产物VII；然后还原产物VII与发生偶联反应，生成抗体偶联缀合物VIII；其合成路线如下：
[0039][0040]代表带有马来酰亚胺基团的化合物；
[0041]优选地，所述抗体为IgG抗体。
[0042]在一个具体的实施方案中，选自表2：
[0043][0044][0045][0046][0047][0048][0049][0050]本专利技术第十方面提供了表2中的化合物在制备抗体偶联缀合物、蛋白偶联缀合物和多肽偶联缀合物中的用途；和/或在制备免疫调节药物中的用途。
[0051]本专利技术第十一方面提供了第八方面所述的化合物在制备抗体偶联缀合物、蛋白偶联缀合物和多肽偶联缀合物中的用途。
[0052]本专利技术第十二方面提供了抗体偶联缀合物在制备免疫调节药物中的用途；其中偶联到抗体上的化合物选自表1中的化合物或表2中的化合物；优选地，所述抗体是曲妥珠单抗或阿特珠单抗。
[0053]本专利技术第十三方面提供了一种化合物，其选自表6：
[0054][0055][0056]本专利技术第十四方面提供了表6中的化合物在制备第一方面所述的化合物、表1中的化合物或表2中的化合物中的用途；和/或在制备抗体偶联缀合物、蛋白偶联缀合物和多肽偶联缀合物中的用途；和/或在制备免疫调节药物中的用途。
附图说明
[0057]图1表示抗体的一步法Fc区偶联示意图。
[0058]图2表示Fc区双偶联示意图。
[0059]图3表示常用抗体分析方法。
[0060]图4表示应用IdeS酶特异裂解单抗得到2个Fc单链。
[0061]图5表示应用IdeS酶特异裂解偶联小分子的单抗得到2个偶联的Fc单链。
[0062]图6表示酶切抗体的特点比较(https://www.biomart.cn/11964/news/2889992.htm https://www.genovis.com/products/igg
‑
proteases/fabricator/)。
[0063]图7表示FabRICATOR
‑
HPLC系统分离效果。
[0064]图8表示曲妥珠单抗去糖质谱。
[0065]图9表示肝微粒体酶的代谢作用。
[0066]图10表示Cathepsin
‑
B酶催化裂解释放化合物作用。
[0067]图11表示抗体偶联缀合物的溶酶体代谢产物。
[0068]图12表示Her2
‑
GY101抑制肿瘤图。
[0069]图13表示阿特珠单抗
‑5‑5‑
8抑制肿瘤图。
具体实施方式
[0070]本专利技术提供了一种制备抗体偶联缀合物的方法，其基本合成路线如图1所示，
[0071]其中，Fc
‑
亲和肽表示和抗体的Fc区具有亲和力的多肽；Y表示具有免疫调节功能
和/或抗肿瘤作用的的非羧基部分；
[0072]X＝O或NH。
[0073]优选Fc
‑
亲和肽(Fc
‑
Peptide)为：
[0074][0075]Fc
‑
Peptide中的S
‑
S代表二个半胱氨酸(cysteine)之间形成的二硫键。可以替换为任意对抗体Fc段具有高亲和力的多肽或化合物。例如本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种化合物，其结构如式I所示：其中，Fc
‑
亲和肽表示和抗体的Fc区具有亲和力的多肽；Y表示具有免疫调节功能和/或抗肿瘤作用的的非羧基部分；X＝O或NH；n＝1
‑
10；优选地，所述抗体为IgG抗体；优选地，所述Fc
‑
亲和肽选自：优选地，选自表1：
2.一种制备抗体偶联缀合物的方法，其中使用权利要求1中所述的化合物与抗体在抗体的Fc区发生偶联反应，从而获得抗体偶联缀合物，其合成路线如下所述：
其中，Fc
‑
亲和肽和Y如权利要求1所述；X＝O或NH；n＝1
‑
10。3.一种化合物，其结构如式II所示：其中Fc
‑
亲和肽如权利要求1中所述；X＝O或NH；优选地，所述化合物的结构如式III或式III
‑
1所示：1所示：4.一种化合物，其选自以下：
5.权利要求4中所述的化合物在制备权利要求1中所述的化合物中的用途；和/或在制备抗体偶联缀合物、蛋白偶联缀合物和多肽偶联缀合物中的用途。6.权利要求1或3中所述的化合物在制备抗体偶联缀合物、蛋白偶联缀合物和多肽偶联缀合物中的用途。7.权利要求1中所述的表1中的化合物在制备权利要求1中所述的化合物中的用途；和/或在制备抗体偶联缀合物、蛋白偶联缀合物和多肽偶联缀合物中的用途；和/或在制备免疫调节药物中的用途。8.一种化合物，其结构如式IV或V所示：...

【专利技术属性】
技术研发人员：靳广毅，王竹林，
申请(专利权)人：深圳市康居正医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：