用于增强间充质干细胞效能的组合物及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种用于增强间充质干细胞效能的组合物，包括NAMPT激动剂，通过该组合物培养可增强间充质干细胞效能，得到的间充质干细胞可用于制备以异常炎症反应为特征的免疫性疾病的治疗药物。本发明专利技术的组合物可增强MSCs胞内NAD

【技术实现步骤摘要】
用于增强间充质干细胞效能的组合物及其应用


[0001]本专利技术涉及免疫治疗
，尤其涉及一种用于增强间充质干细胞效能的组合物及其应用。

技术介绍

[0002]间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)是广泛存在于机体大部分组织中的多能干细胞，与个体生长发育、组织稳态维持和器官损伤修复密切相关。除具备自我更新和多向分化潜能外，MSCs还拥有重要的免疫调控特性。机体损伤发生时，无论是外源性输注的MSCs还是内源性组织的MSCs均可被趋化至损伤部位，通过自身分化能力、免疫调节特性、协调原位基质细胞和组织特异性干细胞功能等，促进损伤修复和组织再生。因此，MSCs已然成为生命医学领域中重要的研究对象，为多种难治性和顽疾性疾病的治疗带来了希望。
[0003]目前，已有很多对于MSCs在炎症治疗中的作用研究，如袁福临等(间充质干细胞治疗炎性疾病的研究进展[J].中国药理学与毒理学杂志,2021,35(3):161
‑
168.DOI:10.3867/j.issn.1000
‑
3002.2021.03.001.)指出，MSCs通过调控辅助性T细胞1(Th1)、Th17和调节性T细胞亚群的分化及相关炎症因子的分泌，降低移植物抗宿主病和类风湿性关节炎的炎症反应，并进一步指出以MSCs为主的细胞治疗有望成为替代传统治疗的新方式；余永林等(淫羊藿甙干预脂肪间充质干细胞修复膝骨性关节炎的作用及相关机制研究[J].中国免疫学杂志,2021,37(3):301
‑
306.DOI:10.3969/j.issn.1000
‑
484X.2021.03.008.)通过对比淫羊藿甙干预脂肪间充质干细胞(AMSCs)与同种异体AMSCs进行移植治疗兔骨性关节炎的效果，发现淫羊藿甙干预可降低关节腔内NO、IL
‑
1与TNF
‑
α等炎症因子水平，改善骨性关节炎的微环境，抑制关节软骨细胞凋亡，从而达到保护关节软骨的作用。总之，MSCs对多种免疫细胞的调控作用及机制已被广泛研究。其主要通过表达不同的趋化因子和免疫抑制因子发挥强大的免疫调控功能。然而，MSCs的免疫调控功能并不是固有存在的，而是依赖于炎症因子的激活或“授权”。根据组织损伤微环境(炎症细胞和因子、氧浓度、pH值或细胞外基质组分等)的动态变化，MSCs可以表现出可塑性的免疫调控特性。例如，炎症因子IL
‑
17A能够加强IFN
‑
γ和TNF
‑
α激活的MSCs的免疫抑制功能，提升干细胞对急性肝损伤的治疗效应；暴露于低氧环境下的MSCs则可表现出更强的干性特征，且能分泌更多的细胞因子和趋化因子，增强疾病的治疗效应。因此，未来MSCs精准治疗的发力方向将是基于其高度可塑性的免疫调控功能优化当前的干细胞疾病治疗模式并开发新颖的MSCs疗效增益策略。

技术实现思路

[0004]为解决上述技术问题，本专利技术提供了一种用于增强间充质干细胞效能的组合物以及增强间充质干细胞效能的方法，并将根据以上方法得到的间充质干细胞制剂用于制备治疗以异常炎症反应为主要特征的免疫性疾病的药物，该药物用于结肠炎等疾病时效果显著。
[0005]本专利技术的第一个目的是提供一种用于增强间充质干细胞效能的组合物，该组合物
包括NAMPT(烟酰胺磷酸核糖转移酶)激动剂。
[0006]进一步地，NAMPT激动剂在组合物中的浓度为1
‑
50μM，优选为5
‑
10μM。
[0007]进一步地，NAMPT激动剂可为P7C3、SBI
‑
797812等。
[0008]进一步地，间充质干细胞为人源、鼠源、猪源或兔源间充质干细胞，从其骨髓中经极限稀释法处理得到。
[0009]所述的间充质干细胞是一种多能干细胞，它具有干细胞的所有共性，即自我更新和多向分化能力。骨髓间充质干细胞(BMSCs)是一类起源于中胚层的成体干细胞，也具有自我更新及多向分化潜能，可分化为多种间质组织，如骨骼、软骨、脂肪、骨髓造血组织等。为排除伦理问题，本专利技术使用的是经伦理审查批准的人骨髓间充质干细胞，包括商业化的人骨髓间充质干细胞(如Prochymal，Temcell HS Inj，Neuronata
‑
R，Stemirac，Stempeucel和Cellgram
‑
AMI等)。
[0010]特别指出，本专利技术所使用的人多能干细胞均不能够发育成完整个体，且都是已通过伦理审查而建立的多能干细胞。
[0011]本专利技术的第二个目的是提供一种增强间充质干细胞效能的方法，包括采用上述组合物培养间充质干细胞的步骤。
[0012]进一步地，间充质干细胞在含有NAMPT激动剂的组合物中培养18
‑
96h，优选为24
‑
36h。
[0013]本专利技术的第三个目的是提供一种用于治疗以异常炎症反应为主要特征的免疫性疾病的药物，该药物中包含经上述增强间充质干细胞效能的方法制备得到的间充质干细胞。
[0014]进一步地，以异常炎症反应为主要特征的免疫性疾病包括结肠炎、急性肝炎、类风湿性关节炎、急性肺炎、移植物抗宿主病等。
[0015]进一步地，上述药物为注射剂。
[0016]进一步地，通过静脉注射进行给药。
[0017]进一步地，上述药物通过增强MSCs胞内NAD
+
代谢，提高免疫抑制因子的表达，发挥干细胞免疫调控功能。
[0018]进一步地，免疫抑制因子包括HO1、COX2和iNOS。
[0019]借由上述方案，本专利技术至少具有以下优点：
[0020]本专利技术通过使用NAMPT激动剂体外预处理间充质干细胞，能够实现对以异常炎症反应为主要特征的免疫性疾病治疗的增益效应，经NAMPT激动剂体外预处理的间充质干细胞相比于同等数量未经预处理的间充质干细胞可表现出更有效的效果，经体内实验发现其能够减轻体重丢失、腹泻、便血、肠组织增厚水肿、结构破损以及免疫细胞浸润等疾病症状。
[0021]上述说明仅是本专利技术技术方案的概述，为了能够更清楚了解本专利技术的技术手段，并可依照说明书的内容予以实施，以下以本专利技术的较佳实施例并配合详细附图说明如后。
附图说明
[0022]为了使本专利技术的内容更容易被清楚的理解，下面根据本专利技术的具体实施例并结合附图，对本专利技术作进一步详细的说明。
[0023]图1为MSCs表型和分化功能鉴定结果；
[0024]图2为MSCs经IFN
‑
γ和TNF
‑
α刺激联合FK866处理24h后趋化因子和免疫抑制因子的富集情况；
[0025]图3为MSCs经IFN
‑
γ和TNF
‑
α刺激联合FK866处理24h后趋化因子和免疫抑制因子的基因和蛋白表达情况以及培养上清中NO本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于增强间充质干细胞效能的组合物，其特征在于：所述组合物包括NAMPT激动剂。2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于：所述NAMPT激动剂为P7C3和/或SBI
‑
797812。3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于：所述组合物中NAMPT激动剂的浓度为1
‑
50μM。4.一种增强间充质干细胞效能的方法，其特征在于：采用权利要求1
‑
3任一项所述的组合物培养间充质干细胞。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述间充质干细胞在所述组合物中培养18
‑<...

【专利技术属性】
技术研发人员：时玉舫，房建凯，邵常顺，陈永井，
申请(专利权)人：苏州大学，
类型：发明
国别省市：