定量PCR方法及用于其的试剂盒技术

本发明专利技术提供经改良的定量PCR法(qPCR法)，其用于测定人细胞中的靶基因含量，能够例如在细胞疗法中以更高的精度分析细胞动力学。本发明专利技术的qPCR法包括下述步骤：将与靶基因不交叉的规定量的外源DNA作为用于校正靶基因的测定量的外标添加至含有人细胞的生物体试样中。的外标添加至含有人细胞的生物体试样中。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】定量PCR方法及用于其的试剂盒


[0001]本专利技术涉及定量PCR(定量聚合酶链式反应，quantitative polymerase chain reaction：qPCR)法及用于其的试剂盒。更详细而言，本专利技术涉及用于在qPCR法中校正靶基因的定量结果的方法及用于实施该方法的试剂盒。

技术介绍

[0002]在施予基因工程化细胞的疗法、例如施予表达对特定肿瘤具有特异性的CAR(嵌合抗原受体)的T细胞(CAR
‑
T细胞)的细胞疗法中，把握施予后的细胞数在生物体内的动力学(细胞动力学)对于把握治疗效果及安全性(副作用)、建立恰当的治疗方针是重要的。
[0003]例如，非专利文献1中，记述了为了治疗急性成淋巴细胞性白血病(acute lymphoblastic leukemia：ALL)及慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphocytic leukemia：CLL)而施予Tisagenlecleucel(研发编号(code name)CTL019)、即含有靶向CD19阳性B细胞的CARr/>‑
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.定量PCR法(qPCR法)，其用于测定人细胞中靶基因的含量，所述qPCR法包括下述步骤：将与所述靶基因不交叉的规定量的外源DNA作为用于校正所述靶基因的测定量的外标添加至含有所述人细胞的生物体试样中。2.如权利要求1所述的qPCR法，其中，所述qPCR法为实时PCR法，所述靶基因的测定量的校正包括求出针对所述靶基因测得的Ct值与针对所述外源DNA测得的Ct值之差(ΔCt)、由所述ΔCt换算为所述靶基因的量。3.如权利要求1所述的qPCR法，其中，所述靶基因的测定量的校正包括反映回收率，所...

【专利技术属性】
技术研发人员：松本真一，山本俊辅，后藤昭彦，福田美雪，平林英树，
申请(专利权)人：武田药品工业株式会社，
类型：发明
国别省市：