一种生物活性肽在医药领域的应用制造技术

本发明专利技术属于生物技术、药理学与制剂领域，具体涉及一种生物活性肽在医药领域的应用、药理作用机制研究、应用、制剂，涉及生物活性肽治疗或预防痛风、痛风性关节炎、或、尿酸性肾病疾病的用途。病的用途。

【技术实现步骤摘要】
一种生物活性肽在医药领域的应用


[0001]本专利技术属于生物技术、药理学与制剂领域，具体涉及一种生物活性肽在医药领域的应 用、药理作用机制研究、应用、制剂，涉及生物活性肽治疗或预防痛风、痛风性关节炎、 或、尿酸性肾病疾病的用途。

技术介绍

[0002]尿酸主要产于肝脏，是内源性嘌呤及膳食来源嘌呤的最终代谢产物。它是一种生物活 性分子，可作为抗氧化剂、神经刺激剂、炎症诱导剂和先天免疫应答的激活剂。尿酸主要 通过肠道和肾脏排泄，人体中百分之七十的尿酸被肾小管重新吸收和分泌，未被吸收的部 分从尿液中排出。当尿酸产生过多或排泄受阻，使得血液中尿酸浓度保持在较高水平，会 引起高尿酸血症。通常把男性血清尿酸水平为7mg/dL，女性为6mg/dL作为高尿酸血症 的评判标准。高尿酸血症(Hyperuricemia，HUA)的发病率逐年增加。作为疾病发展的主 要预测因素，高尿酸血症在流行病学上与痛风密切相关。据估计，在世界范围内，年龄40 至60岁之间的男性和女性中，有1
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3％患有痛风，其患病率随着年龄的增长而增加，高尿 酸血症的发生率在12％至15％之间。过去，高甘油三酸酯血症，动脉高血压，高胆固醇血 症，糖尿病和肾衰竭被认为是痛风发展的主要危险因素，但几年来研究发现肥胖，代谢综 合征，遗传因素和饮食习惯也能影响痛风的发展。尿酸盐沉积导致的高尿酸血症与高血 压、糖尿病、代谢综合征以及心血管等疾病紧密相关。高尿酸血症与机体的代谢性异常、 胰岛素异常等因素有关，所以被认为是糖代谢异常、肥胖、血脂异常以及高血压等疾病在 机体内的统称。除痛风性关节炎外，肾脏疾病也是高尿酸血症最常见的并发症。尿酸长期 保持在较高的水平对肾脏的影响包括尿酸性肾病(急性)，尿酸盐性肾病(慢性)，肾结 石等。
[0003]要降低体内尿酸水平，从减少合成和增加排泄两方面治疗，分为抑制尿酸合成药和促 进尿酸排泄药。
[0004]目前临床上常用的抑制尿酸生成药是别嘌醇，是一种呤氧化酶抑制剂，别嘌醇通过抑 制黄嘌呤氧化酶催化次黄嘌呤生成黄嘌呤从而抑制尿酸生成，且不良反应较少；非布索坦 是非选择性的黄嘌呤氧化酶抑制剂，不仅能抑制氧化型黄嘌呤氧化酶，还能抑制还原型黄 嘌呤氧化酶。
[0005]丙磺舒、苯溴马隆、磺吡酮等都是常用的促进尿酸排泄药。此类药物能够抑制肾小管 对尿酸的重吸收，增加尿酸的排泄，类似于尿酸盐阴离子转运抑制剂，因此容易造成尿酸 盐结晶在尿路沉积，容易造成肾功能损害。此外，还有通过基因重组技术合成的尿酸酶类 药物拉布立酶(rasburicase)、培格洛替酶(peglotidase)，能催化尿酸氧化生成尿囊素和过氧 化氢，从而排出体外。此类药物最大的缺陷就是在体内易被水解导致失去药效。
[0006]蝎子是地球上存在的最古老的节肢动物之一，生存在温热的环境中，广泛的分布在全 球除寒带的大部分地区。就我国而言，东亚钳蝎(Buthus martensii Karsch)在我国分布最 广、数量最多。东亚钳蝎又称马氏正钳蝎，临床常用“全蝎”入药，运用历史悠久，入药 始于《蜀本草
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卷十六》。全蝎具有息风镇痉，通络止痛，攻毒散结等功效，《中国药典
(2020版)》一部收载了“全蝎”的相关信息。
[0007]尿酸是嘌呤代谢的最终产物，血清尿酸含量过高可引起痛风性关节炎和尿酸性肾病。 因此，本专利技术通过东亚钳蝎的生物活性肽来降低尿酸水平，从而实现治疗关节炎、痛风、 痛风性关节炎、尿酸性肾病疾病的效果。
[0008]技术方案
[0009]蝎肽在制备抗高尿酸的组合物的应用。
[0010]蝎肽在制备抗高尿酸的药物、保健品的应用。
[0011]蝎肽在制备治疗痛风、痛风性关节炎、或、尿酸性肾病疾病的组合物的应用。
[0012]蝎肽在制备预防痛风、痛风性关节炎、或、尿酸性肾病疾病的药物、保健品的应用。
[0013]蝎肽在制备治疗关节炎的组合物的应用。
[0014]蝎肽在制备治疗关节炎的药物、保健品的应用。
[0015]本专利技术的蝎肽组合物、药物、保健品，其剂型包括纳米制剂、注射剂等。
[0016]本专利技术的蝎肽的多肽单体6A，通过高效液相色谱检测纯度(图1)，以及MALDI
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TOF/TOF质谱鉴定(图2)，得到多肽单体6A的鉴定结果。
[0017]本专利技术的蝎肽组合物，通过高效液相色谱检测纯度(图1)，以及MALDI
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TOF/TOF质 谱鉴定(图2)，得到多肽单体6A的鉴定结果。
[0018]本专利技术的一种蝎肽的多肽单体6A，其制备方法在于：
[0019]蝎毒多肽的分离
[0020]粗毒粗分
[0021]将粗毒使用盐溶液进行溶解，超声助溶并使用0.22μm水相滤膜过滤备用。
[0022]使用LC6000型制备液相色谱仪、色谱柱(Sepharose 20
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200mm，实验室自 制)，流速为5.0mL
·
min
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1，检测波长220nm，进样量为1mL。流动相A： 0.01mol/L的氢氧化钠和磷酸二氢钾，B：0.01mol/L的氢氧化钠、磷酸二氢钾和 1mol/L氯化钠，得到粗毒粗分提取物。
[0023]将粗毒粗分提取物收集后冷冻干燥得到冻干粉末，置于
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20℃冰箱贮存。
[0024]冻干粉末使用1:1纯化水溶解，SeriesⅢ制备液相色谱仪进行精制。色谱柱YMC
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Pack ODS
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A 5μm，流速3ml/min，检测波长220nm，进样量1ml。
[0025]流动相A—0.1％三氟乙酸+水，B—0.1％三氟乙酸+乙腈。
[0026]经过进一步纯化及除盐后冷冻干燥，得到蝎毒多肽纯品。
[0027]单体脱盐均采用的反相色谱脱盐法。脱盐色谱条件为：Kromasil (20*250mm)色谱柱，色谱纯乙腈为有机相，配制30mM醋酸铵溶液(醋酸调pH至 4.3)和0.1％TFA两种水相，检测波长220nm、洗脱流速20mL/min维持不变。待色谱柱 被比例为V乙腈/V醋酸铵溶液＝5/95的流动相彻底平衡后，馏分加入等体积纯化水稀释上 样，维持5％的乙腈比例等度洗脱15
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20min；将水相更换为0.1％TFA溶液，维持5％的乙 腈比例等度洗脱10
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15min后，改变乙腈比例至50％，洗脱直至目标组分冲出被收集。
[0028]单体多肽6A：保留时间/min 14.180。
[0029]本专利技术的蝎肽的氨基酸的序列如下：
[0030]VRDAYIAKPENCVYHCATNEGCNKLCTDNGAESGYCQWGGRYGNACWCIKLPDRVPI RVPGKCH
[0031]本专利技术的蝎肽的纯度优选：98.1％。
[0032]本专利技术的蝎肽的质荷比：7098.439
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.蝎肽在制备抗高尿酸的组合物的应用。2.蝎肽在制备抗高尿酸的药物、保健品的应用。3.蝎肽在制备治疗痛风、痛风性关节炎、或、尿酸性肾病疾病的组合物的应用。4.蝎肽在制备预防痛风、痛风性关节炎、或、尿酸性肾病疾病的药物、保健品的应用。5.蝎肽在制备治疗关节炎的组合物的应用。6.蝎肽在制备治疗关节炎的药物、保健品的应用。7.根据权利要求1、3、5的的蝎肽在制备组合物的应用，其特征在于：剂型包括纳米制剂、注射剂。8.根据权利要求2、4、6的的蝎肽在制备药物、保健品的应用，其特征在于：剂型包括纳米制剂、注射剂。9.根据权利要求1
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6的的蝎肽在制备组合物的应用，其特征在于：蝎肽的氨基酸的序列如下：VRDAYIAKPENCVYHCATNEGCNKLCTDNGAESGYCQWGGRYGNACWCIKLPDRVPIRVPGKCH；和/或；蝎肽的纯度优选：98.1％；和/或；蝎肽的质荷比：7098.439；和/或；蝎肽的二硫键个数：4对。10.根据权利要求1
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6的的蝎肽在制备组合物的应用，其特征在于：纳米制剂的制备工艺如下：CLG合成、BmK9
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尿酸酶纳米复合物(Nplex)的制备。11.一种蝎肽的多肽单体6A，其特征在于：通过高效液相色谱检测纯度(图1)，以及MALDI
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【专利技术属性】
技术研发人员：付宏征，韩天娇，潘博文，王梅英，于桐惠，吴月征，陈怡晓，
申请(专利权)人：北京大学，
类型：发明
国别省市：