一种镇痛药物及其应用制造技术

本发明专利技术涉及生物制药技术领域，具体涉及一种镇痛药物及其应用。本发明专利技术利用反向HPLC分离收集科博肽中的其他组分，分析鉴定后得到了多种蛇毒神经毒素，将其按照特定比例进行配伍后，取得了一种镇痛效果好，副作用小，并且可以根据需要调整具体配比的蛇毒神经毒素类镇痛药物。所得到的多成分复合蛇毒神经毒素镇痛药物，其毒性相较目前的科博肽有了极大降低，安全性更高，镇痛作用效果接近，是一种比目前科博肽效果更好，品质控制更精准，药效更明确的镇痛药物。镇痛药物。镇痛药物。

【技术实现步骤摘要】
一种镇痛药物及其应用


[0001]本专利技术涉及生物制药
，具体涉及一种镇痛药物及其应用。

技术介绍

[0002]疼痛是机体受到损伤时发生的一种不愉快的感觉和情绪性的体验，是一组复杂的病理、生理改变的临床表现，疼痛可以是局部的，也可以是全身性疾病的反映，人们把具有以上“疼痛”为主要症状的疾病总称为“痛症”。目前阿片类镇痛药与非甾体类抗炎药都是经典临床镇痛药，用于疼痛治疗的历史悠久。但其临床应用也存在了许多的缺陷和不足，不良反应也是令人生畏。如一些临床用于术后、创伤、癌症等所产生的重度疼痛的强阿片类镇痛药，在临床应用中容易产生依赖性，并且会产生一定程度的耐受性，一旦出现精神依赖性又将给临床用药带来新的更大的问题。
[0003]神经毒素(neurotoxin，NT)是蛇毒中一类重要的活性组分，主要分布在眼镜蛇科和海蛇科及蝰科的响尾蛇蛇毒中。纯化的微量眼镜蛇毒神经毒素具有类似吗啡的中枢镇痛作用，用于顽固性疼痛、恶性肿瘤疼痛和关节痛的镇痛治疗。NT的镇痛作用有别于阿片类药物，表现为效价高、持续时间长、无耐受性和成瘾性，是一种很有潜力的新型镇痛药。研究表明，NT的含量以眼镜蛇毒中含量较高，从眼镜蛇毒中分离出的NT具有长短链两种，其中以短链NT镇痛效果更好。
[0004]科博肽是从眼镜蛇蛇毒中分离提纯的低分子多肽，其化学名为蛇毒神经毒素。眼镜蛇毒神经毒素与N型乙酰胆碱受体有高度亲和力，能阻止神经肌肉接头神经冲动信号的传递。影响脑内乙酰胆碱的代谢，并能提高人、鼠脑内脑啡肽含量，产生镇痛作用。科博肽在临床上主要用于晚期癌症疼痛、慢性关节痛、坐骨神经痛、三叉神经痛、麻风反应神经痛等慢性疼痛的治疗，长期临床使用表明，科博肽具有良好的镇痛效果，具有无成瘾性、无耐受性，镇痛作用持久，对停药或禁戒海洛因后出现的各种生理和精神依赖症状均有一定疗效，应用范围广，尤其适用于慢性、顽固性、持续性疼痛治疗，出现疗效后可减量维持。但以科博肽为代表的眼镜蛇蛇毒，具有一定的毒性，在使用时需要严格控制剂量来控制毒性。
[0005]并且目前科博肽中存在多种不同成分，在未分离鉴别其中各种成分在使用时效果不佳，因此，将科博肽中不同成分分离后重新配组，以得到一种镇痛效果好，副作用小，并且可以根据需要调整具体配比的蛇毒神经毒素类镇痛药物，是目前需要解决的问题。

技术实现思路

[0006]为了解决现有技术中存在的上述技术问题，本专利技术提供蛇毒神经毒素及应用，具体是通过以下技术方案得以实现的：
[0007]一种镇痛药物，由如下三种蛇毒神经毒素组成：
[0008]P1：蛋白氨基酸序列为LECHNQQSSQTPTTTGCSGGETNCYKKRWRDHRGYRTERGCGCPSVKNGIEINCCTTDRCNN的蛇毒神经毒素；
[0009]P2：蛋白氨基酸序列为LECHNQQSSQTPTTTGCSGGETNCYKKRWRDHRGYRTERG
CGCPSVKD(ISO)GI EINCCTTDRC NN的蛇毒神经毒素；
[0010]P3：蛋白氨基酸序列为LECHNQQSSQ TPTTTGCSGG ETNCYKKRWRDHRGYRTERG CGCPSVKDGI EINCCTTDRC NN的蛇毒神经毒素。
[0011]进一步的，如权利要求1所述的镇痛药物，其特征在于，所述三种蛇毒神经 毒素的具体比例为P1：p2：p3＝10
‑
95％：1
‑
80％：1
‑
80％。
[0012]进一步的，所述三种蛇毒神经毒素的具体比例为P1：p2：p3＝22
‑
80％：8
‑
60％： 10
‑
70％。
[0013]进一步的，所述三种蛇毒神经毒素的具体比例为P1：p2：p3＝40％：40％：20％。
[0014]进一步的，所述三种蛇毒神经毒素的具体比例为P1：p2：p3＝50％：30％：20％。
[0015]进一步的，所述三种蛇毒神经毒素的具体比例为P1：p2：p3＝60％：10％：30％。
[0016]进一步的，所述蛇毒神经毒素P1的分子量为6944.9925Da。
[0017]进一步的，所述蛇毒神经毒素P2的分子量为6945.9770Da。
[0018]进一步的，所述蛇毒神经毒素P3的分子量为6945.9678Da。
[0019]进一步的，所述蛇毒神经毒素P2的蛋白氨基酸序列LECHNQQSSQTPTTTGCSGG ETNCYKKRWR DHRGYRTERG CGCPSVKD(ISO)GIEINCCTTDRC NN，其中第48位的D(ISO)为异构天冬氨酸。
[0020]进一步的，所述蛇毒神经毒素P3的蛋白氨基酸序列LECHNQQSSQTPTTTGCSGG ETNCYKKRWR DHRGYRTERG CGCPSVKDGI EINCCTTDRCNN，其中第48位的D为非异构天冬氨酸。
[0021]所述的镇痛药物，在制备镇痛注射液中的应用。
[0022]本申请的蛇毒神经毒素分离及鉴定实验：
[0023]供试品
[0024]供试品名称供试品批号供试品状态科博肽20191101固体科博肽注射液20190801液体
[0025]实验仪器
[0026]1)高分辨质谱仪：Xevo G2
‑
XS QTof(Waters)
[0027]2)超高效液相色谱：UPLC(AcquityUPLC I
‑
Class)(Waters)
[0028]3)高效液相色谱：LC
‑
20AD，(SHIMADZU)
[0029]4)高分辨质谱仪：Q
‑
Exactive Plus，(Thermo Fisher)
[0030]5)超高效液相色谱：Vanquish Duo，(Thermo Fisher)
[0031]材料和试剂
[0032]1)乙腈(Thermo Fisher)
[0033]2)水(Thermo Fisher)
[0034]3)三氟乙酸(Sigma)
[0035]4)色谱柱:Symmetry Shield
TM RP185μm(Waters)
[0036]5)色谱柱:ACQUITY Peptide BEH C18，1.7μm 2.1mm*150mm (Waters)
[0037]6)Trypsin(Promega)
[0038]7)Glu
‑
C(Wako)
[0039]8)Lys
‑
C(Wako)
[0040]实验方法
[0041]1)分离收峰
[0042]流动相A：0.1％TFAinH2O；流动相B：0.1％TFAin 50％ACN H2O；
[0043]样品制备：
[0044]称取适量的科博肽粉末，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种镇痛药物，其特征在于，由如下三种蛇毒神经毒素组成：P1：蛋白氨基酸序列为LECHNQQSSQ TPTTTGCSGG ETNCYKKRWR DHRGYRTERG CGCPSVKNGI EINCCTTDRC NN的蛇毒神经毒素；P2：蛋白氨基酸序列为LECHNQQSSQ TPTTTGCSGG ETNCYKKRWR DHRGYRTERG CGCPSVKD (ISO) GI EINCCTTDRC NN的蛇毒神经毒素；P3：蛋白氨基酸序列为LECHNQQSSQ TPTTTGCSGG ETNCYKKRWR DHRGYRTERG CGCPSVKDGI EINCCTTDRC NN的蛇毒神经毒素。2.如权利要求1所述的镇痛药物，其特征在于，所述三种蛇毒神经毒素的具体比例为P1：p2：p3＝10
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95％：1
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80％：1
‑
80％。3.如权利要求2所述的镇痛药物，其特征在于，所述三种蛇毒神经毒素...

【专利技术属性】
技术研发人员：窦雅琪，李泽京，杨涛，
申请(专利权)人：云南南诏药业有限公司，
类型：发明
国别省市：