同时检测血液中芳香-支链氨基酸浓度的方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种同时检测血液中芳香

【技术实现步骤摘要】
同时检测血液中芳香
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支链氨基酸浓度的方法及应用


[0001]本专利技术属于检验分析
，具体涉及缬氨酸，酪氨酸，异亮氨酸，亮氨酸，苯丙氨酸，色氨酸的检测方法，以及该方法于临床上的应用。

技术介绍

[0002]氨基酸是蛋白质的重要组成成分，氨基酸谱分析是研究生物体内代谢的重要手段。其中，色氨酸(tryptophan,Typ)，酪氨酸(tyro
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sine,Tyr)和苯丙氨酸(phenylalanine,Phe)称为芳香族氨基酸(aromatic amino acids,AAA)；亮氨酸(leucine Leu)、异亮氨酸(isoleuine,Ile)和缬氨酸(valine,Val)称为支链氨基酸(branched
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chain aminoacids,BCAA)。近年来,随着各种氨基酸代谢疾病早期诊断的需要，血浆中支链与芳香族氨基酸浓度比值(BCAA/AAA)作为慢性肝病诊断指标的提出，以及氨酸输液疗法的开展，临床上迫切需要对血浆及其它体液的游离氨基酸进行定量分析(王自勉,汤秀玉,王征宇,本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种血样中芳香
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支链氨基酸的富集检测方法，其特征在于，所述检测方法为先采用微量血浆收集卡收集血样，经蛋白沉淀预处理，再联合高效液相色谱串联质谱进行检测，所述方法具体包括以下步骤：(1)芳香
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支链氨基酸的预处理：用微量血浆收集卡收集血浆，加入内标溶液，混匀放置15分钟后，加入沉淀剂，涡旋混匀5
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分钟，15000g 4℃离心5min后，取上清液进行检测；(2)芳香
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支链氨基酸的检测：将步骤(1)中得到的上清液于高效液相色谱串联质谱进行分析，计算药物和内标峰面积比值，通过内标法建立标准曲线计算血样中芳香
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支链氨基酸的浓度。2.根据权利要求1所述的富集检测方法，其特征在于，所述芳香
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支链氨基酸包括缬氨酸，酪氨酸，异亮氨酸，亮氨酸，苯丙氨酸和/或色氨酸。3.根据权利要求1所述的富集检测方法，其特征在于，步骤(1)中，所述血样为2～30μL的血清、血浆或全血。4.根据权利要求1所述的富集检测方法，其特征在于，步骤(1)中，所述沉淀剂为三氯乙酸溶液，质量分数为3％。5.根据权利要求1所述的富集检测方法，其特征在于，步骤(2)中，其中液相色谱串联质谱条件为：色谱柱：X Select Hss T32.5μm 2.1
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100mm；柱温40℃；进样器温度10℃；流动相A为含甲酸的水，B为含甲酸的乙腈，梯度洗脱条件为0
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0.8min，流动相B为4％；0.8
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0.9min，流动相B由4％升高到55％...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋丹，王璐，张亚莲，许晶，赵福荣，孙晓宇，曹云峰，
申请(专利权)人：大连润生康泰医学检验实验室有限公司，
类型：发明
国别省市：