天麻眩晕宁颗粒UPLC指纹图谱的建立方法及其指纹图谱技术

本发明专利技术属于中药制剂分析领域，具体公开了一种天麻眩晕宁颗粒UPLC指纹图谱的建立方法，包括天麻眩晕宁颗粒对照品及供试品溶液的制备、UPLC色谱条件的确定及UPLC标准指纹图谱的制作。本发明专利技术同时公开了由该方法得到的天麻眩晕宁颗粒UPLC标准指纹图谱，所得指纹图谱有31个共有峰。本发明专利技术方法操作简便、稳定性高、重现性好，所得指纹图谱共有峰多且分离度好，通过与标准指纹图谱中共有峰的比较，可对天麻眩晕宁颗粒的质量进行全面评价和控制，确保天麻眩晕宁颗粒内在质量的均一、稳定，提高了临床用药的安全性和有效性。药的安全性和有效性。

【技术实现步骤摘要】
天麻眩晕宁颗粒UPLC指纹图谱的建立方法及其指纹图谱


[0001]本专利技术属于中药制剂分析领域，具体涉及一种天麻眩晕宁颗粒UPLC指纹图谱的建立方法及其指纹图谱。

技术介绍

[0002]天麻眩晕宁合剂的处方及制备收载于卫生部药品标准中药成方制剂第十四册中(编号：WS3
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B
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2661
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97)。天麻眩晕宁同系产品包括天麻眩晕宁合剂、天麻眩晕宁颗粒等，是治疗眩晕症的经典方剂，由天麻、钩藤、泽泻、半夏、白术、茯苓、白芍、竹茹、川芎、甘草、陈皮、生姜12味原料药材制成，具有祛痰定眩、和胃止呕的功效，临床上主要用于眩晕，恶心、呕吐、舌淡，苔白滑，尤其适用于美尼尔氏症(梅尼埃病)、迷路炎、内耳药物中毒、位置性眩晕、晕动病等见上述证候者，疗效确切。方中君药天麻为贵细药材，其主要成分天麻素具有镇静、安眠、镇痛、促进心肌细胞能量代谢，增强免疫等作用。
[0003]原天麻眩晕宁合剂由于稳定性较差，为了提高制剂稳定性，将其改为颗粒剂。为了确保天麻眩晕宁颗粒工艺制备过程质量可控，本专利技术对其制剂质量标准进行了研究。中药指纹图谱是一种多指标成分的质量控制方法，它可以比较全面的反映制剂所含化学成分的种类和含量，从而能够全面、宏观、综合地反映和控制中药的质量。
[0004]基于超高效液相色谱(Ultra Performance Liquid Chromatography，UPLC)技术的中药指纹图谱是目前公认的适合中药及天然药物内在物质群质量控制的手段之一。借助于UPLC的理论及原理，涵盖了小颗粒填料、非常低系统体积及快速检测手段等全新技术，增加了分析的通量、灵敏度及色谱峰容量，降低扩散、低交叉污染，提高了分析速度、灵敏度及分离度，减少了溶剂用量，降低了分析成本。因此，超高效液相色谱仪在表征中药指纹图谱方面已经得到广泛应用。
[0005]目前，尚未见有专利公开及文献报道采用UPLC法对天麻眩晕宁颗粒进行指纹图谱研究。本专利技术公开了一种天麻眩晕宁颗粒的UPLC指纹图谱建立方法，以及用该方法制作的天麻眩晕宁颗粒UPLC标准指纹图谱。在使用相似度进行评价的情况下，可用其标准指纹图谱对天麻眩晕宁颗粒的质量进行全面地评价和控制，从而保证了产品质量的稳定性及临床用药的安全性和有效性。

技术实现思路

[0006]针对现有天麻眩晕宁颗粒质量检测方法的不足，本专利技术的目的是提供一种天麻眩晕宁颗粒UPLC指纹图谱建立方法。具体来说，该方法将天麻眩晕宁颗粒制备成供试品溶液，经过UPLC分离检测，从而获得天麻眩晕宁颗粒UPLC标准指纹图谱，实现全方位多方面检测，完善其质量检测体系，进而为天麻眩晕宁颗粒的真伪鉴别和内在质量提供可靠依据。
[0007]本专利技术一种天麻眩晕宁颗粒UPLC指纹图谱的建立方法，包括下列步骤：
[0008]1)对照品及供试品溶液的制备
[0009]称取天麻素、芍药苷、阿魏酸、甘草苷、橙皮苷、23
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乙酰泽泻醇C、藁本内酯对照品
适量，用甲醇溶解，作为对照品溶液；
[0010]精密称取天麻眩晕宁颗粒2.0g，置具塞锥形瓶中，加入35％
‑
75％甲醇，超声处理20
‑
45min，放冷，补重，滤过，取续滤液，得供试品溶液；
[0011]2)UPLC色谱条件的确定
[0012]色谱柱：Agilent Eclipse Plus C
18
柱；流动相：乙腈为流动相A，0.10％
‑
0.28％磷酸溶液为流动相B，采用流动相含量及流速梯度变化洗脱；检测波长：210
‑
254nm；柱温：33
‑
37℃；进样量：5μL；
[0013]3)UPLC标准指纹图谱的制作
[0014]按步骤2)色谱条件对天麻眩晕宁颗粒对照品和供试品溶液进行分析比较，得到由样品共有特征峰构成的天麻眩晕宁颗粒UPLC标准指纹图谱。
[0015]优选地，步骤1)所述供试品溶液的制备包括以下步骤：精密称取天麻眩晕宁颗粒2.0g，置具塞锥形瓶中，加入50％甲醇，超声处理30min，放冷，补重，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。
[0016]优选地，步骤2)所述色谱柱的规格为4.6
×
150mm，粒径5μm。
[0017]优选地，步骤2)所述流动相B为0.1％磷酸溶液。
[0018]优选地，步骤2)所述流动相含量、流速梯度及曲线变化洗脱条件为：
[0019][0020][0021]优选地，步骤2)所述检测波长为230nm，柱温为35℃。
[0022]本专利技术的另一个目的，是提供所述天麻眩晕宁颗粒UPLC标准指纹图谱，将10批天麻眩晕宁颗粒样品，按上述方法制备成供试品溶液，以UPLC分离检测，使用国家药典委员会推荐的《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2012版》软件分析，得到天麻眩晕宁颗粒UPLC标准指纹图谱。
[0023]本专利技术所得到的指纹图谱有31个共有峰，以23号峰参比峰，其共有峰相对保留时间t
R
依次分别为：0.048、0.051、0.056、0.076、0.136、0.143、0.160、0.192、0.370、0.398、0.413、0.426、0.451、0.593、0.638、0.670、0.695、0.735、0.749、0.795、0.839、0.896、1.000、1.323、1.338、1.495、1.520、1.570、1.575、1.589、1.610。
[0024]通过对照品比对，其中8号峰为天麻素，15号峰为芍药苷，17号峰为阿魏酸，19号峰为甘草苷，23号峰为橙皮苷，28号峰为23
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乙酰泽泻醇C，29号峰为藁本内酯。
[0025]其中，8号峰为天麻中的成分；15号峰为白芍中的成分；17号峰为川芎中的成分；19号峰为甘草中的成分；23号峰为陈皮中的成分；28号峰为泽泻中的成分；29号峰为白术中的成分。
[0026]与现有技术对比，本专利技术取得了以下有益技术效果：
[0027]1)本专利技术首次提供了一种天麻眩晕宁颗粒UPLC指纹图谱的建立方法，根据天麻眩晕宁颗粒处方成分构成特点，优选最佳流动相组成及其梯度洗脱程序、流速、检测波长，解决了特征峰难以分开及杂质峰干扰大的难题，所得指纹图谱分离度高、峰形好，各特征峰均实现了基线分离，能更全面、准确地评价天麻眩晕宁颗粒的质量。
[0028]2)本专利技术检测方法以橙皮苷为参照峰，确定31个共有峰为构成天麻眩晕宁颗粒指纹图谱的共有峰，指纹图谱的组成更加丰富、全面；从共有峰中鉴定出天麻素，芍药苷，阿魏酸，甘草苷，橙皮苷，23
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乙酰泽泻醇C，藁本内酯，并对其进行成分归属，进一步阐明了天麻眩晕宁颗粒的化学物质基础。
[0029]3)本专利技术方法操作简单、准确可靠，具有精密度、稳定性和重复性好的特点。可克服现有技术检测指标单一、不能反映本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种天麻眩晕宁颗粒UPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于，包括下列步骤：1)对照品和供试品溶液的制备称取天麻素、芍药苷、阿魏酸、甘草苷、橙皮苷、23
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乙酰泽泻醇C、藁本内酯对照品适量，用甲醇溶解，作为对照品溶液；精密称取天麻眩晕宁颗粒2.0g，置具塞锥形瓶中，加入35％
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75％甲醇，超声处理20
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45min，放冷，补重，滤过，取续滤液，得供试品溶液；2)UPLC色谱条件的确定色谱柱：Agilent Eclipse Plus C
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柱；流动相：乙腈为流动相A，0.10％
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0.28％磷酸溶液为流动相B，采用流动相含量及流速梯度变化洗脱；检测波长：210
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254nm；柱温：33
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37℃；进样量：5μL；3)UPLC标准指纹图谱的制作按步骤2)色谱条件对天麻眩晕宁颗粒对照品和供试品溶液进行分析比较，得到由样品共有特征峰构成的天麻眩晕宁颗粒UPLC标准指纹图谱。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)所述供试品溶液的制备包括以下步骤：精密称取天麻眩晕宁颗粒2.0g，置具塞锥形瓶中，加入50％甲醇，超声处理30min，放冷，补重，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。3.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：关永霞，孙晓兰，徐丽，庄会芳，
申请(专利权)人：鲁南厚普制药有限公司，
类型：发明
国别省市：