在原核系统中同时增强目的蛋白质表达量和可溶性的方法技术方案

本发明专利技术公开了在原核系统中同时增强目的蛋白质表达量和可溶性的方法，所述方法是通过使用基于Vip3蛋白质信号肽序列或其局部序列的新型融合标签，引导目的蛋白质的表达。由这类融合标签和目的蛋白质的编码基因形成的融合基因与大肠杆菌分子伴侣Trigger factor基因或其在其他生物中的同源基因在同一原核表达系统中共表达，能增强目的蛋白质的表达量和可溶性。本发明专利技术的重要性在于发明专利技术了一类新型的融合标签，其能够显著增强目的蛋白的表达量，同时，这类标签能够与已知特定分子伴侣互作，从而在保障表达量的前提下，可预见的增强目的蛋白质的可溶性，避免了依靠对不同分子伴侣的逐一尝试，才能确定增强未知目的蛋白质可溶性的传统方案，极大地提高了效率。极大地提高了效率。极大地提高了效率。

【技术实现步骤摘要】
在原核系统中同时增强目的蛋白质表达量和可溶性的方法


[0001]本专利技术涉及生物
，具体是涉及一种在原核系统中同时增强目的蛋白质表达量和可溶性的方法。

技术介绍

[0002]在利用原核系统表达重组目的蛋白质时，为了增加目的蛋白质的可溶性，防止包涵体的形成，可以利用多种可溶性标签调节，比如MBP(maltose
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binding protein)(di Guanetal.1988；Kapust and Waugh，1999)标签，GST(glutathione
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S
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transferase)(Smith and Johnson，1988)标签、SUMO(small ubiquitin related modifier)(Butt et al.2005；Marblestone et al.2006)、NusA(N
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utilization substance)(Davis et al.1999)标签和Trx(Thioredoxin)(Lavallie et al.19本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.在原核系统中同时增强目的蛋白质表达量和可溶性的方法，其特征在于，是通过使用编码Vip3蛋白质信号肽序列或其局部序列或这些多肽序列的突变体或相应的人工模拟多肽序列的多聚核苷酸序列作为新型融合标签，与编码目的蛋白质的多聚核苷酸序列形成一个融合基因，将该融合基因与大肠杆菌分子伴侣Trigger factor基因或其突变体或该基因在其他生物中的同源基因在同一原核表达系统中共表达，能增强目的蛋白质的表达量和可溶性。2.根据权利要求1所述的在原核系统中同时增强目的蛋白质表达量和可溶性的方法，其特征在于，所述Vip3蛋白质信号肽序列的氨基酸序列如SEQ ID NO:1
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26所示，所述Vip3蛋白质信号肽序列的局部序列的氨基酸序列如SEQ ID NO:27
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32所示，编码这些多肽序列的多聚核苷酸序列可按照生物学中的遗传密码表推算。3.根据权利要求1所述的在原核系统中同时增强目的蛋白质表达量和可溶性的方法，其特征在于，所述Vip3蛋白质信号肽序列或其局部序列的突变体或相应的人工模拟多肽序列的关键突变或模拟原则是：第一是原多肽序列中的赖氨酸和精氨酸可进行互换，但这两种碱性氨基酸总体数量只可增加，不能减少，第二是指除了原来序列中相应位点的赖氨酸和精氨酸以外的其他位点的氨基酸可替换为碱性氨基酸或其他R基非疏水性氨基酸。4.根据权利要求1所述的在原核系统中同时增强目的蛋白质表达量和可溶性的方法，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：高建华，欧阳春平，赵娟丽，王兴春，
申请(专利权)人：山西农业大学，
类型：发明
国别省市：