一种同时检测药物中对甲苯亚磺酸甲酯、对甲苯亚磺酸乙酯、对甲苯亚磺酸异丙酯的方法技术

本发明专利技术提供了药物中同时检测对甲苯亚磺酸甲酯、对甲苯亚磺酸乙酯、对甲苯亚磺酸异丙酯的方法，其包括采用超高效液相色谱

【技术实现步骤摘要】
一种同时检测药物中对甲苯亚磺酸甲酯、对甲苯亚磺酸乙酯、对甲苯亚磺酸异丙酯的方法


[0001]本专利技术涉及医药
，更具体的说，是涉及药物领域中对甲苯亚磺酸甲酯、对甲苯亚磺酸乙酯、对甲苯亚磺酸异丙酯分析检测方法。

技术介绍

[0002]对甲苯亚磺酸是有机合成中的重要原料，其与工艺中微量的甲醇、乙醇、异丙醇易形成基因毒杂质对甲苯亚磺酸甲酯、对甲苯亚磺酸乙酯、对甲苯亚磺酸异丙酯，这些物质可与DNA发生烷基化反应，从而可能成为引发癌症的诱因，因此控制药物中该类杂质的毒理学关注阈值(TTC)水平非常重要。欧洲医药评价署(EMEA)、美国食品和药物管理局(FDA)、国际药品注册协调会议(ICH)都对基因毒性杂质做出限度规定，要求该类基因毒杂质必须控制在毒理学关注阈值(TTC)水平以下。其中对甲苯亚磺酸甲酯、对甲苯亚磺酸乙酯、对甲苯亚磺酸异丙酯结构如下：
[0003][0004]海博麦布公开于WO2011017907中，具有以下的结构式：
[0005][0006]海博麦布工艺过程中的中间体有可能在碱性条件下产生副产物对甲苯亚磺酸，对甲苯亚磺酸与工艺中微量的甲醇、乙醇、异丙醇有可能形成基因毒杂质对甲苯亚磺酸甲酯、对甲苯亚磺酸乙酯、对甲苯亚磺酸异丙酯。开发此方法，是为了检测海博麦布工艺的稳定性，保证产品质量。
[0007]磺酸酯类检测方法主要有气相色谱法(GC)、液相色谱法(HPLC)及其联用方法进行分析，目前主要是对磺酸酯类的检测方法较多，还未发现有对亚磺酸酯类的检测方法。本方法采用超高效液相色谱进行分离，高选择性与高灵敏度质谱进行检测对甲苯亚磺酸甲酯、对甲苯亚磺酸乙酯、对甲苯亚磺酸异丙酯，样品前处理简单，样品基质对目标峰测定无干
RRHD 50*2.1mm 1.8μm。
[0021]色谱柱的柱温为25℃～45℃，优选30℃～45℃，更优选30℃～40℃，最优选35℃。
[0022]流动相的流速为0.2mL/min～0.6mL/min，优选0.3mL/min～0.5mL/min，更优选0.3mL/min～0.4mL/min，最优选0.4mL/min。
[0023]流动相A优选0.005～0.02moL/L甲酸铵水溶液，更优选0.01moL/L甲酸铵水溶液。
[0024]所述的质谱条件为：
[0025]扫描模式：质谱多反应监测；离子源：电喷雾离子源；离子源模式：正模式；毛细管电压：0.5～3.0KV，优选1.0～2.0KV，更优选1.0KV；干燥气温度：300～650℃，优选350～600℃，更优选400～550℃，最优选500℃；干燥气流速：1000L/Hr；锥孔电压：15～40V，优选20～30V，更优选25V；源温：150℃。
[0026]所述超高效液相色谱
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质谱联用仪为Waters ACQUITY I UPLC Class
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TQ
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S micro。
[0027]本专利技术提供的超高效液相
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质谱联用检测对甲苯亚磺酸甲酯、对甲苯亚磺酸乙酯、对甲苯亚磺酸异丙酯的方法，具有以下优点：能同时检测样品中对甲苯亚磺酸甲酯、对甲苯亚磺酸乙酯、对甲苯亚磺酸异丙酯的含量；样品前处理简单，样品采用直接溶解的方式，不需要进行衍生处理；分离度好，对甲苯亚磺酸甲酯、对甲苯亚磺酸乙酯、对甲苯亚磺酸异丙酯与样品在9min实现全部有效分离；线性相关系数好，对甲苯亚磺酸甲酯、对甲苯亚磺酸乙酯、对甲苯亚磺酸异丙酯在各自的线性范围内线性相关系数r均≥0.999；灵敏度高，仪器检测定量限为1.3ng/mL，检测限为0.4ng/mL；回收率高，对甲苯亚磺酸甲酯、对甲苯亚磺酸乙酯、对甲苯亚磺酸异丙酯加标准确度回收率均在90％～110％。本方法同一个方法，对三种对甲苯亚磺酸酯同时检测，提高了检测效率，同时该方法采用高选择性与高灵敏度质谱进行检测对甲苯亚磺酸甲酯、对甲苯亚磺酸乙酯、对甲苯亚磺酸异丙酯，样品前处理简单，样品基质对目标峰测定无干扰；方法耐用性好，检测效率高等优点，目前还未发现有检测对甲苯亚磺酸酯的报道。
附图说明：
[0028]图1为本专利技术方法对甲苯亚磺酸甲酯、对甲苯亚磺酸乙酯、对甲苯亚磺酸异丙酯空白溶液超高效液相
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质谱联用图谱。
[0029]图2为本专利技术方法对甲苯亚磺酸甲酯、对甲苯亚磺酸乙酯、对甲苯亚磺酸异丙酯超高效液相
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质谱联用对照品溶液图谱。
[0030]图3为本专利技术方法对甲苯亚磺酸甲酯线性图谱。
[0031]图4为本专利技术方法对甲苯亚磺酸乙酯线性图谱。
[0032]图5为本专利技术方法对甲苯亚磺酸异丙酯线性图谱。
具体实施方式
[0033]为使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下参照附图并列举实施例，对本专利技术进一步详细说明。
[0034]以下实施例中使用的仪器与试剂：
[0035]甲醇、乙腈为市售色谱纯，甲酸铵为市售质谱纯，水为自制超纯水。检测仪器为
Waters ACQUITY I UPLC Class
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TQ
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S micro。
[0036]实施例1超高效液相
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质谱联用检测对甲苯亚磺酸甲酯、对甲苯亚磺酸乙酯、对甲苯亚磺酸异丙酯的方法
[0037](1)供试品溶液的制备
[0038]称取海博麦布样品适量用50％乙腈水溶液(V/V)溶解稀释成含有海博麦布1mg/mL的溶液，作为供试品溶液。
[0039](2)对照品储备溶液的制备
[0040]分别精密称取对甲苯亚磺酸甲酯、对甲苯亚磺酸乙酯、对甲苯亚磺酸异丙酯对照品适量，用稀释剂溶解稀释成含有对甲苯亚磺酸甲酯、对甲苯亚磺酸乙酯、对甲苯亚磺酸异丙酯浓度均为25ng/mL的对照品储备溶液。
[0041](3)超高效液相
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质谱联用法检测条件
[0042]仪器：沃特世超高效液相
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三重四级杆质谱联用仪(Waters ACQUITY I UPLC Class
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TQ
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S micro)；
[0043]色谱条件：
[0044]色谱柱：Agilent Eclipse Plus C18 RRHD 50*2.1mm 1.8μm
[0045]流速：0.4mL/min
[0046]柱温：35℃
[0047]进样量：10.μL
[0048]流动相A：0.01moL/L甲酸铵水溶液
[0049]流动相B：甲醇
[0050]稀释剂：50％乙腈水溶液(V/V)
[0051]空白溶剂：同稀释剂
[0052]梯度：
[0053]时间(min)流动相A％流动相B％0.050504.050505.010907.010907.150509.05050
[0054]质谱条件
[0055][0056](4本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种同时检测药物中对甲苯亚磺酸甲酯、对甲苯亚磺酸乙酯、对甲苯亚磺酸异丙酯的方法，其特征在于，所述方法包括：步骤1：对甲苯亚磺酸甲酯、对甲苯亚磺酸乙酯、对甲苯亚磺酸异丙酯对照品加稀释剂配制成对照品溶液；步骤2：待测样品加稀释剂配制成供试品溶液；步骤3：采用超高效液相色谱
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质谱联用仪对步骤1所述对照品溶液和步骤2所述供试品溶液进行检测，按照外标法确定样品中对甲苯亚磺酸甲酯、对甲苯亚磺酸乙酯、对甲苯亚磺酸异丙酯的含量；其中，步骤3所述超高效液相色谱的色谱条件为：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱；流动相：流动相A为0.002～0.05moL/L甲酸铵水溶液，流动相B为甲醇；流动相的洗脱方式为梯度洗脱，所述梯度洗脱的程序如下表：时间(min)流动相A％流动相B％0.050504.050505.010907.010907.150509.050502.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述药物选自工艺中使用对甲苯亚磺酸及微量甲醇、乙醇、异丙醇的药物，优选海博麦布。3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，步骤1或步骤2中所述的稀释剂为10％～90％乙腈水溶液(V/V)，优选30％～70％乙腈水溶液(V/V)，更优选40％～60％乙腈水溶液(V/V)，最优选50％乙腈水溶液(V/V)。4.如权利要求1
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3任一项所述的方法，其特征在于，步骤3中所述十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱的柱径为2.1mm～4.6mm、柱长为50mm～150mm、粒径为1.6μm～3.5μm；优选十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱的柱径为2.1mm～3.5mm、柱长为50mm～100mm、粒径为1.6μm～2.5μm；更优选十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱的柱径为2.1mm～3.0mm、柱...

【专利技术属性】
技术研发人员：邵伍军，和燕玲，李春燕，杨荷友，袁红露，周雪飞，郭红兵，朱磊，
申请(专利权)人：浙江海正药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：