一种从庆大霉素B菌株制备硫酸异帕米星的方法技术

本发明专利技术公开了一种自庆大霉素B菌株制备异帕米星的方法，包括以下步骤：将庆大霉素B菌株制成孢子悬浮液，接种于种子培养基中，33～37℃下摇床培养2～4天；将种子培养基接种于发酵罐里的发酵培养基中，33～37℃下发酵培养5～6天；发酵液经提取纯化后得到庆大霉素B。庆大霉素B上的羟基、氨基先经保护剂保护后再与侧链活性酯N

【技术实现步骤摘要】
一种从庆大霉素B菌株制备硫酸异帕米星的方法


[0001]本专利技术属于生物制药
，尤其涉及一种从庆大霉素B菌株制备硫酸异帕米星的制备方法。

技术介绍

[0002]庆大霉素B是一种氨基糖苷类抗生素，是通过绛红小单孢菌 (Micromonospora purpurea)发酵生产的，而庆大霉素B是在庆大霉素产生菌发酵过程中产生的中间代谢产物，目前国内外生产庆大霉素B的菌种是通过菌种突变筛选获得的。
[0003]硫酸异帕米星(isepamicin)结构式见下式,是由日本旭化成制药株式会社和美国先令公司共同研发的半合成氨基糖苷类抗生素,是在庆大霉素 B(gentamicin B)的1位氨基上引入异丝氨酸所得，称为1
‑
N[(S)
‑3‑
氨基
‑2‑ꢀ
羟基丙酰基]庆大霉素B(1
‑
N
‑
HAPA gentamicin B),临床所用为其硫酸盐。硫酸异帕米星为第3代氨基糖苷类抗生素,具有强效杀菌活性、耐药性低、不良反应小以及良好的抗生素后效应等优势,临床用本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种从庆大霉素B菌株制备硫酸异帕米星的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤(1)：将庆大霉素B菌株制成孢子悬浮液，接种于种子培养基中，33～37℃下摇床220～280rpm培养2～4天；步骤(2)：将种子培养基接种于发酵罐里的发酵培养基中，33～37℃下发酵5～6天，发酵完成后放罐，提取发酵液；步骤(3)：向发酵液中加酸使其pH值为1.5～3，搅拌2～3小时，再向发酵液中加碱使其pH值为7～9，搅拌0.5～1小时，并向发酵液中加入阳离子交换树脂，树脂添加量为庆大霉素B发酵总重量的40～60倍，搅拌吸附10～16小时，至液相跟踪监测发酵液中无庆大霉素B单位；步骤(4)：将吸附完成的树脂经漂洗后装柱，水洗后用浓氨水解析；步骤(5)：氨水解析液通过浓缩后，用酸调节pH值为6～7，通过阳离子树脂进行柱分离，再用稀氨水进行解析，收集庆大霉素B组分段；步骤(6)：将收集到的庆大霉素B组分段浓缩、结晶，得到庆大霉素B；步骤(7)：以庆大霉素B为起始原料，加入保护剂，得到中间体；步骤(8)：中间体再与侧链活性酯进行反应，形成粗品异帕米星；步骤(9)：粗品异帕米星经过脱保护及精制，得到硫酸异帕米星成品。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中所述种子培养基的组成为：玉米淀粉1～3g/L，黄豆饼粉1～3g/L，葡萄糖0.1～0.5g/L，干酵母1～2g/L，大豆蛋白胨0.2～0.5g/L，硝酸钾0.01～0.1g/L，硫酸铵0.01～0.1g/L，碳酸钙0.1～0.5g/L。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中所述发酵培养基的组成为：玉米淀粉5～10g/L，黄豆饼粉3～5g/L，大豆蛋白胨0.1～1g/L，氯化钴0.1～0.5g/L，硫酸亚铁0.001～0.01g/L，硫酸镁0.1～1g/L，氯化钠0.001～0.005g/L，碳酸钙0.1～0.5...

【专利技术属性】
技术研发人员：游云龙，付静，金丹甜，史佳栋，张莹，张谨成，
申请(专利权)人：无锡福祈制药有限公司，
类型：发明
国别省市：