一种哈氏方口鲃的人工催产和孵化方法技术

本发明专利技术公开了一种哈氏方口鲃的人工催产和孵化方法，包括如下步骤：步骤S1.亲本选择：选择性成熟的繁殖亲鱼，将雌性哈氏方口鲃和雄性哈氏方口鲃分开暂养于水池中；步骤S2.人工催产：分别给雌性哈氏方口鲃和雄性哈氏方口鲃注射缓释催产剂，所述缓释催产剂包括PG、HCG、牡丹皮提取物、聚乙丙交酯；步骤S3.人工受精：完成人工催产后，将雌性哈氏方口鲃、雄性哈氏方口鲃进行流水刺激，观察雌性哈氏方口鲃雌、雄性哈氏方口鲃活动情况，当雄性哈氏方口鲃追尾雌性哈氏方口鲃且水体中有卵粒出现时开始进行人工授精，得受精卵；步骤S4.人工孵化：调节水温、pH、溶解氧、水流速度，将受精卵进行孵化。该方法可以有效的减短催产剂的效发时间，减少注射次数、减轻对鱼的刺激，提高受精率和孵化率。孵化率。

【技术实现步骤摘要】
一种哈氏方口鲃的人工催产和孵化方法


[0001]本专利技术属于水产养殖领域，尤其涉及一种哈氏方口鲃的人工催产和孵化方法。

技术介绍

[0002]哈氏方口鲃属于鲤科，是一种澜沧江珍稀濒危土著鱼。哈氏方口鲃肉质细嫩、味道鲜美、营养价值高、具有较高的经济价值，目前哈氏方口鲃仅在云南省内有极少量人工养殖，人工繁殖技术难度大，主要原因在于雌性哈氏方口鲃排卵量少，雄性哈氏方口鲃排精量少且持续排精时间短，影响到受精质量。
[0003]目前，针对鱼类雌性排卵量少或雄性排精量少的问题，通常采用注射催产剂进行催产。常用的催产剂包括鲤鱼、鲫鱼脑垂体(PG)，绒毛膜促性腺激素(HCG)，促黄体素释放激素类似物(LRH
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A)，地欧酮(DOM)，利血平(RES)等。但现有催产剂的药效的效发时间长，效发时间通常需要十几个小时，且这些激素类似物制成的催产剂在体内会很快被代谢清除，对鱼类直接注射催产剂会出现药效的效发时间还没到，大部分催产剂在体内被代谢清除，需反复注射，对鱼刺激大，也浪费药品。

技术实现思路

[0004]针对上述现有技术中的不足，本专利技术的目的在于提供一种哈氏方口鲃的人工催产和孵化方法，该方法可以有效的减短催产剂的效发时间，提高受精效率，减少注射次数、减轻对鱼的刺激、节约药品，提高受精率和孵化率，实现哈氏方口鲃的规模化人工繁殖，促进哈氏方口鲃养殖业的发展。
[0005]一种哈氏方口鲃的人工催产和孵化方法，包括如下步骤：
[0006]步骤S1.亲本选择：选择性成熟的繁殖亲鱼，将雌性哈氏方口鲃和雄性哈氏方口鲃分开暂养于水池中；
[0007]步骤S2.人工催产：分别给雌性哈氏方口鲃和雄性哈氏方口鲃注射缓释催产剂，所述缓释催产剂包括PG、HCG、牡丹皮提取物、聚乙丙交酯；
[0008]步骤S3.人工受精：完成人工催产后，将雌性哈氏方口鲃、雄性哈氏方口鲃进行流水刺激，观察雌性哈氏方口鲃雌、雄性哈氏方口鲃活动情况，当雄性哈氏方口鲃追尾雌性哈氏方口鲃且水体中有卵粒出现时开始进行人工授精，得受精卵；
[0009]步骤S4.人工孵化：调节水温、pH、溶解氧、水流速度，将受精卵进行孵化。
[0010]本专利技术通过给雌性和雄性哈氏方口鲃注射缓释催产剂，缓释催产剂可以提高雌性哈氏方口鲃排卵量和雄性哈氏方口鲃排精量，延长雄性哈氏方口鲃排精时间，且无需对缓释催产剂进行多次注射，减轻对哈氏方口鲃的刺激、节约药品。
[0011]牡丹皮又名丹皮、粉丹皮、条丹皮、木巧药，是毛食科芍药属植物牡丹化的干燥根皮。牡丹皮提取物中含有酚及酚苷类、单萜及苷类化合物、三萜、甾醇及其苷类、其他成分，其他成分包括槲皮素、6
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羟基香豆素、没食子酸、苯甲酸、对羟基苯甲酸、反式咖啡酸硬脂酸酯及腺苷等。
[0012]聚乙丙交酯(PLGA)，又名聚乳酸
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羟基乙酸共聚物、聚乳酸
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乙醇酸共聚物。由两种单体乳酸和羟基乙酸无规聚合而成，是一种可降解的功能高分子有机化合物，具有良好的生物相容性、无毒、良好的成囊和成膜的性能，PLGA的降解产物是乳酸和羟基乙酸，所以当它应用在医药和生物材料中时不会有毒副作用，可用于制备缓释制剂。
[0013]PG和HCG均为糖蛋白激素，分子链上含有羟基、氨基、羧基，专利技术人在实验中意外发现，牡丹皮提取物和聚乙丙交酯的加入可以使缓释催产剂的药效的效发时间减短，可能的原因是牡丹皮提取物和聚乙丙交酯分子链上的极性基团与PG和HCG分子链上含有羟基、氨基、羧基发生作用，使PG和HCG的药效的效发时间减短，提高受精率和孵化率。
[0014]聚乙丙交酯与牡丹皮提取物、PG和HCG存在着静电作用、体积排除作用、氢键作用等，使得制备得到的缓释催产剂具有良好的缓释效果，使PG和HCG在体内不易被代谢清除，减少注射催产剂的次数、减轻对鱼的刺激。
[0015]优选地，步骤S1中，所述水池中的温度为24
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28℃，溶解氧保持在8mg/L以上，水流速度为0.2
‑
0.6m/s。
[0016]优选地，步骤S2中，所述聚乙丙交酯的数均分子量为80000
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100000g/mol。当聚乙丙交酯的数均分子量小于80000g/mol时，缓释速率过快，起不到很好的缓释效果；当聚乙丙交酯的数均分子量大于100000g/mol时，缓释速率过快，起不到很好的缓释效果缓释速度太慢，不能有效的减短催产剂的效发时间。
[0017]优选地，步骤S2中，所述牡丹皮提取物的提取方法包括如下步骤：
[0018]取牡丹皮粉碎，加入水，回流提取，趁热过滤得牡丹皮提取物。
[0019]本方案通过水提取得到的牡丹皮提取物用于制备缓释催产剂的缓释效果和催产效果更好，可能的原因是用水提取牡丹皮所得到的牡丹皮提取物与聚乙丙交酯、PG和HCG的相互作用强。
[0020]优选地，步骤S2中，所述缓释催产剂由PG、HCG、牡丹皮提取物、聚乙丙交酯与质量分数为0.5％的生理盐水配制而成。
[0021]优选地，所述PG、HCG、牡丹皮提取物、聚乙丙交酯在生理盐水中的浓度分别为PG 2～4mg/g、HCG 100～300IU/g、牡丹皮提取物4～8μg/g、聚乙丙交酯4～8mg/g。
[0022]优选地，每公斤雌性亲鱼注射0.5
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1g的缓释催产剂，每公斤雄性亲鱼注射0.25
‑
0.5g的缓释催产剂。
[0023]优选地，步骤S3中，所述流水的水流速度为0.4
‑
0.6m/s。
[0024]优选地，步骤S3中，所述人工授精的方法为将雌性鱼卵和雄性精液分别挤出，向精液中加入生理盐水，将精液与生理盐水混合液与卵混合，搅拌，加水，搅拌后静置。
[0025]优选地，步骤S4中，所述水温为24
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28℃、pH为6.8
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8.0、溶解氧保持在8mg/L以上、水流速度为0.2
‑
0.4m/s。
具体实施方式
[0026]为了使本
的人员更好地理解本专利技术中的技术方案，下面将结合本专利技术实施例对本专利技术的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本专利技术保护的范围。
[0027]实施例1：牡丹皮提取物的制备。
[0028]取50kg牡丹根皮粉碎，后过80目筛备用。取过筛后的牡丹根皮细粉加入水，在温度90
‑
100℃下回流提取24h。提取完毕后，将提取液用旋转蒸发器减压浓缩，得到牡丹皮提取物，避光保存。
[0029]实施例2：一种哈氏方口鲃的人工催产和孵化方法。
[0030]步骤S1.亲本选择：选择性成熟的繁殖亲鱼，将雌性哈氏方口鲃和雄性哈氏方口鲃分开暂养于水池中，水池中的温度本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种哈氏方口鲃的人工催产和孵化方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤S1.亲本选择：选择性成熟的繁殖亲鱼，将雌性哈氏方口鲃和雄性哈氏方口鲃分开暂养于水池中；步骤S2.人工催产：分别给雌性哈氏方口鲃和雄性哈氏方口鲃注射缓释催产剂，所述缓释催产剂包括PG、HCG、牡丹皮提取物、聚乙丙交酯；步骤S3.人工受精：完成人工催产后，将雌性哈氏方口鲃、雄性哈氏方口鲃进行流水刺激，观察雌性哈氏方口鲃雌、雄性哈氏方口鲃活动情况，当雄性哈氏方口鲃追尾雌性哈氏方口鲃且水体中有卵粒出现时开始进行人工授精，得受精卵；步骤S4.人工孵化：调节水温、pH、溶解氧、水流速度，将受精卵进行孵化。2.如权利要求1所述的哈氏方口鲃的人工催产和孵化方法，其特征在于，步骤S1中，所述水池中的温度为24
‑
28℃，溶解氧保持在8mg/L以上，水流速度为0.2
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0.6m/s。3.如权利要求1所述的哈氏方口鲃的人工催产和孵化方法，其特征在于，步骤S2中，所述聚乙丙交酯的数均分子量为80000
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100000g/mol。4.如权利要求1所述的哈氏方口鲃的人工催产和孵化方法，其特征在于，步骤S2中，所述牡丹皮提取物的提取方法包括如下步骤：取牡丹皮粉碎，加入水，回流提取，趁热过滤得牡丹皮提取物。5.如权利要求1所述的哈氏方口鲃的人工催产和孵化方法，其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员：王敏奇，王云清，李燕，李怡凌，石凤德，黄绍刚，普忠南，
申请(专利权)人：西双版纳云博水产养殖开发有限公司，
类型：发明
国别省市：