一对用于罗非鱼耐低温性状相关的微卫星标记的检测引物制造技术

本发明专利技术属于鱼类养殖技术领域，涉及一对用于罗非鱼耐低温性状相关的微卫星标记的检测引物。本发明专利技术提供了一对与罗非鱼耐低温性状相关的微卫星标记的检测引物，所述检测引物核苷酸序列如SEQ ID NO 1和2所示。利用分子标记SSR613719设计的引物，筛选微卫星标记SSR613719基因型为lm的作为亲本的基因型，进而选择耐寒性能更强的个体。利用本发明专利技术的微卫星标记可以快速鉴定并筛选耐寒性能好的罗非鱼亲鱼，从而有助于解决耐寒罗非鱼传统育种中育种周期长、成本高等问题，进而促进耐寒罗非鱼的发展。鱼的发展。鱼的发展。

【技术实现步骤摘要】
一对用于罗非鱼耐低温性状相关的微卫星标记的检测引物


[0001]本专利技术属于鱼类养殖
，具体地，涉及一对用于罗非鱼耐低温性状相关的微卫星标记的检测引物。

技术介绍

[0002]罗非鱼(Oreochromisspp)是世界上最重要的经济鱼类之一，预计2017年产量约为640万吨。中国的罗非鱼产量居世界首位。中国常见养殖罗非鱼有尼罗罗非鱼(Oreochromisniloticus)来源的不同品系、蓝罗非鱼(Oreochromisaureus)、莫桑比克罗非鱼(Oreochromismossambicus)和红罗非鱼，此外还有许多杂交品系。
[0003]罗非鱼原产于热带和亚热带地区，不耐低温。在中国，低温对罗非鱼养殖的影响很大；不耐低温的特点限制了罗非鱼的养殖面积。冬季低温和寒潮常常导致罗非鱼大量死亡造成显著的经济损失。通过提高罗非鱼抗寒性能，不仅可以延长其生长周期、降低越冬死亡率，而且可以减少养殖成本、扩大养殖面积，从而促进行业的可持续性发展(Li SF,Li CH,Dey M,Gagalac F,Dunham R(2002)Cold tolerance of three strains of Nile tilapia,Oreochromisniloticus,in China.Aquaculture,213,123
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129)。
[0004]现有技术中，针对罗非鱼耐寒性能的研究也有不少。通过不同方法和对不同群体的研究发现：罗非鱼的致死温度是有差异的，常见的不同罗非鱼养殖品种存在耐寒性能的差异。对尼罗罗非鱼三个品系的研究发现，吉富罗非鱼死亡温度范围为11℃～8.4℃，“78”品系为9.8℃～7.4℃，“88”品系为11℃～7.4℃；通过五个品系罗非鱼耐寒能力的试验发现：美国奥利亚罗非鱼的耐寒能力最强，极显著高于埃及品系、泰国品系和吉富品系，其中，吉富罗非鱼的耐寒性最低；在尼罗罗非鱼5个品系的耐寒性能比较中发现，耐寒能力高低为：埃及品系＞广东品系＞美国品系＞泰国品系＞吉富品系，半致死温度分别为8.86、9.30、9.39、9.57和10.13℃(林勇,卢其西,杨慧赞,陈忠,黄姻,甘西,曾兰,唐章生(2011)八种品系罗非鱼及其尼奥罗非鱼耐寒性能的比较试验.华北农学报,26,278
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282.)；对吉富罗非鱼采用不同速率降温处理，发现半致死低温随降温速率加快而降低(马旦梅,程光平,喻海燕,邓荣志(2010)吉富罗非鱼对不同降温速率胁迫的死亡反应研究.广西畜牧兽医,26,200
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203.)；低温胁迫试验发现美国品系、夏奥1号和广东品系的奥利亚罗非鱼耐寒性能有显著差异，半致死温度分别为7.82、8.22、8.44℃；连续三年观测发现，“新吉富”罗非鱼开始死亡和100％死亡的水温为11℃、5.8℃，“吉丽”罗非鱼为12℃、9.2℃，萨罗罗非鱼为13.8℃、12.4℃(王兵,李思发,蔡完其(2011)“新吉富”罗非鱼、“吉丽”罗非鱼及萨罗罗非鱼耐寒力的测定.上海海洋大学学报,20,499
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503.)；使用尼罗罗非鱼三个品系为母本，奥里亚罗非鱼为父本，杂交获得的子一代中，埃奥鱼(奥利亚罗非鱼x埃尼尼罗罗非鱼)、湘奥鱼(奥利亚罗非鱼x湘湖尼罗罗非鱼)和吉奥鱼(奥利亚罗非鱼x吉富尼罗罗非鱼)半致死低温分别为：8.63℃、8.23℃、7.60℃(王茂元,钟全福,田田,吴妹英,胡振禧(2016)不同杂交罗非鱼F_1代耐寒性能的研究.福建农业学报,31,849
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852.)；Harrison等人对尼罗罗非鱼研究发现，其在13.68℃时开始死亡，而8.68℃时全部死亡。鱼的体重和行为与耐寒性之间存在显
著相关性(Charo
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Karisa H,Rezk MA,Bovenhuis H,Komen H(2005)Heritability of cold tolerance in Nile tilapia,Oreochromisniloticus,juveniles.Aquaculture,249,115
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123.)。
[0005]目前，已在一个尼罗罗非鱼与莫桑比克罗非鱼的杂交子代F2当中鉴定了与耐寒相关的位于23号连锁群上的微卫星标记UNH879(Cnaani A,Hallerman EM,Ron M,Weller JI,Indelman M,Kashi Y,Gall GAE,Hulata G(2003)Detection of achromosomal region with two quantitative trait loci,affecting cold tolerance and fish size,in an F
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2tilapia hybrid.Aquaculture,223,117
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128.)。在杂交罗非鱼(O.mossambicusxO.aureus)x(O.niloticusx Sarotherodongalilaeus)的家系当中，使用微卫星和AFLP标记鉴定了位于23号连锁群上的耐寒性状相关的QTL(Moen T,Agresti JJ,Cnaani A,Moses H,Famula TR,Hulata G,Gall GAE,May B(2004)Agenome scan of a four
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way tilapia cross supports the existence of a quantitative trait locus for cold tolerance on linkage group 23.Aquaculture Research,35,893
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904.)。在一个尼罗罗非鱼家系当中鉴定到两个微卫星标记(UNH916和UNH999)与耐寒性状共分离(Zhu HP,Liu ZG,Lu MX,Gao FY,Ke XL,Huang ZH(2015)Screening and identification of microsatellite markers associated with cold tolerance in Nile tilapia(Oreochromisniloticus).Genetics and Molecular Research,14,10308
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10314.)。但是，目前鉴定的耐寒性状相关QTL未在其他群体中进行验证，且区间较大，难以有效应用于不同品系罗非鱼的育种。罗非鱼品系之间存在差异，不同群体的耐低温QTL和性状关联分子标记也存在差异，因此，十分有必要针对不同品系的罗非鱼进行耐低温QTL和性状关联分子标记的鉴定，为耐低温罗非鱼的分子辅助育种提供支持。

技术实现思路

[0006]本专利技术要解决的技术问题是克服现有罗非鱼耐低温性状相关分子标记辅助育种的不足，提供一对用于罗非鱼耐低温性状相关的微卫星标记的检测引物。本研究旨在通过基因组手段，鉴定罗非鱼耐本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一对用于罗非鱼耐低温性状相关的微卫星标记的检测引物，其特征在于，所述检测引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1和2所示。2.权利要求1所述检测引物在鉴定罗非鱼耐低温性状相关的微卫星标记中的应用。3.权利要求1所述检测引物在制备鉴定罗非鱼耐低温性状相关的微卫星标记的试剂盒中的应用。4.根据权利要求2或3所述应用，其特征在于，所述罗非鱼为吉富罗非鱼。5.一种检测罗非鱼耐低温性状相关的微卫星标记的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述的检测引物。6.根据权利要求5所述试剂盒，其特征在于，还含有PCR试剂、PAGE胶电泳试剂和银染显色试剂。7.根据权利要求6所述试剂盒，其特征在于，所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：夏军红，李碧君，朱宗贤，林翊隆，艾春晖，王振斌，刘小燕，
申请(专利权)人：湖南银鱼农业科技有限公司，
类型：发明
国别省市：