一种Rad51抑制剂及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种Rad51抑制剂及其应用。所述Rad51抑制剂包括Nanog蛋白。本发明专利技术首次发现Nanog蛋白能够抑制Rad51，包括与Rad51间具有强相互作用亲和力，抑制Rad51与单链DNA(ssDNA)结合，进一步抑制Rad51修复DNA损伤的功能，表明Nanog蛋白可作为一种新型Rad51抑制剂，在制备药物领域也具有广阔应用前景。在制备药物领域也具有广阔应用前景。在制备药物领域也具有广阔应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种Rad51抑制剂及其应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，涉及一种Rad51抑制剂及其应用。

技术介绍

[0002]化疗是恶性肿瘤的主要治疗手段之一，主要通过在癌症细胞内部产生DNA损伤来导致癌症细胞的死亡。然而，很多癌症病人体内Rad51重组酶呈现高表达，由于Rad51是介导同源重组(HR)无差错修复DNA损伤信号通路的关键因子，因此它的高表达提高了对放化疗所造成的DNA损伤的修复，从而抑制癌症细胞的死亡，这些病人呈现明显的放化疗不敏感性，治疗效果差。因此，开发针对Rad51的抑制剂对于提高癌症化疗治疗的有效性具有重要意义。
[0003]目前已有报道的Rad51的抑制剂主要是合成类小分子化合物，包括B02、DIDS、CSB、IBR2、RI
‑
1、Halenaquinone和RS
‑
1等，如CN111263756A公开了一种RAD51的抑制剂，并将其用于治疗或预防涉及线粒体缺陷的病症，尽管市面上已经存在多种Rad51的抑制剂，但是和放化疗结合应用到癌症治疗的还未见报道，原因在于这些合成类抑制剂普遍存在稳定性差、潜在的毒性强等问题。
[0004]综上所述，如何提供一种具备高稳定性和低毒性的Rad51抑制剂，是肿瘤化疗领域亟需解决的问题之一。

技术实现思路

[0005]针对现有技术的不足和实际需求，本专利技术提供一种Rad51抑制剂及其应用，本专利技术首次发现Nanog蛋白能够抑制Rad51修复DNA损伤，在肿瘤放化疗领域具有广泛应用前景。
[0006]为达上述目的，本专利技术采用以下技术方案：
[0007]第一方面，本专利技术提供一种Rad51抑制剂，所述Rad51抑制剂包括Nanog蛋白。
[0008]本专利技术中，首次发现Nanog蛋白能够抑制Rad51，包括与Rad51间具有强相互作用亲和力，抑制Rad51与单链DNA(ssDNA)结合，进一步抑制Rad51修复DNA损伤的功能，表明Nanog蛋白可作为一种新型Rad51抑制剂，因此，在制备药物领域也具有广阔应用前景。
[0009]本专利技术中，所述Nanog蛋白的氨基酸序列包括SEQ ID NO.1所示的序列。
[0010]SEQ ID NO.1：
[0011]MSVGLPGPHSLPSSEEASNSGNASSMPAVFHPENYSCLQGSATEMLCTEAASPRPSSEDLPLQGSPDSSTSPKQKLSSPEADKGPEEEENKVLARKQKMRTVFSQAQLCALKDRFQKQKYLSLQQMQELSSILNLSYKQVKTWFQNQRMKCKRWQKNQWLKTSNGLIQKGSAPVEYPSIHCSYPQGYLVNASGSLSMWGSQTWTNPTWSSQTWTNPTWNNQTWTNPTWSSQAWTAQSWNGQPWNAAPLHNFGEDFLQPYVQLQQNFSASDLEVNLEATRESHAHFSTPQALELFLNYSVTPPGEI。
[0012]根据本专利技术，所述Nanog蛋白抑制Rad51与ssDNA结合。
[0013]根据本专利技术，所述Nanog蛋白抑制Rad51修复双链DNA损伤。
[0014]第二方面，本专利技术提供Nanog蛋白在以非疾病诊断为目的的抑制Rad51修复双链
DNA损伤中的应用。
[0015]本专利技术首次发现Nanog蛋白能够抑制Rad51修复DNA损伤的功能，表明Nanog蛋白可广泛应用于需要抑制Rad51修复双链DNA损伤的过程中，如双链DNA损伤修复机制的研究中等。
[0016]第三方面，本专利技术提供Nanog蛋白在制备Rad51抑制剂中的应用。
[0017]第四方面，本专利技术提供Nanog蛋白在制备治疗肿瘤药物中的应用。
[0018]优选地，所述药物包括用于肿瘤放化疗的药物。
[0019]本专利技术发现Nanog蛋白能够抑制Rad51修复DNA损伤的功能，表明其可用于开发提升恶性肿瘤放化疗效果的药物。
[0020]第五方面，本专利技术提供一种药物组合物，所述药物组合物包括Nanog蛋白。
[0021]优选地，所述药物组合物还包括辅料。
[0022]优选地，所述辅料包括药学可接受的载体、稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、乳化剂、助溶剂、增溶剂、渗透压调节剂、表面活性剂、包衣材料、着色剂、pH调节剂、抗氧剂、抑菌剂或缓冲剂中的任意一种或至少两种的组合。
[0023]优选地，所述药物组合物的剂型包括混悬剂、颗粒剂、胶囊剂、散剂、片剂、乳剂、溶液剂、滴丸剂或注射剂中的任意一种。
[0024]与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：
[0025]本专利技术首次发现Nanog蛋白能够抑制Rad51，包括与Rad51间具有强相互作用亲和力，抑制Rad51与单链DNA(ssDNA)结合，进一步抑制Rad51修复DNA损伤的功能，表明Nanog蛋白可作为一种新型Rad51抑制剂，在制备药物领域也具有广阔应用前景。
附图说明
[0026]图1为Nanog与Rad51蛋白纯化结果图；
[0027]图2为Nanog与Rad51蛋白的GST pull down实验结果图；
[0028]图3为EMSA实验结果图；
[0029]图4为Western blotting实验结果图；
[0030]图5为Western blotting实验结果定量统计学分析结果图。
具体实施方式
[0031]为进一步阐述本专利技术所采取的技术手段及其效果，以下结合实施例和附图对本专利技术作进一步地说明。可以理解的是，此处所描述的具体实施方式仅仅用于解释本专利技术，而非对本专利技术的限定。
[0032]实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件，或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可通过正规渠道商购买获得的常规产品。
[0033]实施例1
[0034]本实施例证明Nanog能够和Rad51直接相互作用。
[0035]在原核表达载体上分别构建Nanog(GST标签)以及Rad51(His标签)的克隆，将Rad51(融合有GST标签)和Nanog(融合有His标签)分别构建到PET30a和pGEX6p
‑
1表达载体
中，并将构建好的质粒转入BL21蛋白表达大肠杆菌中，诱导蛋白表达并纯化，结果如图1所示(相应大小的蛋白条带用“*”标出)，用纯化得到的蛋白进行GST融合蛋白沉降(GST pull down)实验，将10μg融合有GST标签的Nanog蛋白和GST蛋白质(对照)分别和10μg的融合有His标签的Rad5蛋白混合，反应体系补齐至500μL，取1％反应体系混合液作为Input，留样检测，16℃摇床(120r/min)孵育18小时。
[0036]GST pull down实验结果如图2所示，其中“*”标记为融合有GST本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种Rad51抑制剂，其特征在于，所述Rad51抑制剂包括Nanog蛋白。2.根据权利要求1所述的Rad51抑制剂，其特征在于，所述Nanog蛋白的氨基酸序列包括SEQ ID NO.1所示的序列。3.根据权利要求1或2所述的Rad51抑制剂，其特征在于，所述Nanog蛋白抑制Rad51与ssDNA结合。4.根据权利要求1
‑
3任一项所述的Rad51抑制剂，其特征在于，所述Nanog蛋白抑制Rad51修复双链DNA损伤。5.Nanog蛋白在以非疾病诊断为目的的抑制Rad51修复双链DNA损伤中的应用。6.Nanog蛋白在制备Rad51抑制剂中的应用。7.Nanog蛋...

【专利技术属性】
技术研发人员：张玮玮，吴亚红，辛颖，
申请(专利权)人：首都师范大学，
类型：发明
国别省市：