一种同义突变结合删除突变的流感病毒的致弱方法及致弱流感病毒株和应用技术

本发明专利技术涉及一种同义突变结合删除突变的流感病毒的致弱方法及致弱流感病毒株和应用，属于致弱病毒疫苗技术领域。本发明专利技术所述致弱方法包括以下步骤：对A型流感病毒M基因中M2基因和M1基因重叠的部分进行同义突变，保证M1氨基酸序列的完整和不变，同时，在M2基因跨膜区进行终止密码子突变和删除部分核苷酸序列，利用反向遗传操作系统，拯救出致弱流感病毒株。本发明专利技术所述致弱方法获得的病毒增殖过程稳定，没有回复野生型的可能性；高剂量接毒时可以在MDCK细胞中生长繁殖，具有限制性复制能力；安全性佳，免疫效果好，可以作为减毒活疫苗候选株。株。株。

【技术实现步骤摘要】
一种同义突变结合删除突变的流感病毒的致弱方法及致弱流感病毒株和应用


[0001]本专利技术涉及致弱病毒疫苗
，具体涉及一种同义突变结合删除突变的流感病毒的致弱方法及致弱流感病毒株和应用。

技术介绍

[0002]流感病毒属于正黏病毒科单股负链分节段RNA病毒，拥有高度的遗传漂变，几乎每年都会暴发，导致需要每年度根据当季流行的毒株进行疫苗生产研发。流感病毒减毒活疫苗生产快速方便，相比灭活疫苗能够产生黏膜免疫，阻止病毒感染和传播。
[0003]流感病毒是一种分截段的负链RNA病毒，其基因组主要包含PB1，PB2，PA，HA，NP，NA，M和NS八个片段。其中M基因通过可变剪接编码M1和M2两种蛋白。M1是病毒的结构蛋白，形成病毒囊膜下的蛋白包膜层，与病毒组装和出芽有关。M2蛋白在甲型流感中高度保守，M2蛋白具有离子通道活性，在病毒生命周期的早期阶段，即病毒渗透和脱膜阶段起作用，并且参与病毒组装和形态形成，可以作为病毒致弱的研究点。但目前针对M基因仍缺少高效的流感病毒致弱方法。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种同义突变结合删除和突变的流感病毒的致弱方法，其特征在于，包括以下步骤：对A型流感病毒M基因中M2基因和M1基因重叠的部分进行同义突变，保证M1氨基酸序列的完整和不变，同时，在M2基因跨膜区进行终止密码子突变和删除部分核苷酸序列，利用反向遗传操作系统，拯救出致弱流感病毒株。2.根据权利要求1所述的致弱方法，其特征在于，所述致弱方法的背景毒株包括A/Puerto Rico/8/1934。3.根据权利要求1所述的致弱方法，其特征在于，所述同义突变包括将M基因的第715位碱基到第760位碱基突变为如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。4.根据权利要求1所述的致弱方法，其特征在于，所述终止密码子突变包括将M基因的第761位碱基到第766位碱基突变为如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。5.根据权利要求1所述的致弱方法，其特征在于，所述删除部分核苷酸序列包括：删除M基因第767位碱基到第877位碱基任意位置和长度的核苷酸序...

【专利技术属性】
技术研发人员：毛水花，周孟云，陈瑞婷，刘晓菲，宋家升，
申请(专利权)人：浙江迪福润丝生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：