一种健肠止泻合剂的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种健肠止泻合剂的检测方法，所述健肠止泻合剂由炒白术、炒白芍、山药、炒防风、泽泻、炒陈皮、炒白扁豆、黄连、干姜、乌药、乌梅制成，通过多检测波长液相色谱法确定健肠止泻合剂中的指标药物：白芍、陈皮及黄连，并使用以下检测方法实现定性定量检测，主要包括：采用薄层硅胶色谱法对白芍、陈皮、黄连的鉴别，以及通过高效液相色谱法对健肠止泻合剂中芍药苷、橙皮苷以及盐酸小檗碱的含量进行测定，上述检测方法精确度高、重复性好，可有效检测健肠止泻合剂中的特征性指标成分，以应用于相关制剂的质量分析和控制。相关制剂的质量分析和控制。相关制剂的质量分析和控制。

【技术实现步骤摘要】
一种健肠止泻合剂的检测方法


[0001]本专利技术涉及中药制剂的检测方法，具体涉及一种健肠止泻合剂的检测方法。

技术介绍

[0002]肠易激综合征(IBS)是一种常见的慢性消化系统功能性疾病，其临床表现为与排便相关的反复腹痛，腹痛伴粪便性状异常和排便习惯改变。IBS女性患病率(10.2％)高于男性(8.8％)，患病平均年龄40岁，全球范围内IBS每年患病率为11.2％。IBS的病因和发病机制还不十分清楚，目前的研究认为可能是胃肠功能紊乱、精神因素、免疫功能缺陷、肠道感染和肠道菌群紊乱等因素共同作用的结果。临床上常用肠道运动调节剂、抗生素、止泻剂或调节饮食进行治疗，但长期服用副作用大、停药后病情容易反复、久治不愈，严重影响患者的生活质量。中药常通过多组分、多靶点多效应起效，治疗IBS的临床效果显著。
[0003]痛泻要方出自《景岳全书》，由炒白术、炒白芍、陈皮和炒防风4味中药组成，是治疗肝郁脾虚、腹痛泄泻的代表方剂。为进一步提高方剂的功效，结合长期临床应用情况，在上述方剂中加入淮山药、炒白扁豆、泽泻、黄连、干姜、乌药、乌梅7味药组成健肠I号(即健肠止泻)方，具有加强补脾泻肝功效的同时，兼顾清热利湿、收涩止泻，在临床治疗腹泻型肠易激综合征上疗效显著，且无明显不良反应。但在研制健肠止泻合剂过程中，发现该制剂缺乏相关质量控制方法，相关的痛泻要方文献报道方法(王艳宏，HPLC
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PDA法同时测定痛泻要方中五种有效成分，中医药信息，2017，34(5)，20
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24；胡莹，HPLC法测定痛泻要方及其破壁饮片中4种成分的含量，中药材，2019，42(7)，1601
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1604)不适于进行日常检验。为有效检测健肠止泻合剂中的特征性指标成分，对制剂进行系统定性定量分析研究，有必要进一步开发健肠止泻合剂的检测方法。

技术实现思路

[0004]本专利技术要解决的技术问题是提供一种健肠止泻合剂的检测方法，通过液相色谱法对健肠止泻合剂与单一药材进行分析，确定健肠止泻合剂中的指标药物：白芍、陈皮及黄连；再使用薄层硅胶色谱法对白芍、陈皮、黄连的鉴别，以及采用液相色谱法对健肠止泻合剂中芍药苷、橙皮苷以及盐酸小檗碱的含量进行测定，实现对健肠止泻合剂中的特征性指标成分的有效检测。
[0005]为解决上述技术问题，本专利技术提供以下技术方案：
[0006]本专利技术提供了一种健肠止泻合剂的检测方法，该健肠止泻合剂由炒白术、炒白芍、山药、炒防风、泽泻、炒陈皮、炒白扁豆、黄连、干姜、乌药、乌梅制成，所述检测方法包括对白芍中指标成分芍药苷、陈皮中指标成分橙皮苷和黄连中指标成分盐酸小檗碱的薄层鉴别，以及采用高效液相色谱法对芍药苷、橙皮苷、盐酸小檗碱的含量测定。
[0007]其中，对芍药苷、橙皮苷和盐酸小檗碱的鉴别方法，包括以下步骤：
[0008]S1：取适量健肠止泻合剂，加入甲醇混合提取，过滤得到供试品溶液；
[0009]S2：分别称取芍药苷对照样品、橙皮苷对照样品、盐酸小檗碱对照样品，加入甲醇
制成对照品溶液；
[0010]S3：选择固定相，将供试品溶液于对照品溶液点样于固定相上并置于展开剂中展开，晾干后观察结果。
[0011]进一步地，所述健肠止泻合剂的制备方法包括：称取质量比为2：3：3：2：2：2：2：1：1.2：2：2的炒白术、炒白芍、山药、炒防风、泽泻、炒陈皮、炒白扁豆、黄连、干姜、乌药、乌梅待用；向上述药材中加入质量比为6～10倍量的水，煎煮0.5～1.5h，过滤，将药渣重复煎煮0.5～1.5h，过滤，合并两次提取液，浓缩处理，浓缩后溶液的体积与加入的水的体积比为0.13～0.22：1，分装、灭菌后放冷至室温，得到所述健肠止泻合剂。
[0012]进一步地，S1中，所述供试品滤液由健肠止泻合剂与甲醇以体积比1：1混合、振摇提取、过滤得到。
[0013]进一步地，S2中，所述对照品溶液的浓度优选为1mg/mL。
[0014]进一步地，当待测成分为芍药苷时，将供试品溶液与芍药苷对照品溶液点样于固定相上并置于展开剂中展开，晾干后在固定相上喷涂5％香草醛硫酸乙醇显色剂，加热至斑点清晰后进行比对；其中，所述固定相为硅胶G薄层板，所述展开剂由三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇、甲酸以体积比为40：5：10：0.2配制的混合溶液；
[0015]将供试品与芍药苷对照品的色谱相比较，若在相同位置上出现蓝紫色斑点，则说明待测样品中包含芍药苷。
[0016]进一步地，当待测成分为橙皮苷和盐酸小檗碱时，将供试品溶液与橙皮苷对照品溶液、盐酸小檗碱对照品溶液点样于固定相上并置于展开剂中展开，晾干后在固定相上喷涂三氯化铝显色剂，置紫外光灯下进行比对；所述固定相为硅胶G薄层板，所述展开剂由乙酸乙酯、甲醇、水、甲酸以体积比为100：20：14：1配制的混合溶液；
[0017]若供试品与相应对照品在相同位置上出现荧光斑点，则说明供试品中包含相应成分；其中，橙皮苷对照品与盐酸小檗碱对照品在固定相上出现荧光斑点的位置不重合。
[0018]用于测定橙皮苷和盐酸小檗碱的展开剂(乙酸乙酯
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甲醇
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水
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甲酸，体积比为100：20：14：1)，可对橙皮苷和盐酸小檗碱进行同时测定，喷涂三氯化铝显色剂后，两种成分与其它成分完全分离，且产生的荧光斑点互不影响。
[0019]此外，对芍药苷、橙皮苷和盐酸小檗碱的含量测定，包括以下步骤：
[0020](1)称取健肠止泻合剂，加入甲醇稀释，得到供试品溶液；
[0021](2)分别称取芍药苷对照样品、橙皮苷对照样品、盐酸小檗碱对照样品，加入含水甲醇溶液配制成对照品溶液；
[0022](3)分别吸取对照瓶溶液和供试品溶液注入液相色谱仪中，进行测定；
[0023](4)采用外标法与相应对照品峰面积进行定量比较分析，以测定供试品溶液中相应成分的含量。
[0024]进一步地，步骤(1)中，健肠止泻合剂被甲醇稀释1～5倍得到所述供试品溶液。
[0025]进一步地，当测定成分为芍药苷、橙皮苷时，采用80％的甲醇溶液配制浓度为50～1000μg/mL的对照品溶液，通过以下色谱条件进行测定：
[0026]采用的色谱柱为碳十八改性硅胶色谱柱，柱温为30℃；
[0027]进样量为10～20μL；
[0028]流速为1.0mL/min；
[0029]检测器为DAD(二极管阵列)检测器，测定芍药苷的检测波长为230nm，测定橙皮苷的检测波长为283nm；
[0030]流动相A为乙腈，流动相B为0.1％磷酸，流动相A与流动相B的总体积为100％，进行梯度洗脱；
[0031]所述梯度洗脱条件为：0～14min时流动相A的体积为14％，14～18min时流动相A的体积为14％～22％，18～28min时流动相A的体积为22％。
[0032]进一步地，当测定成分为盐酸小檗碱时，采用50％的甲本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种健肠止泻合剂的检测方法，该健肠止泻合剂由炒白术、炒白芍、山药、炒防风、泽泻、炒陈皮、炒白扁豆、黄连、干姜、乌药、乌梅制成，其特征在于，所述检测方法包括对白芍中指标成分芍药苷、陈皮中指标成分橙皮苷和黄连中指标成分盐酸小檗碱的薄层鉴别，以及采用液相色谱法对芍药苷、橙皮苷、盐酸小檗碱的含量测定；其中，对芍药苷、橙皮苷和盐酸小檗碱的鉴别方法，包括以下步骤：S1：取适量健肠止泻合剂，加入甲醇混合提取，过滤得到供试品溶液；S2：分别称取芍药苷对照样品、橙皮苷对照样品、盐酸小檗碱对照样品，加入甲醇制成对照品溶液；S3：选择固定相，将供试品溶液与对照品溶液点样于固定相上并置于展开剂中展开，晾干后观察结果；对芍药苷、橙皮苷和盐酸小檗碱的含量测定，包括以下步骤：(1)称取健肠止泻合剂，加入甲醇稀释，得到供试品溶液；(2)分别称取芍药苷对照样品、橙皮苷对照样品、盐酸小檗碱对照样品，加入含水甲醇溶液配制成对照品溶液；(3)分别吸取对照品溶液和供试品溶液注入液相色谱仪中，进行测定；(4)采用外标法与相应对照品峰面积进行定量比较分析，以测定供试品溶液中相应成分的含量。2.根据权利要求1所述的一种健肠止泻合剂的检测方法，其特征在于，所述健肠止泻合剂的制备方法包括以下步骤：(1)称取质量比为2：3：3：2：2：2：2：1：1.2：2：2的炒白术、炒白芍、山药、炒防风、泽泻、炒陈皮、炒白扁豆、黄连、干姜、乌药、乌梅待用；(2)向上述药材中加入质量比为6～10倍量的水，煎煮0.5～1.5h，过滤，将药渣重复煎煮0.5～1.5h，过滤，合并两次提取液，浓缩处理，浓缩后溶液的体积与加入的水的体积比为0.13～0.22：1，分装、灭菌后放冷至室温，得到所述健肠止泻合剂。3.根据权利要求1所述的一种健肠止泻合剂的检测方法，其特征在于，还包括药物的特征谱分析方法，具体为：通过液相色谱法对健肠止泻合剂的液相供试品与单一药材的液相供试品进行分析，将具有特征指标成分且与其它成分互不干扰的药材作为健肠止泻合剂中的指标药物，所述指标药物为白芍、陈皮及黄连；确定指标药物的液相色谱法的色谱条件：色谱柱为碳十八改性硅胶色谱柱；流速为1mL/min；进样体积为20μL；检测器为DAD检测器，检测波长为200～400nm；流动相A为0.1％磷酸水溶液，流动相B为乙腈，流动相A与流动相B的总体积为100％；梯度条件：0
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5min时流动相B的体积为3％，5
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10min时流动相B的体积为3％
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14％，10
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15min时流动相B的体积为14％，15
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20min时流动相B的体积为14％
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22％，20
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25min时流动相B的体积为22％，25
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30min时流动相B的体积为22％
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40％，30
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35min时流动...

【专利技术属性】
技术研发人员：葛飞，李万红，程峰，刘江云，朱时林，吉华亮，周建军，徐通生，季瑜，田祖成，代海峰，
申请(专利权)人：海安市中医院，
类型：发明
国别省市：