一种外泌体miRNA在制备慢性疼痛-抑郁共病诊断产品中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种外泌体miRNA在制备慢性疼痛

【技术实现步骤摘要】
一种外泌体miRNA在制备慢性疼痛
‑
抑郁共病诊断产品中的应用


[0001]本专利技术公开了一种外泌体miRNA在制备慢性疼痛
‑
抑郁共病诊断产品中的应用，属于生物医药领域。

技术介绍

[0002]疼痛是实际或潜在组织损伤带来的不愉快的感觉和情感体验，或者是与此类似的经历。慢性疼痛是指持续或者反复发作超过三个月的疼痛。根据流行病学调查显示，我国慢性疼痛的发生率平均约为36％；此外，随着年龄的增加，慢性疼痛的发生率也会随之增长。由此看来，慢性疼痛已然成为现代社会中普遍存在的健康问题之一。生物及社会等多种因素都会影响着慢性疼痛，心理因素在其发生、发展及转归中具有关键性的作用。疼痛的临床表现不仅会导致患者生活质量下降，健康不佳等，还会明显导致患者情绪低落，焦虑及抑郁等负性情绪更加剧了痛觉感受。导致慢性疼痛治疗失败的六个因素主要都是心理社会因素，包括：疼痛导致功能残疾和应激，而这些又会加重疼痛，形成恶性循环；其次不健康的生活方式、缺乏社会支持、抑郁性精神病以及药物滥用史等均可促使急性疼痛想慢性疼痛的转变。调查结果显示，20％～50％的慢性疼痛患者同时伴有抑郁表现。抑郁症作为一种精神障碍性疾病，临床上主要表现为情绪低落、快感缺失、兴趣的丧失以及回避社交活动等；其中值得注意的是，慢性疼痛是排在睡眠障碍与食欲下降之后，抑郁障碍中最常见伴发的躯体不适症状。抑郁症状与慢性疼痛的发生及其严重程度密切相关，而目前诱发抑郁的机制尚不明确。近年来，关于慢性疼痛的发病机制研究已经取得了一些成果，但是想要针对性的显著提高临床镇痛效果尚且任重道远，抑郁症更是如此。慢性疼痛患者伴发抑郁症不仅加重了临床症状，更大大增加了有效缓解疼痛的难度。由此可见，及早对慢性疼痛合并抑郁症状的患者进行干预将有效提高治疗效果，因此寻找该共病新的诊断靶点意义重大。
[0003]慢性疼痛和抑郁症的发生受到诸多因素的影响，生活环境、免疫炎症、遗传因素等均会导致个体对两种疾病相对易感性的差异。慢性疼痛与抑郁在许多风险因素方面具有重叠的部分，其中遗传因素显得尤为重要。一项3266名女性双胞胎调查研究中显示，抑郁和慢性疼痛有着86％的遗传相关性。组蛋白、DNA等遗传物质的修饰参与慢性疼痛和抑郁的发生发展。微小RNA(miRNA)是一种长度为18
‑
22个核苷酸的微小非编码RNA，作为基因表达的转录后调节因子发挥作用。通过与靶基因3
’
端非编码区靶向结合，抑制基因翻译或诱导转录后mRNA的降解，以此来调控基因的表达水平。近来年，外泌体miRNA研究较为广泛，人外周血液中miRNA的主要信号来源就是外泌体。外泌体(exosomes)是一种直径为40
‑
100nm的脂质双分子层囊泡，可携带包括DNA，mRNA，miRNA和蛋白质等多种生物分子在细胞之间发挥着生物调节作用。已有研究证明，外泌体表面标志物CD9、CD63和TSG101在抑郁患者血浆中均有表达。最新研究也表明外泌体miRNA参与抑郁症的HPA轴的调节以及脑源性神经营养因子(brain
‑
derived neuropathic factor，BDNF)、Wnt/β
‑
catenin等信号通路的调节，调控着抑郁症的发生发展，是抑郁症诊断和治疗的潜在生物标志物。分离慢性疼痛患者外周血中
外泌体miRNA，识别抑郁易感患者标志性miRNA，及早进行抑郁症状的治疗，将改善慢性疼痛的治疗疗效。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种外泌体miRNA在制备慢性疼痛
‑
抑郁共病诊断产品或者辅助诊断中的应用，所述miRNA为血浆外泌体miR
‑
351
‑
5p，所述血浆外泌体miR
‑
351
‑
5p的序列如SEQ ID No.1(人源)与SEQ ID No.2(鼠源)所示。
[0005]SEQ ID No.1：mmu
‑
miR
‑
351
‑
5p:UCCCUGAGGAGCCCUUUGAGCCUG
[0006]SEQ ID No.2：rno
‑
miR
‑
351
‑
5p:UCCCUGAGGAGCCCUUUGAGCCUGA
[0007]本专利技术还提供了一种慢性疼痛
‑
抑郁共病诊断试剂盒，试剂盒为检测外泌体miR
‑
351
‑
5p的试剂，包括任何可用于检测miR
‑
351
‑
5p存在与否或表达高低的方法中所使用的试剂。检测外泌体miR
‑
351
‑
5p存在与否或表达高低的方法了采用而不局限于：相对定量RT
‑
PCR、绝对定量PCR、数字PCR。
[0008]上述试剂包括：miR
‑
351
‑
5p的逆转录引物、PCR检测上下游引物。逆转录引物序列如SEQ ID No.3所示。miR
‑
351
‑
5p的PCR检测上游引物序列如SEQ ID No.4所示，miR
‑
362的PCR检测下游引物序列如SEQ ID No.5所示。
[0009]SEQ ID No.3：
[0010]mmu
‑
miR
‑
351
‑
5p(RT):GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGACCAGGCTCA
[0011]SEQ ID No.4：mmu
‑
miR
‑
351
‑
5p(F):CGTTCCCTGAGGAGCCCTT
[0012]SEQ ID No.5：General mmu
‑
miR(R)ATCCAGTGCAGGGTCCGAGG
[0013]所述试剂盒还包括分离外泌体所用的试剂，裂解外泌体所用的试剂，分离外泌体所用的试剂包括任何能够分离外泌体的方法中使用的试剂。
[0014]分离外泌体的方法包括但不局限于超速离心法、沉淀法、分子排阻层析、亲和分离法、免疫磁珠法、超滤法等。
[0015]本专利技术的诊断产品进行慢性疼痛
‑
抑郁共病评估步骤包括：
[0016](1)从体液中分离外泌体；
[0017](2)检测外泌体miR
‑
351
‑
5p表达水平；
[0018](3)根据外泌体miR
‑
351
‑
5p表达量对慢性疼痛合并抑郁的患者进行诊断。
[0019]本专利技术通过血浆超速离心及高通量测序等技术在前期建立的坐骨神经分支损伤(spared nerve injury，SN本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种外泌体miRNA在制备慢性疼痛
‑
抑郁共病诊断产品中的应用，所述外泌体miRNA为血浆外泌体miR
‑
351
‑
5p。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述miR
‑
351
‑
5p序列为，人源：SEQ ID No.1；鼠源：SEQ ID No.2。3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述应用包括慢性疼痛
‑
抑郁共...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴仔峰，杨春，王娣，黄朝理，王远远，
申请(专利权)人：江苏省人民医院南京医科大学第一附属医院，
类型：发明
国别省市：