用于SMN基因拷贝数分析的荧光定量检测试剂及应用制造技术

本发明专利技术提供了一种用于SMN1/SMN2基因拷贝数变异和SMN1常见热点突变位点的检测试剂、试剂盒及检测方法，以解决现有单一技术仅能检测拷贝数变异或仅能分析热点突变以及基因分型检测技术中费时、程序繁琐以及易污染等问题。本试剂或试剂盒可以快速、准确、便宜、高通量地实现区分SMA患者、携带者及正常人的便利性和有效性，同时灵敏度高，特异性强，适用于常见样本比如血液、口腔拭子等。本发明专利技术能够快速、低廉、准确、高通量地检测人体血液或者其他组织细胞中SMN1/SMN2基因拷贝数变异和SMN1常见热点突变位点的型别，对于分型技术而言，是目前性价比最好的方法，便于临床或者健康检测大规模的推行。模的推行。模的推行。

【技术实现步骤摘要】
用于SMN基因拷贝数分析的荧光定量检测试剂及应用


[0001]本专利技术涉及生物
，尤其是涉及一种用于人运动神经元存活基因（SMN基因）拷贝数分析的荧光定量检测试剂、检测试剂盒及检测方法。

技术介绍

[0002]脊髓性肌萎缩症是一种常染色体隐性遗传的神经肌肉病，以脊髓前角α
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运动神经元退化变性导致近端肢体和躯干进行性、对称性肌无力和肌萎缩为主要临床特征。95%以上是由位于5号染色体长臂的SMN1缺失或突变所致的5q
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SMA。SMA发病率约为1/10000，人群携带率约为1/50。
[0003]脊髓性肌萎缩症国际协会根据SMA患者的发病年龄和临床表现将脊髓性肌萎缩症分为4种类型：Ⅰ型（婴儿型）、Ⅱ型（中间型）、Ⅲ型（青年型）、Ⅳ型（成人型）。Ⅰ型患者，发病年龄小于6个月，四肢及躯干严重的软弱无力，大多数患者在两岁前就会因呼吸衰竭或进食问题而死亡。Ⅱ型患者，于出生6~18个月内发病，可以独坐但多数不能站立或独走，预期寿命在20~40岁。Ⅲ型患者，出生18个月后才发病，患者能够独立行走，病情进展缓本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.用于SMN基因拷贝数分析的荧光定量检测试剂，其特征在于，包括用于扩增SMN1/SMN2基因外显子7的特异性引物1和引物2，以及与扩增产物杂交的特异性探针1和探针2；所述引物1和引物2的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示；所述引物1和引物2的反应浓度均为500
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900nmol/L；所述探针1和探针2的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.11和SEQ ID NO.12所示；所述探针1和探针2的反应浓度均为150
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250nmol/L；和包括用于扩增SMN1/SMN2基因外显子8的特异性引物3和引物4，以及与扩增产物杂交的特异性探针3和探针4；所述引物3和引物4的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示；所述引物3和引物4的反应浓度均为500
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900nmol/L；所述探针3和探针4的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.13和SEQ ID NO.14所示；所述探针3的反应浓度为250
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350nmol/L；所述探针4的反应浓度为100
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200nmol/L；以及包括用于扩增SMN1基因热点突变c.22dupA位点的特异性引物5和引物6，和用于扩增SMN1基因热点突变c.683T>A位点的特异性引物7和引物8；以及与c.22dupA扩增产物杂交的特异性探针5和与c.683T>A扩增产物杂交的特异性探针6；所述引物5、引物6、引物7、引物8的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8所示；所述引物5、引物6、引物7和引物8的反应浓度均为200
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400nmol/L；所述探针5和探针6的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.15和SEQ ID NO.16所示；所述探针5和探针6的反应浓度均为50
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150nmol/L。2.根据权利要求1所述的用于SMN基因拷贝数分析的荧光定量检测试剂，其特征在于，所述引物1和引物2的反应浓度均为700nmol/L；所述探针1和探针2的反应浓度均为200nmol/L；所述引物3和引物4的反应浓度均为700nmol/L；所述探针3的反应...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙家权，任斌，魏小元，张玉祥，陈瑞旭，王中，
申请(专利权)人：江苏恩华药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：