一种山羊乳外泌体的提取及鉴定方法技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，尤其涉及一种山羊乳外泌体的提取及鉴定方法。提取方法包括：针对山羊乳进行多步骤离心得到外泌体粗产物；针对所述外泌体粗产物进行梯度碘克沙醇溶液超速离心法得到山羊外泌体；所述多步骤离心包括：依次采用8000～12000

【技术实现步骤摘要】
一种山羊乳外泌体的提取及鉴定方法


[0001]本专利技术涉及生物
，尤其涉及一种山羊乳外泌体的提取及鉴定方法。

技术介绍

[0002]外泌体(exosomes)产生于细胞中的多泡体，是活细胞分泌的直径约为30～150nm的膜性囊泡，密度为1.13～1.19g/ml，有典型的“杯盘”形态。外泌体几乎存在于所有的组织、细胞间隙、体液中，包括血液、唾液、尿液和乳汁，携带了参与细胞内信号转导的蛋白、miRNA、lncRNA、circRNA、mRNA以及其降解片段，参与细胞活动的重要调控；外泌体在肿瘤转移、免疫调控机制、疾病发生发展、阿兹海默症和免疫疾病等疑难杂症的治疗方面发挥重要作用。目前已有研究表明乳源外泌体具有作为载体用于靶向载药的潜力，此外，乳源外泌体对于人类肠道微生物和健康调控方面的作用也有待于进一步探索。
[0003]目前，外泌体的分离提取方法主要有：差速离心、密度梯度离心、体积排阻色谱法、过滤法、聚合物沉淀法、免疫分离、隔离筛选法等。外泌体研究的文献中主流的分离提取方法目前还是超速离心的方法，可以准确地重复获取外泌体，同时最大本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种山羊乳外泌体的提取方法，其特征在于，包括：针对山羊乳进行多步骤离心得到外泌体粗产物；针对所述外泌体粗产物进行梯度碘克沙醇溶液超速离心法得到山羊外泌体；所述多步骤离心包括：依次采用8000～12000
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g、80000～120000
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g、2000～3000
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g和80000～120000
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g的离心力进行离心。2.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述针对山羊乳进行超速离心得到外泌体粗产物包括：(1)将山羊乳速融后离心取上清液；(2)将步骤(1)的上清液在8000～12000
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g的离心力下离心30～60min；(3)将步骤(2)的上清液在80000～120000
×
g的离心力下离心100～140min；(4)将步骤(3)的沉淀重悬后离心；(5)将步骤(4)的上清液在2000～3000
×
g的离心力下离心20～40min；(6)将步骤(5)的上清液在80000～120000
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g的离心力下离心100～140min，取沉淀。3.根据权利要2所述的提取方法，其特征在于，步骤(1)中，速融的温度为35～42℃...

【专利技术属性】
技术研发人员：张春强，张敏，谭学周，丛少波，张俊瑜，王翀，
申请(专利权)人：思我特杭州食品科技有限公司，
类型：发明
国别省市：