多聚体双特异性抗CD123结合分子及其用途制造技术

本公开提供包含特异性结合免疫效应细胞的经修饰的J链的多价双特异性抗CD123结合分子。还提供编码所述结合分子或其亚基的多核苷酸以及包含所述多核苷酸的载体和宿主细胞。本公开还提供用于产生和/或使用包含特异性结合免疫效应细胞的经修饰的J链的多价双特异性抗CD123结合分子的方法。CD123结合分子的方法。CD123结合分子的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】多聚体双特异性抗CD123结合分子及其用途
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2019年8月17日提交的美国临时专利申请序列号62/888,475和2019年8月19日提交的美国临时专利申请序列号62/888,702的权益，所述临时申请各自以引用的方式整体并入本文。
[0003]序列表
[0004]本申请含有已以电子方式以ASCI I格式提交并以引用方式整体并入本文的序列表。ASCI I拷贝创建于2020年8月13日，命名为027WO1
‑
Sequence
‑
Listing，并且大小为204,738字节。

技术介绍

[0005]急性髓系白血病(AML)是美国白血病死亡的主要原因，每年有超过20,000名新患者，5年存活率低于30％，超过60岁的患者的存活率下降至10％(National Cancer Institute Surveillance,Epidemiology and End
‑
Result Program(SEER)data；Oran and Weisd本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种多聚体、双特异性或多特异性结合分子，其包含两个或五个二价结合单元、和经修饰的J链，其中所述经修饰的J链包含野生型J链或其功能片段或变体和特异性结合免疫效应细胞的与J链缔合的抗原结合结构域，其中每个结合单元包含两条抗体重链，每条重链包含IgA、IgA样、IgM或IgM样重链恒定区或其多聚片段并至少包含与结合单元与结合单元缔合的抗原结合结构域的重链可变区(VH)部分，其中所述与结合单元与结合单元缔合的抗原结合结构域中的至少三个与CD123特异性结合，并且其中所述结合分子能够诱导免疫效应细胞依赖性的表达CD123的细胞的杀伤。2.如权利要求1所述的结合分子，其中所述经修饰的J链包含变体J链或其片段，所述变体J链或其片段相对于野生型J链包含一个或多个能够影响所述结合分子的血清半衰期的单一氨基酸取代、缺失或插入；并且其中相对于除所述J链中的所述一个或多个单一氨基酸取代、缺失或插入之外都相同的并且以相同的方式对相同的动物物种施用的参考结合分子，所述结合分子在对动物施用时表现出增加的血清半衰期。3.如权利要求2所述的结合分子，其中所述经修饰的J链包含与成熟野生型人J链(SEQ ID NO:2)的氨基酸Y102相对应的氨基酸位置处的氨基酸取代。4.如权利要求3所述的结合分子，其中与SEQ ID NO:2的Y102相对应的所述氨基酸被丙氨酸(A)、丝氨酸(S)或精氨酸(R)取代。5.如权利要求4所述的结合分子，其中与SEQ ID NO:2的Y102相对应的所述氨基酸被丙氨酸(A)取代。6.如权利要求5所述的结合分子，其中所述J链是变体人J链，并且包含氨基酸序列SEQ ID NO:3(“J*”)。7.如权利要求1至6中任一项所述的结合分子，其中所述与J链缔合的抗原结合结构域包含与所述J链或其片段或变体融合或化学缀合的抗体单链Fv(scFv)片段。8.如权利要求7所述的结合分子，其中所述scFv片段通过肽接头与所述J链融合。9.如权利要求7或权利要求8所述的结合分子，其中所述scFv片段与所述J链或其片段或变体的N末端融合、与所述J链或其片段或变体的C末端融合或与所述J链或其片段或变体的N末端和C末端两者融合。10.如权利要求7至9中任一项所述的结合分子，其中所述免疫效应细胞是T细胞或NK细胞。11.如权利要求10所述的结合分子，其中所述免疫效应细胞是T细胞，并且其中所述scFv片段特异性结合CD3。12.如权利要求10或权利要求11所述的结合分子，其中所述T细胞是CD8+细胞毒性T细胞。13.如权利要求11或权利要求12所述的结合分子，其中所述scFv片段包含重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)，其中所述VH包含VH互补决定区VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3并且所述VL包含VL互补决定区VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3，其中(a)所述VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3分别包含具有0个、1个或2个氨基酸取代的氨基酸序列SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6和SEQ ID NO:7，并且所述VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3分别包含
具有0个、1个或2个氨基酸取代的氨基酸序列SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10和SEQ ID NO:11；(b)所述VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3分别包含具有0个、1个或2个氨基酸取代的氨基酸序列SEQ ID NO:130、SEQ ID NO:132和SEQ ID NO:135，并且所述VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3分别包含具有0个、1个或2个氨基酸取代的氨基酸序列SEQ ID NO:138、SEQ ID NO:140和SEQ ID NO:142；(c)所述VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3分别包含具有0个、1个或2个氨基酸取代的氨基酸序列SEQ ID NO:130、SEQ ID NO:132和SEQ ID NO:135，并且所述VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3分别包含具有0个、1个或2个氨基酸取代的氨基酸序列SEQ ID NO:138、SEQ ID NO:140和SEQ ID NO:143；(d)所述VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3分别包含具有0个、1个或2个氨基酸取代的氨基酸序列SEQ ID NO:131、SEQ ID NO:133和SEQ ID NO:136，并且所述VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3分别包含具有0个、1个或2个氨基酸取代的氨基酸序列SEQ ID NO:139、SEQ ID NO:141和SEQ ID NO:144；(e)所述VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3分别包含具有0个、1个或2个氨基酸取代的氨基酸序列SEQ ID NO:131、SEQ ID NO:134和SEQ ID NO:136，并且所述VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3分别包含具有0个、1个或2个氨基酸取代的氨基酸序列SEQ ID NO:139、SEQ ID NO:141和SEQ ID NO:145；(f)所述VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3分别包含具有0个、1个或2个氨基酸取代的氨基酸序列SEQ ID NO:131、SEQ ID NO:134和SEQ ID NO:137，并且所述VLCDR1、VLCDR2和VLCDR3分别包含具有0个、1个或2个氨基酸取代的氨基酸序列SEQ ID NO:139、SEQ ID NO:141和SEQ ID NO:146。14.如权利要求13所述的结合分子，其中所述scFv片段分别包含VH和VL氨基酸序列SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:119和SEQ ID NO:120、SEQ ID NO:121和SEQ ID NO:122、SEQ ID NO:123和SEQ ID NO:124、SEQ ID NO:125和SEQ ID NO:126或SEQ ID NO:127和SEQ ID NO:128。15.如权利要求11或权利要求12所述的结合分子，其中所述scFv片段包含重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)，其中所述VH和VL分别包含氨基酸序列SEQ ID NO:13和SEQ ID NO:14。16.如权利要求13所述的结合分子，其中所述经修饰的J链包含有包含SEQ ID NO:12的氨基酸20至420、SEQ ID NO:15的氨基酸20至412或SEQ ID NO:16的氨基酸23至415的氨基酸序列。17.如权利要求10所述的结合分子，其中所述免疫效应细胞是NK细胞，并且其中所述scFv片段特异性结合CD16。18.如权利要求1至17中任一项所述的结合分子，其中所述经修饰的J链还包含与所述J链或其片段或变体融合或化学缀合的免疫刺激剂(“ISA”)。19.如权利要求18所述的结合分子，其中所述ISA包含细胞因子或其受体结合片段或变体。20.如权利要求19所述的结合分子，其中所述ISA包含：(a)白介素
‑
15(IL
‑
15)蛋白或其受体结合片段或变体(“I”)；和(b)白介素
‑
15受体
‑
α(IL
‑
15Rα)片段(“R”)，其能够与I缔合，
NO:24、SEQ ID NO:25或其任何多聚变体或片段。34.如权利要求28至33中任一项所述的结合分子，其中每个结合单元包含两条IgA或IgA样重链和两条免疫球蛋白轻链，每条所述IgA或IgA样重链包含位于所述IgA恒定区或其片段的氨基末端的VH，每条所述免疫球蛋白轻链包含位于免疫球蛋白轻链恒定区的氨基末端的VL。35.如权利要求1至27中任一项所述的结合分子，其是包含五个二价结合单元的五聚体结合分子，其中每个结合单元包含两个IgM或IgM样重链恒定区或其多聚片段。36.如权利要求35所述的结合分子，其中所述IgM或IgM样重链恒定区或其多聚片段各自包含Cμ4结构域和尾片(tp)结构域或其片段或变体。37.如权利要求35或权利要求36所述的结合分子，其中所述IgM或IgM样重链恒定区或其多聚片段还包含Cμ1结构域、Cμ2结构域、Cμ3结构域或它们的任何组合。38.如权利要求35至37中任一项所述的结合分子，其中所述IgM或IgM样重链恒定区是人IgM恒定区。39.如权利要求38所述的结合分子，其中每个IgM重链恒定区是人IgM恒定区或其多聚变体或片段，其包含氨基酸序列SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:23或其多聚变体或片段。40.如权利要求38或权利要求39所述的结合分子，其包含变体人IgM恒定区，其中相对于包含有包含氨基酸序列SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:23或其多聚变体或片段的IgM重链恒定区的多聚体结合分子，所述多聚体结合分子具有降低的CDC活性。41.如权利要求40所述的结合分子，其中每个IgM重链恒定区包含氨基酸序列SEQ ID NO:22或SEQ ID NO:23的变体，其中所述变体包含SEQ ID NO:22或SEQ ID NO:23的P311位置处的氨基酸取代、SEQ ID NO:22或SEQ ID NO:23的P313位置处的氨基酸取代或SEQ ID NO:22或SEQ ID NO:23的P311和P313位置处的氨基酸取代。42.如权利要求38或权利要求39所述的结合分子，其中每个IgM重链恒定区是变体人IgM恒定区，所述变体人IgM恒定区相对于与所述变体IgM重链恒定区除一个或多个单一氨基酸取代、缺失或插入之外都相同的参考IgM重链恒定区具有所述一个或多个单一氨基酸取代、缺失或插入；其中相对于包含所述参考IgM重链恒定区、以相同方式对相同动物物种施用的结合分子，所述结合分子在对受试动物施用时表现出增加的血清半衰期。43.如权利要求42所述的多聚体结合分子，其中所述变体IgM重链恒定区包含与野生型人IgM恒定区SEQ ID NO:22或SEQ ID NO:23的氨基酸E345A、S401A、E402A或E403A相对应的一个或多个氨基酸位置处的氨基酸取代。44.如权利要求35至43中任一项所述的结合分子，其中每个结合单元包含两条IgM重链和两条免疫球蛋白轻链，每条所述IgM重链包含位于所述IgM恒定区或其片段的氨基末端的VH，每条所述免疫球蛋白轻链包含位于免疫球蛋白轻链恒定区的氨基末端的VL。45.一种组合物，其包含如权利要求1至44中任一项所述的结合分子。46.一种多核苷酸，其包含编码如权利要求1至44中任一项所述的结合分子的多肽亚基的核酸序列。47.如权利要求46所述的多核苷酸，其中所述多肽亚基包含IgM或IgM样重链恒定区并至少包含所述结合分子的所述与结合单元缔合的抗原结合结构域的抗体VH部分。48.如权利要求47所述的多核苷酸，其中所述多肽亚基包含有与包含以下的VH的C末端
融合的人IgM恒定区或其片段：(a)HCDR1、HCDR2和HCDR3区，其包含：包含在VH氨基酸序列中的CDR，所述VH氨基酸序列包含以下或包含在以下中：...

【专利技术属性】
技术研发人员：M，
申请(专利权)人：IGM生物科学股份有限公司，
类型：发明
国别省市：