IgM糖变体制造技术

本公开提供一种分离的IgM衍生的结合分子(例如，IgM抗体、IgM样抗体或其他IgM衍生的结合分子)，其包括至少1条变体IgM衍生的重链，其中至少1条变体IgM衍生的重链包括与特异性结合靶的结合结构域缔合的变体IgM重链恒定区，其中使变体IgM重链恒定区的至少1个天冬酰胺(N)连接糖基化基序突变以阻止该基序处的糖基化，且/或至少1个N连接糖基化基序被引入到变体IgM重链中。体IgM重链中。体IgM重链中。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】IgM糖变体
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2019年8月23日提交的美国临时专利申请序列号62/891,263的权益，所述临时专利申请以引用的方式整体并入本文。
[0003]序列表
[0004]本申请含有已以电子方式以ASCII格式提交并以引用方式全文并入本文的序列表。ASCII拷贝创建于2020年8月21日，命名为026WO1
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Sequence
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Listing，并且大小为166,573字节。

技术介绍

[0005]可多聚化的抗体和抗体样分子，诸如IgA和IgM抗体，已成为例如免疫肿瘤学和传染病领域中有希望的候选药物，从而允许改善的特异性、改善的亲合力以及结合多个结合靶点的能力。参见，例如，美国专利号9,951,134和9,938,347以及PCT公开号WO 2016/141303、WO 2016/154593、WO 2016/168758、WO 2017/059387、WO 2017 059380、WO 2018/017888、WO 2018/017763、WO 2018本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种分离的IgM衍生的结合分子，其包含至少1条变体IgM衍生的重链，其中所述至少1条变体IgM衍生的重链包含与特异性结合靶的结合结构域缔合的变体IgM重链恒定区，其中使所述变体IgM重链恒定区的至少1个天冬酰胺(N)连接糖基化基序突变以阻止该基序处的糖基化，并且其中N连接糖基化基序包含氨基酸序列N
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X1‑
S/T，其中N是天冬酰胺，X1是除脯氨酸之外的任何氨基酸，并且S/T是丝氨酸或苏氨酸。2.如权利要求1所述的IgM衍生的结合分子，其中所述变体IgM重链恒定区衍生自包含5个N连接糖基化基序N
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X1‑
S/T的人IgM重链恒定区，所述N连接糖基化基序N
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X1‑
S/T始于与SEQ ID NO:1(等位基因IGHM*03)或SEQ ID NO:2(等位基因IGHM*04)的氨基酸46(N1基序)、氨基酸209(N2基序)、氨基酸272(N3基序)、氨基酸279(N4基序)和氨基酸440(N5基序)相对应的氨基酸位置处。3.如权利要求2所述的IgM衍生的结合分子，其中所述N
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X1‑
S/T基序中的至少1个、至少2个、至少3个或至少4个包含阻止该基序处的糖基化的氨基酸插入、缺失或取代。4.如权利要求3所述的IgM衍生的结合分子，其包含N1基序、N2基序、N3基序、N5基序、或N1、N2、N3或N5基序中的2个或更多个、3个或更多个或全部4个的任意组合处的氨基酸插入、缺失或取代，其中所述氨基酸插入、缺失或取代阻止该基序处的糖基化。5.如权利要求4所述的IgM衍生的结合分子，其包含：与SEQ IDNO:1或SEQ ID NO:2的氨基酸N46、N209、N272或N440相对应的氨基酸位置处的氨基酸取代，其中取代的氨基酸是任何氨基酸；与SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2的氨基酸S48、S211、S274或S442相对应的氨基酸位置处的氨基酸取代，其中取代的氨基酸是除苏氨酸之外的任何氨基酸；或所述氨基酸取代中的2个或更多个、3个或更多个或4个或更多个的任意组合。6.如权利要求5所述的IgM衍生的结合分子，其包含与SEQ IDNO:1或SEQ ID NO:2的N46X2、N46A、N46D、N46Q、N46K、S48X3、S48A、N229X2、N229A、N229D、N229Q、N229K、S231X3、S231A、N272X2、N272A、N272D、N272Q、N272K、S274X3、S274A、N440X2、N440A、N440D、N449Q、N449K、S242X3或S424A相对应的氨基酸取代，或所述氨基酸取代中的2个或更多个、3个或更多个或4个或更多个的任意组合，其中X2是任何氨基酸并且X3是除苏氨酸之外的任何氨基酸。7.如权利要求1至6中任一项所述的IgM衍生的结合分子，其中所述变体IgM重链恒定区是包含以下氨基酸序列的变体人IgM恒定区：SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQ IDNO:17或SEQ ID NO:18。8.如权利要求1至7中任一项所述的IgM衍生的结合分子，其中使所述变体IgM重链恒定区突变以将至少1个新的天冬酰胺(N)连接糖基化基序引入到所述变体IgM重链恒定区中，其中所述至少1个新的天冬酰胺(N)连接糖基化基序被引入到所述变体IgM重链恒定区中的在IgM抗体中不自然糖基化的位点。9.如权利要求8所述的IgM衍生的结合分子，其中所述新的天冬酰胺(N)连接糖基化基序处在所述变体IgM重链恒定区中的与存在于不同免疫球蛋白同种型中的天冬酰胺(N)连接糖基化基序的位置相对应的位置处。10.如权利要求9所述的IgM衍生的结合分子，其中所述不同免疫球蛋白同种型是选自由人IgG1、人IgG2、人IgG3、人IgG4、人IgA1、人IgA2、人IgD和人IgE组成的组的人免疫球蛋
白同种型。11.如权利要求1至10中任一项所述的IgM衍生的结合分子，其中所述靶是靶表位、靶抗原、靶细胞、靶器官或靶病毒。12.如权利要求1至11中任一项所述的IgM衍生的结合分子，其是分别包含5个或6个二价IgM结合单元的五聚体或六聚体IgM抗体，其中每个结合单元包括2条IgM重链和2条免疫球蛋白轻链，每条所述IgM重链包含位于所述变体IgM恒定区的氨基末端的VH，每条所述免疫球蛋白轻链包含位于免疫球蛋白轻链恒定区的氨基末端的轻链可变结构域(VL)，并且其中所述VH和VL组合以形成与所述靶特异性结合的抗原结合结构域。13.如权利要求12所述的IgM衍生的结合分子，其中所述5个或6个IgM结合单元是相同的。14.如权利要求12或13所述的IgM衍生的结合分子，其是五聚体并且还包含J链或其功能片段或其功能变体。15.如权利要求14所述的IgM衍生的结合分子，其中所述J链是包含氨基酸序列SEQ ID NO:20的成熟人J链或其功能片段或其功能变体。16.如权利要求14或15所述的IgM衍生的结合分子，其中所述J链是功能变体J链，相对于与所述变体J链除一个或多个单一氨基酸取代、缺失或插入之外都相同的参考J链，所述功能变体J链包含所述一个或多个单一氨基酸取代、缺失或插入，并且其中相对于除了所述变体J链中的所述一个或多个单一氨基酸取代、缺失或插入之外都相同的并且以相同方式对相同动物物种施用的参考IgM衍生的结合分子，所述IgM衍生的结合分子在对受试动物施用时表现出增加的血清半衰期。17.如权利要求16所述的IgM衍生的结合分子，其中所述变体J链或其功能片段相对于所述参考J链包含1个、2个、3个或4个单一氨基酸取代、缺失或插入。18.如权利要求16或17所述的IgM衍生的结合分子，其中所述变体J链或其功能片段包含与野生型成熟人J链(SEQ ID NO:20)的氨基酸Y102相对应的氨基酸位置处的氨基酸取代。19.如权利要求18所述的IgM衍生的结合分子，其中与SEQ IDNO:20的Y102相对应的所述氨基酸被丙氨酸(A)取代。20.如权利要求19所述的IgM衍生的结合分子，其中所述J链是包含氨基酸序列SEQ ID NO:21的变体人J链J...

【专利技术属性】
技术研发人员：B，
申请(专利权)人：IGM生物科学股份有限公司，
类型：发明
国别省市：