用于川崎病检测的引物组、探针及试剂盒制造技术

本发明专利技术提出了一种用于川崎病检测的引物组、探针及试剂盒，属于分子生物学技术领域，包括反转录引物、扩增引物和探针序列，所述核酸序列组合能够有效定性/定量检测人血液血小板中的miR

【技术实现步骤摘要】
用于川崎病检测的引物组、探针及试剂盒


[0001]本专利技术涉及分子生物学
，更具体地，涉及miRNA应用
，特别指一种用于川崎病检测的引物组、探针及试剂盒。

技术介绍

[0002]川崎病(Kawasaki disease，KD)于1967年由日本川崎富作首先报告，曾被称为皮肤黏膜淋巴结综合征(mucocutaneous lymphnode syndrome ,MCLS)，是一种原因未明的急性、自限性全身免疫性血管炎。它主要发病年龄为6个月～4岁，其特征为广泛的中小血管炎，以心血管系统的损害最为严重，主要累及冠状动脉，大约15％～25％未经治疗的儿童最终发展为冠状动脉损害，使其成为发达国家儿童获得性心脏病最常见的原因。研究认为，KD急性期、恢复期均存在长期的血管内皮功能紊乱，成为成人易患冠状动脉粥样硬化的危险因素。2004年美国心脏病协会提出：KD恢复后血管内皮功能持续性障碍，可能是冠心病发生的新的危险因素。
[0003]川崎病作为一种急性、自限性的全身性血管炎，主要临床表现为发热、口腔黏膜改变、皮疹、颈部淋巴结肿大、球结膜本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于川崎病检测的核酸序列组合，包括反转录引物、扩增引物和探针序列，其特征在于，所述核酸序列组合能够有效定性/定量检测人血液血小板中的miR
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125a
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5p、hsa
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miR
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3182、hsa
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miR
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3675
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5p、miR
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4433b
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5p和miR
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126，其中miR
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126作为内参标志物；其中，反转录引物序列如下：miR
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125a
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5p
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sl：CAGGGCATCAGCCTGAACCCTGAACCCTGAATAACCT GAAACTGATGCCCTGTCACAG；hsa
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miR
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3182
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sl：ACGGGAAACTGAGTTCAGTTCCCAGCGTCCATATCAG TTCCCAGTTTCCCGTGACTAC；hsa
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miR
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3675
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5p
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sl：CAGGGCATCAGCCTGAACCCTGAACCCTGAATAAC CTGAAACTGATGCCCTGGAAATC；miR
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4433b
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5p
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sl：CTTGATGGCTGCCCGTCAAGCCAGTCAAGTATCCAGT CAAGTCAGCCATCAAGACAGGA；miR
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126
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sl：TTAGGGTCAGGCCTGAACCCTGAACCCTGAATGCGAACTG ACCTGACCCTAACGCATT；扩增引物序列如下：正向引物：miR
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125a
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5p
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F：CCTGAACCCTGAACCCTGA；hsa
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miR
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3182
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F：AGTTCAGTTCCCAGCGTCC；hsa
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miR
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3675
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5p
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F：CCTGAACCCTGAACCCTGA；miR
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4433b
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5p
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F：CCCGTCAAGCCAGTCAAGT；miR
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126
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F：CCTGAACCCTGAACCCTGA；反向引物：miR
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125a
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5p
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R：GGTCCCTGAGACCCTTTAAC；hsa
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miR
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3182
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R：TGCGCGCTTCTGTAGT；hsa
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miR
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3675
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5p
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R：CCTCTATGGGGCTTCTGTAGA；miR
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4433b
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5p
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R：GATGTCCCACCCCCAC；miR
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126
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R：GAGCTCGTACCGTGAGTAAT；探针序列如下：miR
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125a
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5p
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P：AACCTGAAACTGATGCCCTG；hsa
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miR
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3182
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P：ATCAGTTCCCAGTTTCCCGT；hsa
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miR
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3675
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5p
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P：AACCTGAAACTGATGCCCTG；miR
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4433b
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5p
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P：CCAGTCAAGTCAGCCATCAAG；miR
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126
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P：GCGAACTGACCTGACCCTAA。2.一种用于川崎病检测的试剂盒，其特征在于，包括反转录试剂、扩增试剂和如权利要求1所述的探针序列，所述探针核苷酸序列的5
’
端标记有荧光报告基团，3
’
端标记有荧光淬灭基团，所述探针核苷酸序列的荧光报告基团为FAM、HEX、VIC、ROX、Cy5中的至少一种，荧光淬灭基团为BHQ1、BHQ2、MGB中的至少一种；所述反转录引物序列为权利要求1所述的反转录引物；扩增引物为权利要求1所述的正向引物和反向引物。3.一种检测芯片或装置，其包括权利要求1所述的反转录引物、扩增引物和探针序列。4.权利要求1所述的反转录引物、扩增引物和探针序列在制备川崎病的预测、辅助诊断
川崎病的试剂或工具中的应用。5.权利要求1所述的核酸序列组合在制备定性和/或定量检测miR
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125a
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5p、hsa
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miR
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3182、hsa
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miR
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3675
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【专利技术属性】
技术研发人员：李光，刘佳，丁国徽，黄敏，谢利剑，
申请(专利权)人：道之精准医学科技上海有限公司，
类型：发明
国别省市：