【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】多链嵌合多肽和其用途
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求于2019年6月21日提交的美国临时专利申请序列号62/864,996的优先权；所述专利申请的全部内容通过引用并入本文。
[0003]本公开涉及生物
，并且更具体地说，涉及两种多链嵌合多肽的组合的用途，每种多链嵌合多肽具有定位在两个靶结合结构域之间的接头结构域。
技术介绍
[0004]过继性免疫疗法或细胞疗法需要在体内培养从受试者获得的免疫细胞(以及任选地对免疫细胞进行基因操作以表达T细胞或嵌合抗原受体)，之后再施用回受试者体内。需要足够数目的免疫细胞以便在受试者中提供治疗作用。在许多实例中，需要持续三周或三周以上培养从受试者获得的免疫细胞才可获得治疗有效数目的免疫细胞。另外，许多体外培养从受试者获得的免疫细胞的方法需要一层饲养细胞，所述方法需要随后纯化或分离免疫细胞，之后再施用回受试者体内。
技术实现思路
[0005]本专利技术基于以下发现：使NK细胞接触的特定两步法导致NK细胞在体外显著扩增，并且扩增的NK细...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种促进自然杀伤细胞活化和增殖的方法，所述方法包括：(a)在允许自然杀伤细胞的分化的条件下使所述自然杀伤细胞在包括有效量的第一多链嵌合多肽的液体培养基中接触，持续第一时间段；以及(b)在允许所述自然杀伤细胞的活化和增殖的条件下使所述自然杀伤细胞在包括有效量的(i)第二多链嵌合多肽和(ii)IgG1抗体构建体的液体培养基中接触，持续第二时间段，其中所述第一多链嵌合多肽包括：第一嵌合多肽，所述第一嵌合多肽包括第一靶结合结构域、可溶性组织因子结构域和一对亲和结构域的第一结构域；以及第二嵌合多肽，所述第二嵌合多肽包括一对亲和结构域的第二结构域和第二靶结合结构域，其中所述第一多链嵌合多肽中的所述第一嵌合多肽和所述第二嵌合多肽通过所述第一多链嵌合多肽中的所述亲和结构域对的所述第一结构域和所述第二结构域的结合而缔合，并且所述第一多链嵌合多肽中的所述第一靶结合结构域和所述第二靶结合结构域各自独立地特异性结合到IL
‑
18受体或IL
‑
12受体；并且其中所述第二多链嵌合多肽包括：第一嵌合多肽，所述第一嵌合多肽包括第一靶结合结构域、接头结构域、一对亲和结构域的第一结构域；以及第二嵌合多肽，所述第二嵌合多肽包括一对亲和结构域的第二结构域和第二靶结合结构域，其中所述第二多链嵌合多肽中的所述第一嵌合多肽和所述第二嵌合多肽通过所述第二多链嵌合多肽中的所述亲和结构域对的所述第一结构域和所述第二结构域的结合而缔合；所述第二多链嵌合多肽中的所述第一靶结合结构域和所述第二靶结合结构域各自独立地特异性结合到IL
‑
7受体或IL
‑
21受体，并且所述IgG1抗体构建体包括特异性结合到所述接头结构域的至少一个抗原结合结构域。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述第一靶结合结构域和所述可溶性组织因子结构域在所述第一多链嵌合多肽中的所述第一嵌合多肽中彼此直接邻接。3.根据权利要求1所述的方法，其中所述第一多链嵌合多肽中的所述第一嵌合多肽进一步包括所述第一嵌合多肽中的所述第一靶结合结构域和所述可溶性组织因子结构域之间的接头序列。4.根据权利要求1到3中任一项所述的方法，其中所述第一多链嵌合多肽中的所述第一嵌合多肽中的所述可溶性组织因子结构域和所述亲和结构域对的所述第一结构域在所述第一嵌合多肽中彼此直接邻接。5.根据权利要求1到3中任一项所述的方法，其中所述第一多链嵌合多肽中的所述第一嵌合多肽进一步包括所述第一嵌合多肽中的所述可溶性组织因子结构域和所述亲和结构域对的所述第一结构域之间的接头序列。6.根据权利要求1到5中任一项所述的方法，其中所述第一多链嵌合多肽中的所述第二嵌合多肽中的所述亲和结构域对的所述第二结构域和所述第二靶结合结构域在所述第二嵌合多肽中彼此直接邻接。7.根据权利要求1到5中任一项所述的方法，其中所述第一多链嵌合多肽中的所述第二
嵌合多肽进一步包括所述第二嵌合多肽中的所述亲和结构域对的所述第二结构域和所述第二靶结合结构域之间的接头序列。8.根据权利要求1到7中任一项所述的方法，其中所述可溶性组织因子结构域是可溶性人组织因子结构域。9.根据权利要求8所述的方法，其中所述可溶性人组织因子结构域包括与SEQ ID NO:5具有至少80％同一性的序列。10.根据权利要求9所述的方法，其中所述可溶性人组织因子结构域包括与SEQ ID NO:5具有至少90％同一性的序列。11.根据权利要求10所述的方法，其中所述可溶性人组织因子结构域包括与SEQ ID NO:5具有至少95％同一性的序列。12.根据权利要求11所述的方法，其中所述可溶性人组织因子结构域包括SEQ ID NO:5。13.根据权利要求8所述的方法，其中所述可溶性人组织因子结构域包括与SEQ ID NO:9具有至少80％同一性的序列。14.根据权利要求13所述的方法，其中所述可溶性人组织因子结构域包括与SEQ ID NO:9具有至少90％同一性的序列。15.根据权利要求14所述的方法，其中所述可溶性人组织因子结构域包括与SEQ ID NO:9具有至少95％同一性的序列。16.根据权利要求15所述的方法，其中所述可溶性人组织因子结构域包括SEQ ID NO:9。17.根据权利要求8所述的方法，其中所述可溶性人组织因子结构域包括与SEQ ID NO:10具有至少80％同一性的序列。18.根据权利要求17所述的方法，其中所述可溶性人组织因子结构域包括与SEQ ID NO:10具有至少90％同一性的序列。19.根据权利要求18所述的方法，其中所述可溶性人组织因子结构域包括与SEQ ID NO:10具有至少95％同一性的序列。20.根据权利要求19所述的方法，其中所述可溶性人组织因子结构域包括SEQ ID NO:10。21.根据权利要求8到11、13到15和17到19中任一项所述的方法，其中所述可溶性人组织因子结构域不包括以下中的一个或多个：在对应于成熟野生型人组织因子蛋白的氨基酸位置20的氨基酸位置处的赖氨酸；在对应于成熟野生型人组织因子蛋白的氨基酸位置22的氨基酸位置处的异亮氨酸；在对应于成熟野生型人组织因子蛋白的氨基酸位置45的氨基酸位置处的色氨酸；在对应于成熟野生型人组织因子蛋白的氨基酸位置58的氨基酸位置处的天冬氨酸；在对应于成熟野生型人组织因子蛋白的氨基酸位置94的氨基酸位置处的酪氨酸；在对应于成熟野生型人组织因子蛋白的氨基酸位置135的氨基酸位置处的精氨酸；以及在对应于成熟野生型人组织因子蛋白的氨基酸位置140的氨基酸位置处的苯丙氨酸。22.根据权利要求21所述的方法，其中所述可溶性人组织因子结构域不包括以下中的
任一个：在对应于成熟野生型人组织因子蛋白的氨基酸位置20的氨基酸位置处的赖氨酸；在对应于成熟野生型人组织因子蛋白的氨基酸位置22的氨基酸位置处的异亮氨酸；在对应于成熟野生型人组织因子蛋白的氨基酸位置45的氨基酸位置处的色氨酸；在对应于成熟野生型人组织因子蛋白的氨基酸位置58的氨基酸位置处的天冬氨酸；在对应于成熟野生型人组织因子蛋白的氨基酸位置94的氨基酸位置处的酪氨酸；在对应于成熟野生型人组织因子蛋白的氨基酸位置135的氨基酸位置处的精氨酸；以及在对应于成熟野生型人组织因子蛋白的氨基酸位置140的氨基酸位置处的苯丙氨酸。23.根据权利要求1到22中任一项所述的方法，其中所述可溶性组织因子结构域不能结合因子VIIa。24.根据权利要求1到23中任一项所述的方法，其中所述可溶性组织因子结构域不将无活性的因子X转化为因子Xa。25.根据权利要求1到24中任一项所述的方法，其中所述第一多链嵌合多肽不刺激哺乳动物中的凝血。26.根据权利要求1到25中任一项所述的方法，其中所述第一多链嵌合多肽中的所述第一嵌合多肽和/或所述第二嵌合多肽进一步包括在其N端处的信号序列。27.根据权利要求26所述的方法，其中所述信号序列包括SEQ ID NO:28。28.根据权利要求27所述的方法，其中所述信号序列是SEQ ID NO:28。29.根据权利要求1到28中任一项所述的方法，其中所述第一多链嵌合多肽中的所述亲和结构域对是来自人IL
‑
15受体的α链(IL15Rα)的sushi结构域和可溶性IL
‑
15。30.根据权利要求29所述的方法，其中所述可溶性IL
‑
15具有D8N或D8A氨基酸取代。31.根据权利要求29所述的方法，其中所述可溶性IL
‑
15包括与SEQ ID NO:26具有80％同一性的序列。32.根据权利要求31所述的方法，其中所述可溶性IL
‑
15包括与SEQ ID NO:26具有90％同一性的序列。33.根据权利要求32所述的方法，其中所述可溶性IL
‑
15包括与SEQ ID NO:26具有95％同一性的序列。34.根据权利要求33所述的方法，其中所述可溶性IL
‑
15包括SEQ ID NO:26。35.根据权利要求29到34中任一项所述的方法，其中所述IL15Rα的sushi结构域包括来自人IL15Rα的sushi结构域。36.根据权利要求35所述的方法，其中所述来自人IL15Rα的sushi结构域包括与SEQ ID NO:24具有80％同一性的序列。37.根据权利要求36所述的方法，其中所述来自人IL15Rα的sushi结构域包括与SEQ ID NO:24具有90％同一性的序列。38.根据权利要求37所述的方法，其中所述来自人IL15Rα的sushi结构域包括与SEQ ID NO:24具有95％同一性的序列。39.根据权利要求38所述的方法，其中所述来自人IL15Rα的sushi结构域包括SEQ ID NO:24。
40.根据权利要求35所述的方法，其中所述来自人IL15Rα的sushi结构域是成熟的全长IL15Rα。41.根据权利要求1到28中任一项所述的方法，其中所述第一多链嵌合多肽中的所述亲和结构域对选自由以下组成的组：barnase和barnstar、PKA和AKAP、基于突变核糖核酸酶I片段的衔接子/对接标签模块，以及基于蛋白质突触融合蛋白、突触结合蛋白、突触小泡蛋白和SNAP25相互作用的SNARE模块。42.根据权利要求1到41中任一项所述的方法，其中所述第一多链嵌合多肽中的所述第一靶结合结构域和所述第二靶结合结构域各自独立地为可溶性IL
‑
15或可溶性IL
‑
18。43.根据权利要求1到42中任一项所述的方法，其中所述第一多链嵌合多肽中的所述第一靶结合结构域特异性结合到IL
‑
12受体，并且所述第一多链嵌合多肽中的所述第二靶结合结构域特异性结合到IL
‑
18受体。44.根据权利要求1到42中任一项所述的方法，其中所述第一多链嵌合多肽中的所述第一靶结合结构域特异性结合到IL
‑
18受体，并且所述第一多链嵌合多肽中的所述第二靶结合结构域特异性结合到IL
‑
12受体。45.根据权利要求53所述的方法，其中所述第一多链嵌合多肽中的所述第一靶结合结构域包括可溶性IL
‑
18。46.根据权利要求45所述的方法，其中所述可溶性IL
‑
18是可溶性人IL
‑
18。47.根据权利要求46所述的方法，其中所述可溶性人IL
‑
18包括与SEQ ID NO:20具有至少80％同一性的序列。48.根据权利要求47所述的方法，其中所述可溶性人IL
‑
18包括与SEQ ID NO:20具有至少90％同一性的序列。49.根据权利要求48所述的方法，其中所述可溶性人IL
‑
18包括与SEQ ID NO:20具有至少95％同一性的序列。50.根据权利要求49所述的方法，其中所述可溶性人IL
‑
18包括SEQ ID NO:20的序列。51.根据权利要求44到50中任一项所述的方法，其中所述第一多链嵌合多肽中的所述第二靶结合结构域包括可溶性IL
‑
12。52.根据权利要求51所述的方法，其中所述可溶性IL
‑
12是可溶性人IL
‑
12。53.根据权利要求52所述的方法，其中所述可溶性人IL
‑
12包括可溶性人IL
‑
12β(p40)序列和可溶性人IL
‑
12α(p35)序列。54.根据权利要求53所述的方法，其中所述可溶性人IL
‑
15进一步包括可溶性IL
‑
12β(p40)序列和可溶性人IL
‑
12α(p35)序列之间的接头序列。55.根据权利要求54所述的方法，其中所述接头序列包括SEQ ID NO:11。56.根据权利要求53到55中任一项所述的方法，其中所述可溶性人IL
‑
12β(p40)序列包括与SEQ ID NO:14具有至少80％同一性的序列。57.根据权利要求56所述的方法，其中所述可溶性人IL
‑
12β(p40)序列包括与SEQ ID NO:14具有至少90％同一性的序列。58.根据权利要求57所述的方法，其中所述可溶性人IL
‑
12β(p40)序列包括与SEQ ID NO:14具有至少95％同一性的序列。59.根据权利要求58所述的方法，其中所述可溶性人IL
‑
12β(p40)序列包括SEQ ID NO:
14。60.根据权利要求53到59中任一项所述的方法，其中所述可溶性人IL
‑
12α(p35)序列包括与SEQ ID NO:16具有至少80％同一性的序列。61.根据权利要求60所述的方法，其中所述可溶性人IL
‑
12α(p35)序列包括与SEQ ID NO:16具有至少90％同一性的序列。62.根据权利要求61所述的方法，其中所述可溶性人IL
‑
12α(p35)序列包括与SEQ ID NO:16具有至少95％同一性的序列。63.根据权利要求62所述的方法，其中所述可溶性人IL
‑
12α(p35)序列包括SEQ ID NO:16。64.根据权利要求1所述的方法，其中所述第一多链嵌合多肽中的所述第一嵌合多肽包括与YFGKLESKLSVIRNLNDQVLFIDQGNRPLFEDMTDSDCRDNAPRTIFIISMYKDSQPRGMAVTISVKCEKISTLSCENKIISFKEMNPPDNIKDTKSDIIFFQRSVPGHDNKMQFESSSYEGYFLACEKERDLFKLILKKEDELGDRSIMFTVQNEDSGTTNTVAAYNLTWKSTNFKTILEWEPKPVNQVYTVQISTKSGDWKSKCFYTTDTECDLTDEIVKDVKQTYLARVFSYPAGNVESTGSAGEPLYENSPEFTPYLETNLGQPTIQSFEQVGTKVNVTVEDERTLVRRNNTFLSLRDVFGKDLIYTLYYWKSSSSGKKTAKTNTNEFLIDVDKGENYCFSVQAVIPSRTVNRKSTDSPVECMGQEKGEFRENWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLESGDASIHDTVENLIILANNSLSSNGNVTESGCKECEELEEKNIKEFLQSFVHIVQMFINTS(SEQ ID NO:63)具有至少80％同一性的序列。65.根据权利要求64所述的方法，其中所述第一多链嵌合多肽中的所述第一嵌合多肽包括与SEQ ID NO:63具有至少90％同一性的序列。66.根据权利要求65所述的方法，其中所述第一多链嵌合多肽中的所述第一嵌合多肽包括与SEQ ID NO:63具有至少95％同一性的序列。67.根据权利要求66所述的方法，其中所述第一多链嵌合多肽中的所述第一嵌合多肽包括SEQ ID NO:63。68.根据权利要求67所述的方法，其中所述第一多链嵌合多肽中的所述第一嵌合多肽包括MKWVTFISLLFLFSSAYSYFGKLESKLSVIRNLNDQVLFIDQGNRPLFEDMTDSDCRDNAPRTIFIISMYKDSQPRGMAVTISVKCEKISTLSCENKIISFKEMNPPDNIKDTKSDIIFFQRSVPGHDNKMQFESSSYEGYFLACEKERDLFKLILKKEDELGDRSIMFTVQNEDSGTTNTVAAYNLTWKSTNFKTILEWEPKPVNQVYTVQISTKSGDWKSKCFYTTDTECDLTDEIVKDVKQTYLARVFSYPAGNVESTGSAGEPLYENSPEFTPYLETNLGQPTIQSFEQVGTKVNVTVEDERTLVRRNNTFLSLRDVFGKDLIYTLYYWKSSSSGKKTAKTNTNEFLIDVDKGENYCFSVQAVIPSRTVNRKSTDSPVECMGQEKGEFRENWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLESGDASIHDTVENLIILANNSLSSNGNVTESGCKECEELEEKNIKEFLQSFVHIVQMFINTS(SEQ ID NO:64)。69.根据权利要求1和64到68中任一项所述的方法，其中所述第二嵌合多肽包括与IWELKKDVYVVELDWYPDAPGEMVVLTCDTPEEDGITWTLDQSSEVLGSGKTLTIQVKEFGDAGQYTCHKGGEVLSHSLLLLHKKEDGIWSTDILKDQKEPKNKTFLRCEAKNYSGRFTCWWLTTISTDLTFSVKSSRGSSDPQGVTCGAATLSAERVRGDNKEYEYSVECQEDSACPAAEESLPIEVMVDAVHKLKYENYTSSFFIRDIIKPDPPKNLQLKPLKNSRQVEVSWEYPDTWSTPHSYFSLTFCVQVQGKSKREKKDRVFTDKTSATVICRKNASISVRAQDRYYSSSWSEWASVPCSGGGGSGGGGSGGGGSRNLPVATPDPGMFPCLHHSQNLLRAVSNMLQKARQTLEFYPCTSEEIDHEDITKDKTSTVEA
CLPLELTKNESCLNSRETSFITNGSCLASRKTSFMMALCLSSIYEDLKMYQVEFKTMNAKLLMDPKRQIFLDQNMLAVIDELMQALNFNSETVPQKSSLEEPDFYKTKIKLCILLHAFRIRAVTIDRVMSYLNASITCPPPMSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFKRKAGTSSLTECVLNKATNVAHWTTPSLKCIR(SEQ ID NO:65)具有至少80％同一性的序列。70.根据权利要求69所述的方法，其中所述第二嵌合多肽包括与SEQ ID NO:65具有至少90％同一性的序列。71.根据权利要求70所述的方法，其中所述第二嵌合多肽包括与SEQ ID NO:65具有至少95％同一性的序列。72.根据权利要求71所述的方法，其中所述第二嵌合多肽包括SEQ ID NO:65。73.根据权利要求72所述的方法，其中所述第二嵌合多肽包括MKWVTFISLLFLFSSAYSIWELKKDVYVVELDWYPDAPGEMVVLTCDTPEEDGITWTLDQSSEVLGSGKTLTIQVKEFGDAGQYTCHKGGEVLSHSLLLLHKKEDGIWSTDILKDQKEPKNKTFLRCEAKNYSGRFTCWWLTTISTDLTFSVKSSRGSSDPQGVTCGAATLSAERVRGDNKEYEYSVECQEDSACPAAEESLPIEVMVDAVHKLKYENYTSSFFIRDIIKPDPPKNLQLKPLKNSRQVEVSWEYPDTWSTPHSYFSLTFCVQVQGKSKREKKDRVFTDKTSATVICRKNASISVRAQDRYYSSSWSEWASVPCSGGGGSGGGGSGGGGSRNLPVATPDPGMFPCLHHSQNLLRAVSNMLQKARQTLEFYPCTSEEIDHEDITKDKTSTVEACLPLELTKNESCLNSRETSFITNGSCLASRKTSFMMALCLSSIYEDLKMYQVEFKTMNAKLLMDPKRQIFLDQNMLAVIDELMQALNFNSETVPQKSSLEEPDFYKTKIKLCILLHAFRIRAVTIDRVMSYLNASITCPPPMSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFKRKAGTSSLTECVLNKATNVAHWTTPSLKCIR(SEQ ID NO:66)。74.根据权利要求1到73中任一项所述的方法，其中所述第二多链嵌合多肽中的所述第一嵌合多肽中的所述第一靶结合结构域和所述接头结构域在所述第一嵌合多肽中彼此直接邻接。75.根据权利要求1到73中任一项所述的方法，其中所述第二多链嵌合多肽中的所述第一嵌合多肽进一步包括所述第一嵌合多肽中的所述第一靶结合结构域和所述接头结构域之间的接头序列。76.根据权利要求1到75中任一项所述的方法，其中所述接头结构域和所述亲和结构域对的所述第一结构域在所述第二多链嵌合多肽中的所述第一嵌合多肽中彼此直接邻接。77.根据权利要求1到75中任一项所述的方法，其中所述第二多链嵌合多肽中的所述第一嵌合多肽进一步包括所述第一嵌合多肽中的所述接头结构域和所述亲和结构域对的所述第一结构域之间的接头序列。78.根据权利要求1到77中任一项所述的方法，其中所述第二多链嵌合多肽的所述第二嵌合多肽中的所述亲和结构域对的所述第二结构域和所述第二靶结合结构域在所述第二嵌合多肽中彼此直接邻接。79.根据权利要求1到77中任一项所述的方法，其中所述第二多链嵌合多肽中的所述第二嵌合多肽进一步包括所述第二嵌合多肽中的所述亲和结构域对的所述第二结构域和所述第二靶结合结构域之间的接头序列。80.根据权利要求1到79中任一项所述的方法，其中所述接头结构域是可溶性组织因子结构域。81.根据权利要求80所述的方法，其中所述可溶性组织因子结构域是可溶性人组织因
子结构域。82.根据权利要求81所述的方法，其中所述可溶性人组织因子结构域包括与SEQ ID NO:5具有至少80％同一性的序列。83.根据权利要求82所述的方法，其中所述可溶性人组织因子结构域包括与SEQ ID NO:5具有至少90％同一性的序列。84.根据权利要求83所述的方法，其中所述可溶性人组织因子结构域包括与SEQ ID NO:5具有至少95％同一性的序列。85.根据权利要求84所述的方法，其中所述可溶性人组织因子结构域包括SEQ ID NO:5。86.根据权利要求81所述的方法，其中所述可溶性人组织因子结构域包括与SEQ ID NO:9具有至少80％同一性的序列。87.根据权利要求86所述的方法，其中所述可溶性人组织因子结构域包括与SEQ ID NO:9具有至少90％同一性的序列。88.根据权利要求87所述的方法，其中所述可溶性人组织因子结构域包括与SEQ ID NO:9具有至少95％同一性的序列。89.根据权利要求88所述的方法，其中所述可溶性人组织因子结构域包括SEQ ID NO:9。90.根据权利要求81所述的方法，其中所述可溶性人组织因子结构域包括与SEQ ID NO:10具有至少80％同一性的序列。91.根据权利要求90所述的方法，其中所述可溶性人组织因子结构域包括与SEQ ID NO:10具有至少90％同一性的序列。92.根据权利要求91所述的方法，其中所述可溶性人组织因子结构域包括与SEQ ID NO:10具有至少95％同一性的序列。93.根据权利要求92所述的方法，其中所述可溶性人组织因子结构域包括SEQ ID NO:10。94.根据权利要求82到84、86到88和90到92中任一项所述的方法，其中所述可溶性人组织因子结构域不包括以下中的一个或多个：在对应于成熟野生型人组织因子蛋白的氨基酸位置20的氨基酸位置处的赖氨酸；在对应于成熟野生型人组织因子蛋白的氨基酸位置22的氨基酸位置处的异亮氨酸；在对应于成熟野生型人组织因子蛋白的氨基酸位置45的氨基酸位置处的色氨酸；在对应于成熟野生型人组织因子蛋白的氨基酸位置58的氨基酸位置处的天冬氨酸；在对应于成熟野生型人组织因子蛋白的氨基酸位置94的氨基酸位置处的酪氨酸；在对应于成熟野生型人组织因子蛋白的氨基酸位置135的氨基酸位置处的精氨酸；以及在对应于成熟野生型人组织因子蛋白的氨基酸位置140的氨基酸位置处的苯丙氨酸。95.根据权利要求94所述的方法，其中所述可溶性人组织因子结构域不包括以下中的任一个：在对应于成熟野生型人组织因子蛋白的氨基酸位置20的氨基酸位置处的赖氨酸；在对应于成熟野生型人组织因子蛋白的氨基酸位置22的氨基酸位置处的异亮氨酸；
在对应于成熟野生型人组织因子蛋白的氨基酸位置45的氨基酸位置处的色氨酸；在对应于成熟野生型人组织因子蛋白的氨基酸位置58的氨基酸位置处的天冬氨酸；在对应于成熟野生型人组织因子蛋白的氨基酸位置94的氨基酸位置处的酪氨酸；在对应于成熟野生型人组织因子蛋白的氨基酸位置135的氨基酸位置处的精氨酸；以及在对应于成熟野生型人组织因子蛋白的氨基酸位置140的氨基酸位置处的苯丙氨酸。96.根据权利要求81到95中任一项所述的方法，其中所述可溶性组织因子结构域不能结合因子VIIa。97.根据权利要求81到96中任一项所述的方法，其中所述可溶性组织因子结构域不将无活性的因子X转化为因子Xa。98.根据权利要求81到97中任一项所述的方法，其中所述第二多链嵌合多肽不刺激哺乳动物中的凝血。99.根据权利要求1到98中任一项所述的方法，其中所述第二多链嵌合多肽中的所述第一嵌合多肽和/或所述第二嵌合多肽进一步包括在其N端处的信号序列。100.根据权利要求99所述的方法，其中所述信号序列包括SEQ ID NO:28。101.根据权利要求100所述的方法，其中所述信号序列是SEQ ID NO:28。102.根据权利要求1到101中任一项所述的方法，其中所述第二多链嵌合多肽中的所述亲和结构域对是来自人IL
‑
15受体的α链(IL15Rα)的sushi结构域和可溶性IL
‑
15。103.根据权利要求102所述的方法，其中所述可溶性IL
‑
15具有D8N或D8A氨基酸取代。104.根据权利要求102所述的方法，其中所述可溶性IL
‑
15包括与SEQ ID NO:26具有80％同一性的序列。105.根据权利要求104所述的方法，其中所述可溶性IL
‑
15包括与SEQ ID NO:26具有90％同一性的序列。106.根据权利要求105所述的方法，其中所述可溶性IL
‑
15包括与SEQ ID NO:26具有95％同一性的序列。107.根据权利要求106所述的方法，其中所述可溶性IL
‑
15包括SEQ ID NO:26。108.根据权利要求102到107中任一项所述的方法，其中所述IL15Rα的sushi结构域包括来自人IL15Rα的sushi结构域。109.根据权利要求108所述的方法，其中所述来自人IL15Rα的sushi结构域包括与SEQ ID NO:24具有80％同一性的序列。110.根据权利要求109所述的方法，其中所述来自人IL15Rα的sushi结构域包括与SEQ ID NO:24具有90％同一性的序列。111.根据权利要求110所述的方法，其中所述来自人IL15Rα的sushi结构域包括与SEQ ID NO:24具有95％同一性的序列。112.根据权利要求111所述的方法，其中所述来自人IL15Rα的sushi结构域包括SEQ ID NO:24。113.根据权利要求108所述的方法，其中所述来自人IL15Rα的sushi结构域是成熟的全长IL15Rα。114.根据权利要求1到101中任一项所述的方法，其中所述第二多链嵌合多肽中的所述
亲和结构域对选自由以下组成的组：barnase和barnstar、PKA和AKAP、基于突变核糖核酸酶I片段的衔接子/对接标签模块，以及基于蛋白质突触融合蛋白、突触结合蛋白、突触小泡蛋白和SNAP25相互作用的SNARE模块。115.根据权利要求1到114中任一项所述的方法，其中所述第二多链嵌合多肽中的所述第一靶结合结构域和所述第二靶结合结构域各自独立地为可溶性IL
‑
7或可溶性IL
‑
21。116.根据权利要求1到115中任一项所述的方法，其中所述第二多链嵌合多肽中的所述第一靶结合结构域特异性结合到IL
‑
21受体，并且所述第二多链嵌合多肽中的所述第二靶结合结构域特异性结合到IL
‑
7受体。117.根据权利要求1到115中任一项所述的方法，其中所述第二多链嵌合多肽中的所述第一靶结合结构域特异性结合到IL
‑
7受体，并且所述第二多链嵌合多肽中的所述第二靶结合结构域特异性结合到IL
‑
21受体。118.根据权利要求117所述的方法，其中所述第二多链嵌合多肽中的所述第一靶结合结构域包括可溶性IL
‑
21。119.根据权利要求118所述的方法，其中所述可溶性IL
‑
21是可溶性人IL
‑
21。120.根据权利要求119所述的方法，其中所述可溶性人IL
‑
21包括与SEQ ID NO:22具有至少80％同一性的序列。121.根据权利要求120所述的方法，其中所述可溶性人IL
‑
21包括与SEQ ID NO:22具有至少90％同一性的序列。122.根据权利要求121所述的方法，其中所述可溶性人IL
‑
21包括与SEQ ID NO:22具有至少95％同一性的序列。123.根据权利要求122所述的方法，其中所述可溶性人IL
‑
21包括SEQ ID NO:22的序列。124.根据权利要求117到123中任一项所述的方法，其中所述第二靶结合结构域包括可溶性IL
‑
7。125.根据权利要求124所述的方法，其中所述可溶性IL
‑
7是可溶性人IL
‑
7。126.根据权利要求125所述的方法，其中所述可溶性人IL
‑
7包括与SEQ ID NO:23具有至少80％同一性的序列。127.根据权利要求126所述的方法，其中所述可溶性人IL
‑
7包括与SEQ ID NO:23具有至少90％同一性的序列。128.根据权利要求127所述的方法，其中所述可溶性人IL
‑
7包括与SEQ ID NO:23具有至少95％同一性的序列。129.根据权利要求128所述的方法，其中所述可溶性人IL
‑
7包括SEQ ID NO:23的序列。130.根据权利要求1所述的方法，其中所述第二多链嵌合多肽中的所述第一嵌合多肽包括与DCDIEGKDGKQYESVLMVSIDQLLDSMKEIGSNCLNNEFNFFKRHICDANKEGMFLFRAARKLRQFLKMNSTGDFDLHLLKVSEGTTILLNCTGQVKGRKPAALGEAQPTKSLEENKSLKEQKKLNDLCFLKRLLQEIKTCWNKILMGTKEHSGTTNTVAAYNLTWKSTNFKTILEWEPKPVNQVYTVQISTKSGDWKSKCFYTTDTECDLTDEIVKDVKQTYLARVFSYPAGNVESTGSAGEPLYENSPEFTPYLETNLGQPTIQSFEQVGTKVNVTVEDERTLVRRNNTFLSLRDVFGKDLIYTLYYWKSSSSGKKTAKTNTNEFLIDVDKGENYCFSVQAVIPSRTVNRKSTDSPVECMGQEKGEFRENWVNV
ISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLESGDASIHDTVENLIILANNSLSSNGNVTESGCKECEELEEKNIKEFLQSFVHIVQMFINTS(SEQ ID NO:67)具有至少80％同一性的序列。131.根据权利要求130所述的方法，其中所述第二多链嵌合多肽中的所述第一嵌合多肽包括与SEQ ID NO:67具有至少90％同一性的序列。132.根据权利要求131所述的方法，其中所述第二多链嵌合多肽中的所述第一嵌合多肽包括与SEQ ID NO:67具有至少95％同一性的序列。133.根据权利要求132所述的方法，其中所述第二多链嵌合多肽中的所述第一嵌合多肽包括SEQ ID NO:67。134.根据权利要求133所述的方法，其中所述第二多链嵌合多肽中的所述第一嵌合多肽包括MKWVTFISLLFLFSSAYSDCDIEGKDGKQYESVLMVSIDQLLDSMKEIGSNCLNNEFNFFKRHICDANKEGMFLFRAARKLRQFLKMNSTGDFDLHLLKVSEGTTILLNCTGQVKGRKPAALGEAQPTKSLEENKSLKEQKKLNDLCFLKRLLQEIKTCWNKILMGTKEHSGTTNTVAAYNLTWKSTNFKTILEWEPKPVNQVYTVQISTKSGDWKSKCFYTTDTECDLTDEIVKDVKQTYLARVFSYPAGNVESTGSAGEPLYENSPEFTPYLETNLGQPTIQSFEQVGTKVNVTVEDERTLVRRNNTFLSLRDVFGKDLIYTLYYWKSSSSGKKTAKTNTNEFLIDVDKGENYCFSVQAVIPSRTVNRKSTDSPVECMGQEKGEFRENWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLESGDASIHDTVENLIILANNSLSSNGNVTESGCKECEELEEKNIKEFLQSFVHIVQMFINTS(SEQ ID NO:68)。135.根据权利要求1和130到134中任一项所述的方法，其中所述第二多链嵌合多肽中的所述第二嵌合多肽包括与QGQDRHMIRMRQLIDIVDQLKNYVNDLVPEFLPAPEDVETNCEWSAFSCFQKAQLKSANTGNNERIINVSIKKLKRKPPSTNAGRRQKHRLTCPSCDSYEKKPPKEFLERFKSLLQKMIHQHLSSRTHGSEDSITCPPPMSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFKRKAGTSSLTECVLNKATNVAHWTTPSLKCIR(SEQ ID NO:69)具有至少80％同一性的序列。136.根据权利要求135所述的方法，其中所述第二多链嵌合多肽中的所述第二嵌合多肽包括与SEQ ID NO:69具有至少90％同一性的序列。137.根据权利要求136所述的方法，其中所述第二多链嵌合多肽中的所述第二嵌合多肽包括与SEQ ID NO:69具有至少95％同一性的序列。138.根据权利要求137所述的方法，其中所述第二多链嵌合多肽中的所述第二嵌合多肽包括SEQ ID NO:69。139.根据权利要求138所述的方法，其中所述第二多链嵌合多肽中的所述第二嵌合多肽包括MKWVTFISLLFLFSSAYSQGQDRHMIRMRQLIDIVDQLKNYVNDLVPEFLPAPEDVETNCEWSAFSCFQKAQLKSANTGNNERIINVSIKKLKRKPPSTNAGRRQKHRLTCPSCDSYEKKPPKEFLERFKSLLQKMIHQHLSSRTHGSEDSITCPPPMSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFKRKAGTSSLTECVLNKATNVAHWTTPSLKCIR(SEQ ID NO:70)。140.根据权利要求1所述的方法，其中所述第二多链嵌合多肽中的所述第一嵌合多肽包括与QGQDRHMIRMRQLIDIVDQLKNYVNDLVPEFLPAPEDVETNCEWSAFSCFQKAQLKSANTGNNERIINVSIKKLKRKPPSTNAGRRQKHRLTCPSCDSYEKKPPKEFLERFKSLLQKMIHQHLSSRTHGSEDSSGTTNTVAAYNLTWK
STNFKTILEWEPKPVNQVYTVQISTKSGDWKSKCFYTTDTECDLTDEIVKDVKQTYLARVFSYPAGNVESTGSAGEPLYENSPEFTPYLETNLGQPTIQSFEQVGTKVNVTVEDERTLVRRNNTFLSLRDVFGKDLIYTLYYWKSSSSGKKTAKTNTNEFLIDVDKGENYCFSVQAVIPSRTVNRKSTDSPVECMGQEKGEFRENWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLESGDASIHDTVENLIILANNSLSSNGNVTESGCKECEELEEKNIKEFLQSFVHIVQMFINTS(SEQ ID NO:71)具有至少80％同一性的序列。141.根据权利要求140所述的方法，其中所述第二多链嵌合多肽中的所述第一嵌合多肽包括与SEQ ID NO:71具有至少90％同一性的序列。142.根据权利要求141所述的方法，其中所述第二多链嵌合多肽中的所述第一嵌合多肽包括与SEQ ID NO:71具有至少95％同一性的序列。143.根据权利要求142所述的方法，其中所述第二多链嵌合多肽中的所述第一嵌合多肽包括SEQ ID NO:71。144.根据权利要求143所述的方法，其中所述第二多链嵌合多肽中的所述第一嵌合多肽包括MGVKVLFALICIAVAEAQGQDRHMIRMRQLIDIVDQLKNYVNDLVPEFLPAPEDVETNCEWSAFSCFQKAQLKSANTGNNERIINVSIKKLKRKPPSTNAGRRQKHRLTCPSCDSYEKKPPKEFLERFKSLLQKMIHQHLSSRTHGSEDSSGTTNTVAAYNLTWKSTNFKTILEWEPKPVNQVYTVQISTKSGDWKSKCFYTTDTECDLTDEIVKDVKQTYLARVFSYPAGNVESTGSAGEPLYENSPEFTPYLETNLGQPTIQSFEQVGTKVNVTVEDERTLVRRNNTFLSLRDVFGKDLIYTLYYWKSSSSGKKTAKTNTNEFLIDVDKGENYCFSVQAVIPSRTVNRKSTDSPVECMGQEKGEFRENWVNVISDLKKIEDLIQSMHIDATLYTESDVHPSCKVTAMKCFLLELQVISLESGDASIHDTVENLIILANNSLSSNGNVTESGCKECEELEEKNIKEFLQSFVHIVQMFINTS(SEQ ID NO:72)。145.根据权利要求1和140到144中任一项所述的方法，其中所述第二多链嵌合多肽中的所述第二嵌合多肽包括与DCDIEGKDGKQYESVLMVSIDQLLDSMKEIGSNCLNNEFNFFKRHICDANKEGMFLFRAARKLRQFLKMNSTGDFDLHLLKVSEGTTILLNCTGQVKGRKPAALGEAQPTKSLEENKSLKEQKKLNDLCFLKRLLQEIKTCWNKILMGTKEHITCPPPMSVEHADIWVKSYSLYSRERYICNSGFKRKAGTSSLTECVLNKATNVAHWTTPSLKCIR(SEQ ID NO:73)具有至少80％同一性的序列。146.根据权利要求145所述的方法，其中所述第二多链嵌合多肽中的所述第二嵌合多肽包括与SEQ ID NO:73具有至少90％同一性的序列。147.根据权利要求146所述的方法，其中所述第二多链嵌合多肽中的所述第二嵌合多肽包括与SEQ ID NO:73具有至少95％同一性的序列。148...
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