用于治疗骨关节炎或者修复软骨损伤的组合物及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种用于治疗骨关节炎或者修复软骨损伤的组合物及其制备方法，属于生物技术领域。该用于治疗骨关节炎或者修复软骨损伤的组合物，由间充质干细胞、富血小板血浆、第一氯化钙和凝血酶溶液混合得到；富血小板血浆包括第二氯化钙和血小板血浆；第一氯化钙在间充质干细胞制剂的浓度为20

【技术实现步骤摘要】
用于治疗骨关节炎或者修复软骨损伤的组合物及其制备方法


[0001]本专利技术涉及生物
，具体涉及一种用于治疗骨关节炎或者修复软骨损伤的组合物及其制备方法。

技术介绍

[0002]骨关节炎是一种退行性病变，系由于增龄、肥胖、劳损、创伤、关节先天性异常、关节畸形等诸多因素引起的关节软骨退化损伤、关节边缘和软骨下骨反应性增生。本病多见于中老年人群，好发于负重关节及活动量较多的关节（如，颈椎、腰椎、膝关节、髋关节等）。过度负重或过度使用这些关节，均可促进退行性变化的发生。临床表现为缓慢发展的关节疼痛、压痛、僵硬、关节肿胀、活动受限和关节畸形等。
[0003]另外关节软骨损伤也会引起关节疼痛、肿胀及功能障碍，严重影响患者的生活质量及身体健康。
[0004]目前骨关节炎或者关节软骨损伤的常规的治疗以物理治疗、中医治疗、药物治疗、封闭治疗等为主流方向，但疗效不理想，远期疗效更差，也有应用富血小板血浆关节腔注射、玻璃酸钠关节腔注射，各种细胞再生疗法。争对富血小板血浆关节腔注射存在因药物快速扩散导致治疗效果不佳的问题。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于克服上述技术不足，提供一种用于治疗骨关节炎或者修复软骨损伤的组合物及其制备方法，解决现有技术中治疗骨关节炎或者修复软骨损伤的效果不佳的技术问题。
[0006]为达到上述技术目的，本专利技术的技术方案提供一种用于治疗骨关节炎或者修复软骨损伤的组合物，由间充质干细胞、富血小板血浆、第一氯化钙和凝血酶溶液混合得到；所述富血小板血浆包括第二氯化钙和血小板血浆；所述第一氯化钙在所述间充质干细胞制剂的浓度为20
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40mg/mL，所述第二氯化钙在所述富血小板血浆中的浓度为60
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70mg/mL。
[0007]进一步地，所述间充质干细胞与所述富血小板血浆的体积比为1
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3:1。
[0008]进一步地，所述凝血酶溶液与所述间充质干细胞的体积比为1:10
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15。
[0009]进一步地，所述间充质干细胞制剂还包括玻璃酸钠，所述间充质干细胞制剂由间充质干细胞、富血小板血浆、第一氯化钙、凝血酶溶液和玻璃酸钠混合得到。
[0010]进一步地，所述玻璃酸钠与所述间充质干细胞的体积比为1:5
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10。
[0011]此外，本专利技术还提出一种上述组合物的制备方法，包括以下步骤：将第二氯化钙与血小板血浆在15
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30℃下混合得到富血小板血浆；将所述间充质干细胞、第一氯化钙和凝血酶溶液混合得到混合物；将所述富血小板血浆与所述混合物混合得到所述间充质干细胞制剂。
[0012]进一步地，将所述富血小板血浆与所述混合物在15
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30℃下混合得到所述间充质干细胞制剂。
[0013]进一步地，所述血小板血浆由以下步骤制得：将全血离心得到血清层、血浆层和红细胞层，取所述血浆层即为所述血小板血浆。
[0014]与现有技术相比，本专利技术的有益效果包括：间充质干细胞、富血小板血浆组合物、第一氯化钙和凝血酶溶液混合得到，富血小板血浆组合物包括第二氯化钙和血小板血浆；所述第一氯化钙在所述间充质干细胞制剂的浓度为20
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40mg/mL，所述第二氯化钙在所述富血小板血浆中的浓度为60
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70mg/mL，氯化钙和凝血酶能够将血小板的凝血与释放生长细胞因子的功能激活，而且又可促进间充质干细胞在膝关节腔内成软骨分化修复软骨损伤，且分泌多种关节润滑成分调节免疫和抗炎，本专利技术通过将间充质干细胞制剂中的氯化钙的浓度控制在20
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40mg/mL，富血小板血浆中氯化钙的浓度控制在60
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70mg/mL可控制各组分混合后得到的组合物注射前为流动态，注射至治疗对象的作用位置后变为凝胶状态，使得组合物中的血小板缓慢释放生长细胞因子和其他组分，进而在其他组分的协同作用下提高了治疗效果且缩短了治疗周期，每周注射一次，共注射三次即可有较为明显的改善效果。
具体实施方式
[0015]本具体实施方式提供了一种用于治疗骨关节炎或者修复软骨损伤的组合物，由间充质干细胞、富血小板血浆、第一氯化钙和凝血酶溶液混合得到；所述富血小板血浆包括第二氯化钙和血小板血浆；所述第一氯化钙在所述间充质干细胞制剂的浓度为20
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40mg/mL，所述第二氯化钙在所述富血小板血浆中的浓度为60
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70mg/mL；所述间充质干细胞与所述富血小板血浆的体积比为1
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3:1；所述凝血酶溶液与所述间充质干细胞的体积比为1:10
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15。
[0016]在某些优选的实施例中，所述间充质干细胞制剂还包括玻璃酸钠，所述间充质干细胞制剂由间充质干细胞、富血小板血浆、第一氯化钙、凝血酶溶液和玻璃酸钠混合得到，所述玻璃酸钠与所述间充质干细胞的体积比为1:5
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10。玻璃酸钠能够随着细胞生长隐私缓慢释放，进而能明显改善滑液组织的炎症反应，增强关节液的粘稠性和润滑功能，保护关节软骨，促进关节软骨的愈合与再生，增加关节活动度。
[0017]本具体实施方式中，所述间充质干细胞可来源于脐带血、胎盘组织和自体脂肪组织，采用现有技术的培养方法得到。
[0018]本具体实施方式还包括一种上述组合物的制备方法，包括以下步骤：将第二氯化钙与血小板血浆在15
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30℃下混合得到富血小板血浆；所述血小板血浆由以下步骤制得：将全血离心得到血清层、血浆层和红细胞层，取所述血浆层即为所述血小板血浆；将所述间充质干细胞、第一氯化钙和凝血酶溶液混合得到混合物；将所述富血小板血浆与所述混合物在15
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30℃下混合得到所述间充质干细胞制剂。
[0019]为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。
[0020]需要说明的是，下述实施例中的间充质干细胞由以下步骤制得：用蒸馏水将脐带冲洗干净，然后用酒精棉将脐带表面擦拭干净；依次用0.3％的胰蛋白酶（30 min）和0.3的％胶原酶P（2 h）在37℃、体积分数为5%
的CO2培养箱中消化； 消化结束后，经100目钢网过滤，1500 r/min离心3min弃去上清液。清洗3次，重悬细胞并计数； 以4.5
×
104个有核细胞平铺于培养瓶中，37℃、5%的CO2作为原代SMSCs培养；24 h后换液，除去未贴壁细胞，继续培养12 d；待细胞达到80％融合时，吸出原有干细胞培养上清，加入10ml生理盐水将残留培养基，洗出；用2ml0.025%胰酶稀释液消化2min，加入5ml消化终止液，终止胰酶的消化； 收集P0间充质干细胞计数，按照细胞数1x10
6 /T175瓶接种于T175培养瓶中进行P1代培养，并再次传代；传代至第4代时本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于治疗骨关节炎或者修复软骨损伤的组合物，其特征在于，由间充质干细胞、富血小板血浆、第一氯化钙和凝血酶溶液混合得到；所述富血小板血浆包括第二氯化钙和血小板血浆；所述第一氯化钙在所述间充质干细胞制剂的浓度为20
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40mg/mL，所述第二氯化钙在所述富血小板血浆中的浓度为60
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70mg/mL。2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述间充质干细胞与所述富血小板血浆的体积比为1
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3:1。3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述凝血酶溶液与所述间充质干细胞的体积比为1:10
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15。4.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述间充质干细胞制剂还包括玻璃酸钠，所述间充质干细胞制剂由间充质干细胞、富血小板血浆、第一氯化钙、凝血酶溶液和玻璃酸钠混...

【专利技术属性】
技术研发人员：ꢀ七四专利代理机构，
申请(专利权)人：武汉冉谷医疗有限公司，
类型：发明
国别省市：