去泛素化酶在制备预防或治疗急性移植物抗宿主病和移植物抗白血病药物中的应用制造技术

本发明专利技术属于生物医药领域，具体涉及去泛素化酶BRCC3在制备预防或治疗急性移植物抗宿主病和移植物抗白血病药物中的应用。本发明专利技术通过动物实验研究探索一种去泛素化酶BRCC3在制备预防和治疗移植物抗宿主病药物中的应用。结果发现BRCC3具有抑制异基因造血干细胞移植后急性移植物抗宿主病的作用；能抑制供体T细胞活化和T细胞的功能，抑制巨噬细胞细胞的增殖；通过蛋白酶体途径，下调Trim25的泛素化修饰，稳定Trim25的蛋白水平，进而促进IFNβ的分泌，抑制aGVHD的发生发展；同时还保留GVL效应，具有较大的应用前景。较大的应用前景。较大的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
去泛素化酶在制备预防或治疗急性移植物抗宿主病和移植物抗白血病药物中的应用


[0001]本专利技术属于生物医药领域，具体涉及去泛素化酶BRCC3在制备预防或治疗急性移植物抗宿主病和移植物抗白血病药物中的应用。

技术介绍

[0002]异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo
‑
HSCT)是目前治疗恶性血液系统疾病、某些遗传性疾病及骨髓衰竭性疾病的重要手段(图1)，主要通过供体来源的移植物介导抗白血病反应(graft
‑
versus leukemia，GVL)发挥治疗恶性血液病和防止移植后复发的关键性作用。然而，这些移植物中供体来源的T细胞也可诱导移植物抗宿主病，尤其是急性移植物抗宿主病(acute graft
‑
versushostdisease，aGVHD)是目前制约allo
‑
HSCT最严重的并发症之一，也是导致移植后发病率和死亡率的主要原因，主要累及肤、肝脏和胃肠道，靶器官可以单独或与其他器官连同受累。具有明显临床表现的aGVHD的发病率在10％～80％之间，因移植方式不同，平均发病率约为40％，特别是发生激素耐药的aGVHD，严重影响患者的生存质量和预后。因此，寻找有效的防治aGVHD手段极其重要。
[0003]泛素化属于蛋白质翻译后修饰的一种，调控蛋白质的性质或功能，参与细胞信号传导、转录调节、DNA损伤修复、细胞周期等过程，由去泛素化酶进行可逆性精密调控，共同参与稳定机体内蛋白的稳定，维持细胞功能。人源去泛素化酶BRCC36，其鼠源同源物BRCC3，属于JAMM蛋白酶家族，含Zn
2+
结构域，是构成细胞核内BRCA1
‑
A去泛素化酶复合物和细胞质内BRISC去泛素化酶复合物的核心催化活性亚基，参与炎性小体活性、干扰素信号传导和DNA损伤修复等过程。既往有关于BRCC36调控干扰素信号通路，进而影响免疫应答的机制报道。I型干扰素IFNβ的包膜受体IFNAR1受到E3泛素连接酶SCF
β
‑
Trcp
的泛素化修饰调控。BRISC去泛素化酶复合物可特异性裂解IFNAR1的泛素链结合，抑制其降解过程，从而促进细胞对I型干扰素的反应，这都为BRCC3制备药物预防癌症和自身免疫疾病提供新的治疗方法。
[0004]aGVHD的发病机制复杂，治疗效果更差，激素耐药的aGVHD患者预后差，且长期使用激素会带来糖尿病、感染、骨质疏松、精神状态异常等不良反应，影响患者生活质量，严重者危及患者生命，急需探寻出能防治aGVHD的有效方法。且既往并没有BRCC3在aGVHD中进行防治的报道。
[0005]泛素化修饰，属于蛋白翻译后修饰的一种，类似甲基化、磷酸化、乙酰化等，参与细胞信号传导、转录调节、DNA损伤修复、细胞周期、细胞凋亡、囊泡运输等生理过程。去泛素化酶能可逆调控泛素化过程,与泛素化系统共同组成一个覆盖几乎所有细胞功能的复杂网络。近年来，靶向作用于泛素化修饰过程的研究取得了一定的成果。人源去泛素化酶BRCC36，其鼠源同源物BRCC3，是一种含Zn
2+
结构域的金属蛋白去泛素化酶，既往被报道通过调控干扰素信号通路，影响免疫应答，为癌症和自身免疫疾病提供新的治疗方法。然而其在aGVHD中的作用至今尚未报道。

技术实现思路

[0006]本专利技术通过动物实验研究探索一种去泛素化酶BRCC3在制备预防和治疗移植物抗宿主病、移植物抗白血病药物中的应用。
[0007]本专利技术提供去泛素化酶BRCC3在制备预防或治疗急性移植物抗宿主病及移植物抗白血病药物的应用。
[0008]优选的，所述药物用于抑制小鼠aGVHD。
[0009]优选的，所述药物用于抑制靶器官中T细胞的活化。
[0010]优选的，所述药物用于抑制T细胞分泌IFNγ，抑制T细胞的功能。
[0011]优选的，所述药物用于抑制靶器官中巨噬细胞的产生。
[0012]优选的，所述药物用于上调E3泛素连接酶Trim25的蛋白水平。
[0013]优选的，所述药物用于通过蛋白酶体途径，下调E3泛素连接酶Trim25的泛素化，去除K48和K63位泛素水平。
[0014]优选的，所述药物用于促进IFNβ分泌。
[0015]优选的，所述药物用于在抑制aGVHD的同时抑制体内白血病细胞的生长，保留GVL效应。
[0016]本专利技术还提供一种预防或治疗急性移植物抗宿主病及移植物抗白血病的药物，所述药物包括去泛素化酶BRCC3。
[0017]进一步地，所述去泛素化酶BRCC3的用药剂量为40
‑
60μg/ml。
[0018]进一步地，所述药物的给药途径包括口服、腹腔注射、皮下注射、静脉注射和肌肉注射中的一种或多种。
[0019]本专利技术的技术方案相比现有技术具有以下优点：
[0020]本专利技术中BRCC3具有抑制异基因造血干细胞移植后急性移植物抗宿主病的作用；能抑制供体T细胞活化和T细胞的功能，抑制巨噬细胞细胞的增殖；通过蛋白酶体途径，下调Trim25的泛素化修饰，稳定Trim25的蛋白水平，进而促进IFNβ的分泌，抑制aGVHD的发生发展；同时还保留GVL效应。
附图说明
[0021]图1为GVHD模型小鼠移植后的生存曲线(A)、体重变化(B)、aGVHD评分(C)图。
[0022]图2为Vector组和BRCC3组小鼠皮肤、肺部、肠道组织H&E染色图。
[0023]图3为BRCC3对T细胞活化的抑制作用图。
[0024]图4为BRCC3对T细胞功能的抑制作用图。
[0025]图5为BRCC3对巨噬细胞的抑制图。
[0026]图6为BRCC3对E3泛素连接酶Trim25的蛋白水平的抑制作用图。
[0027]图7为BRCC3对Trim25蛋白的泛素化修饰水平的抑制作用图。
[0028]图8为BRCC3通过蛋白酶体途径调控Trim25的泛素化水平图。
[0029]图9为BRCC3促进IFNβ的转录活性的作用图。
[0030]图10为敲减BRCC3对巨噬细胞中IFNβ的表达的抑制作用图。
[0031]图11为BRCC3对巨噬细胞中IFNβ的表达和炎症因子的分泌的作用图。
[0032]图12为BRCC3在小鼠体内对IFNβ的表达的促进作用图。
[0033]图13为GVHD/GVL模型小鼠移植后的生存曲线(A)、体重变化(B)、aGVHD评分(C)图。
[0034]图14为小鼠活体成像图及量化的白血病细胞统计图。
[0035]图15为小活体成像体内荧光值的量化图。
[0036]图中，*代表P＜0.05，**代表P＜0.01，***代表P＜0.001。
具体实施方式
[0037]本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.去泛素化酶BRCC3在制备预防或治疗急性移植物抗宿主病及移植物抗白血病药物的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物用于抑制靶器官中T细胞的活化。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物用于抑制T细胞分泌IFNγ。4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物用于抑制靶器官中巨噬细胞的产生。5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物用于上调E3泛素连接酶Trim25的蛋白水平。6.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物用于通过蛋白酶体途径，下调E3泛...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐杨，程巧，吴德沛，刘吟，郑慧，朱婷婷，
申请(专利权)人：苏州大学，
类型：发明
国别省市：