NtFBA1基因在调控烟草PVY抗性方面的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种NtFBA1基因在调控烟草PVY抗性方面的应用，所述NtFBA1基因具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。通过对烟草中NtFBA1基因进行干扰会使得PVY积累减少，抗病性增强，NtFBA1可以负调控烟草PVY抗病性。本发明专利技术在筛选抗PVY病毒基因的育种中具有十分重要的应用价值。的应用价值。的应用价值。

【技术实现步骤摘要】
NtFBA1基因在调控烟草PVY抗性方面的应用


[0001]本专利技术涉及一种NtFBA1基因在调控烟草PVY抗性方面的应用，属于烟草PVY抗性调控


技术介绍

[0002]马铃薯Y病毒(Potato virusY，即PVY)是世界范围内能够侵染茄科等34个属170多种植物并造成严重经济危害的植物病毒。近年来，PVY在我国的发生面积逐年增加，并且随着田间PVY病毒重组变异和复合侵染的逐年加剧，现有基因资源难以满足抗病育种的挑战。因此筛选和鉴定新的抗PVY病毒基因并进行育种利用，是非常紧迫的工作。
[0003]果糖
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1，6
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二磷酸醛缩酶(Fructose 1,6bisphosphate aldolase，FBA)是糖酵解和糖异生途径中的一个关键酶，在高等植物中还参与卡尔文循环，在胞质中参与蔗糖的合成，而在叶绿体中则参与淀粉的合成，为生物体物质合成代谢提供能量ATP和底物。果糖
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1，6
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二磷酸醛缩酶糖酵解过程中的产物可用于脂类的合成和蛋白质代谢中，对于生物体的正常新陈代谢至关重要。
[0004]除参与碳代谢之外果糖
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1，6
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二磷酸醛缩酶在一些非生物胁迫响应方面也发挥相应功能，当植物感受到生物或非生物胁迫时，糖可以作为植物的重要信号物质响应激素和外界环境胁迫。果糖
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1，6
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二磷酸醛缩酶参与了重要的糖信号分子的合成。研究发现植物果糖
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1，6
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二磷酸醛缩酶能够影响光合作用的效率进而决定植物体的生物量产出，对提高作物的产量具有决定性的作用。果糖
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1，6
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二磷酸醛缩酶基因FBA能参与低温、高温、盐胁迫、干旱、强光等多种胁迫响应。近年来的研究结果还表明FBA基因还参与植物抗病过程，因此，研究FBA类基因对植物PVY的致病机理，具有重要意义。

技术实现思路

[0005]基于上述，本专利技术提供一种NtFBA1基因在调控烟草PVY抗性方面的应用，以提高烟草对PVY的抗性，降低PVY病毒给烟草生产带来的经济损失。
[0006]本专利技术的技术方案是：NtFBA1基因在调控烟草PVY抗性方面的应用，所述NtFBA1基因具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。
[0007]可选的，降低所述NtFBA1基因在烟草中的表达量或活性。
[0008]本专利技术的有益效果是：本专利技术提供了一种NtFBA1基因在调控烟草PVY抗性方面的应用，通过对烟草中NtFBA1基因进行干扰会使得PVY积累减少，抗病性增强，NtFBA1可以负调控烟草PVY抗病性。本专利技术在筛选抗PVY病毒基因的育种中具有十分重要的应用价值。
附图说明
[0009]图1为NtFBA1基因克隆测序结果；
[0010]图2为pET32a
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NtFBA1构建示意图；
[0011]图3为pET32a
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NtFBA1转化DH5α鉴定，图中，M:2000Marker，
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:ddH2O对照，+:阳性质
粒对照，1:pET32a
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NtFBA1转化DH5αPCR鉴定；
[0012]图4为pET32a
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NtFBA1转化BL21的鉴定，图中，M:2000Marker，
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:ddH2O对照，+:阳性质粒对照，1
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5:pET32a
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NtFBA1转化BL21转化子；
[0013]图5为pBI121
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NtTCTP
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FLAG载体构建，图中，M:2000Marker，
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:ddH2O对照，+:阳性质粒对照，1
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5:pBI121
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NtFBA1
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FLAG转化DH5αPCR鉴定；
[0014]图6为图5pBI121
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NtFBA1转化农杆菌LBA4404鉴定，图中，M:2000Marker，
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:ddH2O对照，+:阳性质粒对照，1
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2:pBI121
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NtFBA1转化LBA4404PCR；
[0015]图7为pBI121
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NtFBA1
‑
FLAG转化农杆菌LBA4404的鉴定，图中，M:2000Marker，
‑
:ddH2O对照，+:阳性质粒对照，1
‑
5:pBI121
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NtFBA1转化LBA4404 PCR检测；
[0016]图8为NtFBA1 RNAi载体构建，图中，
[0017]M1:2000Marker；M2:2000plus Marker；
‑
:ddH2O对照+:阳性质粒对照
[0018]1:NtFBA1(RNAi
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S)片段克隆2:NtFBA1(RNAi
‑
AS)片段克隆
[0019]3‑
4:pFGC5941
‑
NtFBA1(RNAi
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S)转化transT1 PCR
[0020]5:pFAST
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BluntSimple
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NtFBA1(RNAi
‑
AS)转化transT16:PFGC5941
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NtFBA1(RNAi)转化LBA4404菌液PCR
[0021]A:NtFBA1(RNAi
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S)片段克隆B:NtFBA1(RNAi
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AS)片段克隆
[0022]C:pFGC5941
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NtFBA1(RNAi
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S)转化transT1鉴定
[0023]D:pFAST
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BluntSimple
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NtFBA1(RNAi
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AS)转化transT1鉴定
[0024]E:pFGC5941
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NtFBA1(RNAi)转化LBA4404鉴定
[0025]图9为烟草遗传转化及植株再生，图中，A.预培养，B.农杆菌侵染，C.分化继代，D.抗性芽，E.分化继代，F.生根，G.驯化移栽，H.植株移栽，I.现蕾，J.开花；
[0026]图10为转NtFBA1基因过表达烟草PCR阳性鉴定；
[0027]图11为转NtFBA1基因RNAi烟草PCR阳性鉴定；
[0028]图12为转NtFBA1基因过表达烟草PVY发病率鉴定；
[0029]图13为转NtFBA1基因RNAi烟草PVY发病率鉴定；
[0030]图14为转NtFBA1基因RNAi烟草PVY病毒累积鉴本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.NtFBA1基因在调控烟草PVY抗性方面的应用，所述NtFBA1基因具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。2.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：尹国英，贾蒙骜，郭玉双，张盼，刘钊，刘茸，
申请(专利权)人：贵州省烟草科学研究院，
类型：发明
国别省市：