一种醋酸泼尼松龙滴眼液有关物质的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种醋酸泼尼松龙滴眼液有关物质的检测方法，它是采用高效液相色谱法检测。本发明专利技术检测方法能够同时准确测定醋酸泼尼松龙滴眼液中EP杂质A、EP杂质B、EP杂质C，EP杂质D和EP杂质E，从而解决醋酸泼尼松龙眼用混悬剂的质量控制问题，有利于对醋酸泼尼松龙眼用混悬剂进行质量管控。混悬剂进行质量管控。混悬剂进行质量管控。

【技术实现步骤摘要】
一种醋酸泼尼松龙滴眼液有关物质的检测方法


[0001]本专利技术涉及医药检测领域，具体涉及一种醋酸泼尼松龙滴眼液有关物质的检测方法。

技术介绍

[0002]醋酸泼尼松龙滴眼液是一种抗炎药物，它属于一种激素类的滴眼液，一般来说主要是用于眼部的炎症患者，比如虹膜睫状体炎，还有眼部的葡萄膜炎也可以使用这类滴眼液，激素对于眼部的炎症控制有较好的效果。
[0003]根据EP(欧洲药典)及成品工艺短期稳定性研究确定的降解杂质有3个，分别是EP杂质A、EP杂质B、EP杂质C，工艺杂质有两个，分别是EP杂质D、EP杂质E。
[0004][0005]EP(欧洲药典)和USP(美国药典)中，仅给出API(原料药)的有关物质检测方法，方法复杂且成品中的辅料具有一定干扰，峰纯度不足，给有关物质检测带来相当大的难度。项竞佐等，RP—HPLC法测定帕利百中醋酸泼尼松龙的含量及其有关物质[J],药学服务与研究，2003，3(2)，提供了一种醋酸泼尼松龙眼用制剂中杂质的检测方法，经试验发现，该方法得到的色谱图中EP杂质A的峰纯度角(purityangle)大于纯度阈值(puritythreshold)，即峰纯度不足，致使不能准确测定醋酸泼尼松龙滴眼液有关物质的含量。

技术实现思路

[0006]为解决上述问题，本专利技术提供了一种醋酸泼尼松龙滴眼液有关物质的检测方法，它是采用高效液相色谱法检测，具体步骤如下：
[0007]a、供试品溶液制备：取待测醋酸泼尼松龙滴眼液，加稀释剂溶解，即得；
[0008]b、对照品溶液制备：取醋酸泼尼松龙对照品，加稀释剂溶解，即得；
[0009]b、分别取对照品溶液和供试品溶液注入色谱仪，色谱条件如下：
[0010]色谱柱：以3.5μm的十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；
[0011]流动相：体积比70：30的水
‑
乙腈；
[0012]流速：0.8ml/min；
[0013]所述稀释剂为30％，v/v乙腈水溶液。
[0014]进一步地，步骤a)所述醋酸泼尼松龙滴眼液与稀释剂的体积比为0.5～2.5：10ml。
[0015]进一步地，步骤b)所述对照品溶液中醋酸泼尼松龙的浓度为1～5μg/mL。
[0016]进一步地，所述色谱柱为XTERRAMS C18，规格150
×
4.6mm，3.5μm。
[0017]进一步地，步骤c)所述色谱条件中进样量10μL，波长为254nm，柱温为35℃，样品温度：5℃。
[0018]进一步地，所述供试品溶液的色谱图中有关物质色谱峰与醋酸泼尼松龙色谱峰的相对保留时间分别为EP杂质A 1.08、EP杂质B 0.35、EP杂质C 2.03、EP杂质D 0.66、EP杂质E 2.11。
[0019]本专利技术还提供了一种醋酸泼尼松龙滴眼液有关物质的含量测定方法，具体操作步骤如下：
[0020]1)取待测样品，按前述方法检测；
[0021]2)按如下公式计算有关物质的含量：
[0022][0023]其中，Aspl为供试品溶液中醋酸泼尼松龙峰面积；Astd为六针对照品溶液中醋酸泼尼松龙平均峰面积；Wstd为对照品溶液中醋酸泼尼松龙称样量；Dstd为对照品溶液稀释倍数；L为待测样品中醋酸泼尼松龙的标示量；Dspl为待测样品稀释倍数；P为醋酸泼尼松龙对照品的纯度；RRF为杂质的相对响应因子。
[0024]进一步地，所述杂质的相对响应因子分别为：EP杂质A 1.02，EP杂质B 1.12，EP杂质C 0.87，EP杂质D 1.17，EP杂质E 0.88，其余杂质1。
[0025]本专利技术提供的检测方法采用特定的色谱柱及色谱条件，能够同时准确测定醋酸泼尼松龙滴眼液中EP杂质A、EP杂质B、EP杂质C，EP杂质D和EP杂质E，从而解决醋酸泼尼松龙眼用混悬剂的质量控制问题，有利于对醋酸泼尼松龙眼用混悬剂进行质量管控。
[0026]显然，根据本专利技术的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本专利技术上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
[0027]以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。
附图说明
[0028]图1参考文献对照品及各杂质混合溶液
[0029]图2参考文献中空白溶液
[0030]图3参考文献样品溶液
[0031]图4参考文献酸破坏溶液
[0032]图5参考文献酸空白
[0033]图6参考文献碱破坏溶液
‑1[0034]图7参考文献碱破坏溶液
‑2[0035]图8参考文献碱空白
[0036]图9参考文献氧化破坏溶液
[0037]图10参考文献氧化空白
[0038]图11参考文献高温破坏溶液
‑1[0039]图12参考文献高温破坏溶液
‑2[0040]图13线性考察结果
[0041]图14空白溶液
[0042]图15对照品溶液
[0043]图16对照品及各杂质混合溶液
[0044]图17Placebo溶液
[0045]图18LOQ信噪比溶液
[0046]图19正常样品图谱
[0047]图20酸破坏图谱
[0048]图21碱空白图谱
[0049]图22碱破坏图谱
‑1[0050]图23碱破坏图谱
‑2[0051]图24氧化空白图谱
[0052]图25氧化破坏图谱
[0053]图26高温破坏图谱
具体实施方式
[0054]本专利技术具体实施方式中使用的原料、设备均为已知产品，通过购买市售产品获得。
[0055]实施例1醋酸泼尼松龙滴眼液有关物质检测
[0056]a、供试品溶液制备：精密移取醋酸泼尼松龙滴眼液，加稀释剂稀释10倍v/v，ml/ml，混合均匀；
[0057]b、对照品溶液制备：
[0058]对照品储备溶液的制备：称取醋酸泼尼松龙对照品，加稀释剂溶解稀释至醋酸泼尼松龙浓度2μg/mL，即得；
[0059]其中稀释剂为30％乙腈水溶液；
[0060]c、分别吸取供试品溶液和混对照品溶液注入色谱仪，色谱条件如下：
[0061]流动相：纯化水：乙腈＝70:30(v:v)；
[0062]检测波长：254nm；
[0063]色谱柱：XTERRAMS C18,3.5μm,150x 4.6mm or equivalent；
[0064]流速：0.8ml/min；
[0065]进样量：10μL
[0066]柱温：35℃
[0067]样品温度：5℃；
[0068]运行时间：40min
[0069]d、供试品溶液的色谱图中与醋酸本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种醋酸泼尼松龙滴眼液有关物质的检测方法，其特征在于：它是采用高效液相色谱法检测，具体步骤如下：a、供试品溶液制备：取待测醋酸泼尼松龙滴眼液，加稀释剂溶解，即得；b、对照品溶液制备：取醋酸泼尼松龙对照品，加稀释剂溶解，即得；c、分别取对照品溶液和供试品溶液注入色谱仪，色谱条件如下：色谱柱：以3.5μm的十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：体积比70：30的水
‑
乙腈；流速：0.8ml/min；所述稀释剂为30％，v/v乙腈水溶液。2.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤a)所述醋酸泼尼松龙滴眼液与稀释剂的体积比为0.5～2.5：10。3.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤b)所述对照品溶液中醋酸泼尼松龙的浓度为1～5μg/mL。4.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述色谱柱为XTERRA MS C18，规格150
×
4.6mm，3.5μm。5.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤c)所述色谱条件中进样量10μL，波长为254nm，...

【专利技术属性】
技术研发人员：庄昌萌，徐欣，叶翔，宋德兰，文路乔，郭大海，冯衡生，
申请(专利权)人：诺峰药业成都有限公司，
类型：发明
国别省市：