一种测定二氟泼尼酯眼用乳剂中山梨酸含量的高效液相色谱方法技术

本发明专利技术提供了一种测定二氟泼尼酯眼用乳剂中山梨酸含量的高效液相色谱方法,包括以下步骤：(1)对照品溶液的制备：取山梨酸对照品，加稀释剂溶解配制对照品溶液；(2)样品溶液的制备：取二氟泼尼酯眼用乳剂，加稀释剂溶解配制样品溶液；(3)分别将对照品溶液、样品溶液注入高效液相色谱仪检测。本发明专利技术方法专属性强，精密度高且回收率高，是检测二氟泼尼酯眼用乳剂中山梨酸含量的有效方法，具有良好的应用前景。景。景。

【技术实现步骤摘要】
一种测定二氟泼尼酯眼用乳剂中山梨酸含量的高效液相色谱方法


[0001]本专利技术属于化学分析
，具体涉及一种测定二氟泼尼酯眼用乳剂中山梨酸含量的高效液相色谱方法。

技术介绍

[0002]二氟泼尼酯眼科乳剂是一种用于的无菌、外抗炎皮质类固醇。它的化学名称是6-3,9二氟-11,17,21-三羟基孕烯-1,4-二烯-3,20-二酮21-乙酸17-丁酸酯(CAS编号23674-86-4)。每毫升乳剂含活性成分二氟泼尼酯0.5mg(0.05％)；非活性成分：硼酸、蓖麻油、甘油、聚山梨酯80、注射用水、醋酸钠、依地酸二钠、氢氧化钠，并含有防腐剂山梨酸。
[0003]山梨酸是一种可防止或延迟食物、药物等因化学变化或微生物生长而变质的化学添加剂。二氟泼尼酯眼用乳剂中加入山梨酸是为了防止眼药乳剂中细菌和腐蚀性的物质增长，从而增加眼药水的使用时间。但是同时，山梨酸也会对眼表产生一定的损伤，故对二氟泼尼酯眼用乳剂中山梨酸的含量进行有效准确的监测是非常有必要的。
[0004]然而，目前暂没有检测二氟泼尼酯眼用乳剂中山梨酸的含量的相关方法报道。现有文献报道了检测其他产品中山梨酸含量的方法，但是由于不同产品中的成分不同，无法应用于二氟泼尼酯眼用乳剂中山梨酸含量的检测。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种测定二氟泼尼酯眼用乳剂中山梨酸含量的高效液相色谱方法。包括以下步骤：
[0006](1)对照品溶液的制备：取山梨酸对照品，加溶剂溶解配制对照品溶液；
[0007](2)样品溶液的制备：取待检二氟泼尼酯眼用乳剂，加溶剂溶解配制样品溶液；
[0008](3)分别将对照品溶液、样品溶液注入高效液相色谱仪检测，色谱条件如下：
[0009]色谱柱：C18色谱柱；
[0010]流动相：流动相A为乙酸铵溶液，流动相B为甲醇，流动相A与流动相B体积比(75～85)：(15～25)等度洗脱，优选为80:20等度洗脱；
[0011](4)根据检测结果计算得到二氟泼尼酯眼用乳剂中山梨酸的含量。
[0012]进一步地，上述步骤(1)和步骤(2)中所述溶剂为甲醇。
[0013]进一步地，上述步骤(3)中乙酸铵溶液的浓度为0.01～0.03mol/L，优选为0.02mol/L。
[0014]进一步地，上述步骤(3)中所述色谱柱规格为内径4.6mm，长度250mm，填料粒径5μm；优选的色谱柱型号为ACE 5 C18色谱柱。
[0015]进一步地，上述步骤(3)中所述等度洗脱的时间为10～15分钟，优选为12分钟。
[0016]进一步地，上述色谱条件还包括：检测波长为254nm。
[0017]进一步地，上述色谱条件还包括：柱温为25～35℃，样品盘温度为5℃，流速为0.5
～1.5mL/min。优选地，所述柱温为30℃，流速为1.0mL/min。
[0018]进一步地，上述对照品溶液、样品溶液的进样量为5～15μL，优选为10μL。
[0019]测试结果表明，专利技术方法专属性强，精密度高且回收率高，是检测二氟泼尼酯眼用乳剂中山梨酸含量的有效方法，具有良好的应用前景。
[0020]显然，根据本专利技术的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本专利技术上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
[0021]以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。
附图说明
[0022]图1为对照品溶液的高效液相色谱图。
[0023]图2为样品溶液的高效液相色谱图。
[0024]图3为高效液相色谱测试山梨酸含量结果的拟合曲线。
[0025]图4为酸降解后的样品的高效液相色谱图。
[0026]图5为碱降解后的样品的高效液相色谱图。
[0027]图6为氧化降解后的样品的高效液相色谱图。
[0028]图7为高温降解后的样品的高效液相色谱图。
[0029]图8为光降解后的样品的高效液相色谱图。
具体实施方式
[0030]本专利技术所用原料均为已知产品，通过购买市售产品所得。
[0031]实施例1、本专利技术测定二氟泼尼酯眼用乳剂中山梨酸含量的方法
[0032](1)对照品溶液的制备：称取25mg山梨酸对照品，精密称量，至25mL容量瓶中，用甲醇使其充分溶解，并定容到刻度，摇匀，得到对照品储备溶液，浓度为1000μg/mL，然后精密称量对照品储备溶液1.0mL至25mL容量瓶中，加甲醇稀释到刻度，混匀；再取上述溶液2.0mL至25mL容量瓶中，加甲醇稀释到刻度，混匀，得到对照品溶液，浓度为3.2μg/mL。
[0033](2)样品溶液的制备：准确移取二氟泼尼酯眼用乳剂1.0mL至25mL容量瓶中，加甲醇稀释到刻度，混匀；再取上述溶液2.0mL于25mL容量瓶中，加甲醇稀释到刻度，混匀，得到样品溶液，浓度为3.2μg/mL。
[0034](3)对照品溶液和样品溶液分别以10μL的进样量进样到高效液相色谱仪中检测，检测条件为：色谱柱：ACE 5 C18色谱柱(4.6mm*250mm，5μm)；
[0035]流动相：流动相A为0.02mol/L的乙酸铵溶液，流动相B为甲醇，流动相A与流动相B体积比80:20等度洗脱；
[0036]检测波长254nm，流速为1.0mL/min，柱温为30℃，样品盘温度5℃。
[0037](4)通过结果计算山梨酸的含量，山梨酸含量的计算公式如下：
[0038][0039]其中，Aspl为测得的样品溶液峰面积；
[0040]Astd为对照品溶液重复测量5次的峰面积的平均值；
[0041]Wstd为标准溶液中山梨酸的质量(mg)；
[0042]Dstd为标准溶液的稀释倍数；
[0043]Dspl为样品溶液的稀释倍数；
[0044]L为样品溶液中山梨酸的标示量，以mg计；
[0045]P为山梨酸的标准品的纯度(mg/mg)。
[0046]对照品溶液的色谱图如图1所示，样品溶液的色谱图如图2所示，稀释剂和活性成分在山梨酸峰位置处无干扰。
[0047]实验例1、本专利技术检测方法的线性考察
[0048]1、线性溶液的配制
[0049](1)线性储备溶液的配制：准确称量25.0mg山梨酸对照品至25mL容量瓶中，用稀释剂充分溶解并定容；再移取上述溶液1.0mL至25mL容量瓶中，用稀释剂定容并混匀，浓度40μg/mL。
[0050](2)线性溶液的配制：如表1所示。
[0051]表1线性溶液的配制
[0052][0053][0054]2、实验方法：
[0055]对线性溶液进行高效液相色谱检测，色谱条件同实施例1，然后对测得的结果本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种测定二氟泼尼酯眼用乳剂中山梨酸含量的高效液相色谱方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)对照品溶液的制备：取山梨酸对照品，加溶剂溶解配制对照品溶液；(2)样品溶液的制备：取待检二氟泼尼酯眼用乳剂，加溶剂溶解配制样品溶液；(3)分别将对照品溶液、样品溶液注入高效液相色谱仪检测，色谱条件如下：色谱柱：C18色谱柱；流动相：流动相A为乙酸铵溶液，流动相B为甲醇，流动相A与流动相B体积比(75～85)：(15～25)等度洗脱；(4)根据检测结果计算得到二氟泼尼酯眼用乳剂中山梨酸的含量。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(1)和步骤(2)中所述溶剂为甲醇。3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中乙酸铵溶液的浓度为0.01～0.03mol/L，优选为0.02mol/L。4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中等度洗脱...

【专利技术属性】
技术研发人员：庄昌萌，叶翔，徐欣，宋德兰，文路乔，
申请(专利权)人：诺峰药业成都有限公司，
类型：发明
国别省市：