一种酪蛋白-姜黄素载药纳米粒的制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种酪蛋白

【技术实现步骤摘要】
一种酪蛋白
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姜黄素载药纳米粒的制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及载药纳米微粒
，具体涉及一种酪蛋白
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姜黄素载药纳米粒的制备方法和应用。

技术介绍

[0002]酪蛋白是一种在等电点可自组装为纳米粒的特殊蛋白质，其特殊的结构，可以被看做是由疏水氨基酸及亲水氨基酸共同组成的两亲性嵌段型共聚物。基于此特性酪蛋白可以在溶液中较易自组装形成胶束，形成性能优异、形态均一的纳米粒。同时，酪蛋白易被生物酶水解，并参与生物体的新陈代谢，有利于负载药物的释放。
[0003]姜黄素(Curcumin)是一种提取自姜科植物姜黄的根茎的一类多酚类化合物，颜色为橙黄色并且呈现出结晶状。据研究表明，姜黄素的药理性广泛、毒性小、不良作用小且抗癌抗肿瘤、抗炎、抗氧化效果较为明显。但是姜黄素也有一定的局限性，如在水中溶解性低、稳定性差以及口服利用率较差，致使姜黄素在药物研究的发展中受限较大。
[0004]纳米载药微粒通过化学键合或者物理吸附的方式结合药物，使之分散于纳米微粒的内部或者表面。可食用蛋白作为药物载体构成的给药系统成为如今的药物开发的新思路与新方向，是推动药物研究的强大催化剂。这种载药载体以自组装(即修饰高分子活性较高的基团后通过非共价键相互作用自发组成纳米粒)的方式形成，粒径的范围在10
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1000nm之间，这种由可食用蛋白构成的纳米载体在药物制剂的发展中一直以药用辅料的身份占据重要地位。目前，作为纳米载体使用居多的可食用蛋白质当属酪蛋白。但是目前采用酪蛋白制备纳米微粒多采用多种原料载体，易增强纳米粒毒性，并且反应条件较高，不利于发挥酪蛋白本身的结构特性。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是为解决上述技术问题及不足，提供一种酪蛋白
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姜黄素载药纳米粒的制备方法和应用。
[0006]本专利技术为解决上述技术问题的不足，所采用的技术方案是：一种酪蛋白
‑
姜黄素载药纳米粒的制备方法，包括以下步骤：
[0007]S1、将酪蛋白粉末置于蒸馏水中溶解完全，得到酪蛋白样品溶液，备用；
[0008]S2、将S1中得到的酪蛋白样品溶液用NaOH溶液调节pH，备用；
[0009]S3、向S2得到的溶液中加入姜黄素，然后采用磁力搅拌器搅拌，形成包裹姜黄素的酪蛋白溶液，备用；
[0010]S4、使用超声波细胞破碎仪对S3中得到包载姜黄素的酪蛋白溶液进行超声破碎，超声破碎处理过程中采用降温处理，超声破碎完成即得到酪蛋白
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姜黄素载药纳米粒。
[0011]作为本专利技术一种酪蛋白
‑
姜黄素载药纳米粒的制备方法的进一步优化，S1中将20
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40mg所述酪蛋白粉末溶解于10ml的蒸馏水中。
[0012]作为本专利技术一种酪蛋白
‑
姜黄素载药纳米粒的制备方法的进一步优化，S2中所述
NaOH溶液的浓度为1M，并将酪蛋白样品溶液的pH调节至5～5.5。
[0013]作为本专利技术一种酪蛋白
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姜黄素载药纳米粒的制备方法的进一步优化，S3中加入所述姜黄素的重量为800μg
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1.2mg。
[0014]作为本专利技术一种酪蛋白
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姜黄素载药纳米粒的制备方法的进一步优化，S3中磁力搅拌时间为24h。
[0015]作为本专利技术一种酪蛋白
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姜黄素载药纳米粒的制备方法的进一步优化，S4中超声波细胞破碎仪的工作功率为200
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400W，工作时间为10
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30min，并且工作频率为每工作4s停2s。
[0016]作为本专利技术一种酪蛋白
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姜黄素载药纳米粒的制备方法的进一步优化，S4中所述的降温处理为利用碎冰进行降温。
[0017]一种酪蛋白
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姜黄素载药纳米粒，采用上述方法制备得到。
[0018]上述酪蛋白
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姜黄素载药纳米粒的包载率为90％
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95％。
[0019]上述酪蛋白
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姜黄素载药纳米粒在提高姜黄素杀瘤作用效果中的应用。
[0020]本专利技术具有以下有益效果：
[0021]一、本专利技术利用酪蛋白在等电点可以自组装的特性，调节PH使其自组装形成纳米粒，最大程度上保证了酪蛋白的特性；本专利技术仅使用酪蛋白制备纳米粒，不添加其他原料，具有安全、营养、低成本的优势，并且单一的原料充分避免了由于多种原料产生副反应增强纳米粒毒性的现象。本专利技术制备方法简单，技术工艺合理、易于操作，对设备无特殊要求，简单的制备过程充分保证了酪蛋白本身的结构特征，更加有利于其发挥出酪蛋白的特性；且本专利技术制备条件温和，最大程度上保证了酪蛋白的良好特性。
[0022]二、本专利技术采用超声处理能够增加分子间的表面活性、降低表观粘度，改变蛋白质二级结构，可增加酪蛋白蛋白的表面疏水性，使酪蛋白的结构伸展、分子间相互作用有所降低，改善溶解性。
[0023]三、本专利技术制备得到的酪蛋白载药纳米粒容易被微绒毛捕获并粘附到粘膜上，可以延长载体的滞留时间而促进吸收，可以在保证姜黄素分散良好、稳定性佳的前提下实现姜黄素的递送，从而提高姜黄素的利用率，减少给药量的损失，生物利用度为60％
‑
65％，从而突破姜黄素的局限性，为癌症治疗提供一种新的思路和方法。
附图说明
[0024]图1为本专利技术实施例1的酪蛋白
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姜黄素载药纳米粒(CC
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NPs)的透射电子显微图；
[0025]图2为本专利技术实施例1制备的酪蛋白
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姜黄素纳米粒在4℃贮藏下载药纳米粒30天的粒径分布图；
[0026]图3为本专利技术酪蛋白
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姜黄素纳米粒的细胞摄取实验图像；
[0027]图4为不同时间不同浓度的姜黄素对Hela细胞的抑制作用图；
[0028]图5为不同时间不同浓度的CC
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NPs对Hela细胞的抑制作用图；
[0029]图6为游离姜黄素和酪蛋白
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姜黄素纳米粒生物利用度的对比图；
[0030]图7为酪蛋白自组装纳米粒效果验证实验中CS
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NPs的制备流程；
[0031]图8为CS
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NPs透射电子显微镜图；
[0032]图9为不同浓度的酪蛋白样品制成载药纳米粒平均粒径和分散系数(PDI)的对比
结果图；
[0033]图10为不同浓度酪蛋白溶液经不同时间的超声处理后测得的表面疏水性指数变化图；
[0034]图11为不同浓度CS
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NPs对Hela细胞的毒性检测结果图。
具体实施方式
[0035]下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种酪蛋白
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姜黄素载药纳米粒的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：S1、将酪蛋白粉末置于蒸馏水中溶解完全，得到酪蛋白样品溶液，备用；S2、将S1中得到的酪蛋白样品溶液用NaOH溶液调节pH，备用；S3、向S2得到的溶液中加入姜黄素，然后采用磁力搅拌器搅拌，形成包裹姜黄素的酪蛋白溶液，备用；S4、使用超声波细胞破碎仪对S3中得到包载姜黄素的酪蛋白溶液进行超声破碎，超声破碎处理过程中采用降温处理，超声破碎完成即得到酪蛋白
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姜黄素载药纳米粒。2.如权利要求1所述一种酪蛋白
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姜黄素载药纳米粒的制备方法，其特征在于：S1中将20
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40mg所述酪蛋白粉末溶解于10ml的蒸馏水中。3.如权利要求1所述一种酪蛋白
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姜黄素载药纳米粒的制备方法，其特征在于：S2中所述NaOH溶液的浓度为1M，并将酪蛋白样品溶液的pH调节至5～5.5。4.如权利要求1所述一种酪蛋白
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姜黄素载药纳米粒的制备方法，其特征在于：S3中加入所述姜黄素的重量为800μg
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【专利技术属性】
技术研发人员：张沛，孙莎莎，韩琳，
申请(专利权)人：洛阳师范学院，
类型：发明
国别省市：