用于诊断和分期结直肠癌的生物标记物制造技术

本发明专利技术涉及肿瘤学领域。具体而言，本发明专利技术涉及结直肠癌的生物标记物及其用于诊断或分期结直肠癌的用途。本发明专利技术的生物标志物可灵敏、准确地诊断结直肠癌并且区分未转移和转移性结直肠癌。性结直肠癌。性结直肠癌。

【技术实现步骤摘要】
用于诊断和分期结直肠癌的生物标记物


[0001]本专利技术涉及肿瘤学领域。具体而言，本专利技术涉及结直肠癌的生物标记物及其用于诊断或分期结直肠癌的用途。

技术介绍

[0002]结直肠癌(colorectal cancer,CRC)的发病率在全球位居全部恶性肿瘤的第三位，年新发病例数超过135万人。在我国，结直肠癌的发病率自2000年开始至2011年持续上升，2015年新增病例37.6万人，死亡19.1万人。目前结直肠癌筛查的主要方法包括粪便潜血测试、肠镜检查、CT成像等，但有些方法在经济和医疗条件较差的地区无法应用。肠镜是一种高敏感性的方法，但依赖于检查者的水平、花费较高，患者也承受一定的风险。结直肠癌通常会转移到多个器官，就诊时，超过25％的患者会出现肝转移(同时转移)，其余25-30％的患者在接下来的2-3年内也会出现肝转移(异时转移)。结直肠癌患者生存期主要由肝部转移灶进程决定，而非原发灶。在不经过治疗的情况下，结直肠癌肝转移患者生存期少于1年。肝部肿瘤会增加右上腹或整个腹部的疼痛，此外，还会使体重下降和代谢紊乱加重。随着疾病的进程，会出现肝腹水、黄疸、门脉高压等症状，预示着不良预后。目前对结直肠癌肝转移的诊断方法主要依赖于肝脏超声和CT检查。但这两种方法对于长期监测结直肠癌肝转移花费较高，且需要频繁进出医院。
[0003]综上所述，目前临床上缺乏有效监测结直肠癌以及结肠癌肝转移的生物标志物。

技术实现思路

[0004]本申请的专利技术人经过大量实验和反复摸索，出人意料地发现了用于诊断和分期结直肠癌的生物标记物，该生物标记物可灵敏、准确地诊断结直肠癌并且区分未转移和转移性结直肠癌，由此完成了本专利技术。
[0005]用于诊断结直肠癌的生物标记物
[0006]本专利技术第一方面提供了用于确定受试者是否患有或有风险患有结直肠癌(CRC)的方法，其包括：
[0007](1)检测来自受试者的液体样品中生物标记物的水平，所述生物标记物选自CORO1C、APRC5、RAD23B、BHMT、DCP1B、TPM3、CALD1、ATP5F1A中的一种或多种(例如1种，2种，3种，4种，5种，6种，7种或全部8种)；
[0008](2)将所述水平与参考值比较。
[0009]在某些实施方案中，所述生物标记物包含选自CORO1C、APRC5、RAD23B中的一种或多种(例如1种，2种或全部3种)。
[0010]在某些实施方案中，所述生物标记物包含CORO1C、APRC5和RAD23B。
[0011]在某些实施方案中，所述生物标记物还可以包含选自BHMT、DCP1B、TPM3、CALD1、ATP5F1A中的一种或多种(例如1种，2种，3种，4种，或全部5种)。
[0012]应理解步骤(1)和(2)中所述的“水平”包括所述生物标记物的绝对量、相对量或浓
度以及与其相关或可以从其衍生的任何值或参数。
[0013]应理解步骤(2)中所述的“比较”通常指对应参数或值的比较，例如将绝对量与绝对参考量比较，而将浓度与参考浓度比较，或者将获自样品中生物标志物的强度信号与获自参考样品的相同类型的强度信号比较。比较可以手动或计算机辅助进行。获自个体或患者的样品中生物标志物的测量的或检测的水平和参考水平的值可以例如彼此比较，并且所述比较可以通过执行用于比较的算法的计算机程序自动进行。
[0014]应理解步骤(2)中所述的“参考值”指允许区分处于患有结直肠癌风险中或不处于这样的风险中的对象的值，例如允许区分健康对照和结直肠癌患者的值。参考值可以是预先测定的，并设定以满足在例如特异性和/或灵敏性方面的常规要求。
[0015]基于本专利技术中给出的教导，获得这样的参考值在本领域普通技术人员的能力范围内。例如，可以对代表性群体测定本专利技术所述的生物标记物的水平，并通过合适的统计学方法(例如中值、平均值、分位数、PLS-DA、逻辑回归方法、随机森林分类或者其他给出阈值的方法)计算参考值。阈值应当考虑诊断和预后测试的灵敏性和特异性的希望的临床设定。在一个实施方案中，参考值可以在患有结直肠癌的患者的一种或多种参考样品中测定。在另一个实施方案中，参考值可以在来自不处于结直肠癌风险中的受试者(例如健康对照)的一种或多种参考样品中测定。
[0016]在某些实施方案中，所述参考值代表未患结直肠癌的健康人群的体液样品中该生物标记物的水平。在某些实施方案中，如果步骤(1)中测定的水平高于参考值的话，则判断所述受试者患有结直肠癌或处于患有结直肠癌的风险中。
[0017]在一些实施方案中，通过免疫学检测来测定所述生物标记物的水平。在某些实施方案中，所述免疫学检测选自ELISA、Elispot、蛋白斑点印迹(Dot blot)或蛋白质印迹(Western blot)。
[0018]在某些实施方案中，所述免疫学检测包括使用能够特异性结合所述生物标记物的一级抗体。
[0019]在某些实施方案中，所述一级抗体带有可检测的标记。
[0020]在某些实施方案中，所述免疫学检测还包含使用对所述一级抗体特异性的二级抗体，所述二级抗体带有可检测的标记。
[0021]在本文中，所述二级抗体对一级抗体所来自的物种(例如小鼠、大鼠、羊、兔等)的抗体是特异的。在某些实施方案中，所述二级抗体选自抗免疫球蛋白抗体，例如抗IgG抗体、抗IgM抗体或抗IgA抗体。
[0022]在某些实施方案中，所述可检测的标记选自酶(例如辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶)、化学发光试剂(例如吖啶酯类化合物)、荧光染料或生物素。
[0023]在另一些实施方案中，通过质谱法来测定所述生物标记物的水平。
[0024]在某些实施方案中，所述结直肠癌包括未转移的结直肠癌(非转移性结直肠癌)或者转移性结直肠癌。在某些实施方案中，所述转移性结直肠癌包括淋巴结转移。在某些实施方案中，所述转移性结直肠癌包括远处转移，例如肝转移。
[0025]在某些实施方案中，所述体液样品选自血液、血清、血浆、尿液和唾液。在某些实施方案中，所述体液样品是尿液。
[0026]在某些实施方案中，所述受试者是人。
[0027]本专利技术另一方面涉及能够检测生物标记物的试剂在制备用于确定受试者是否患有或有风险患有结直肠癌(CRC)的试剂盒中的用途，所述生物标记物如第一方面的任一实施方案中定义。
[0028]在某些实施方案中，所述试剂通过免疫学检测来测定所述生物标记物的水平。在某些实施方案中，所述免疫学检测选自ELISA、Elispot、蛋白斑点印迹(Dot blot)或蛋白质印迹(Western blot)。
[0029]在某些实施方案中，所述试剂包含能够特异性结合所述生物标记物的一级抗体。
[0030]在某些实施方案中，所述一级抗体带有可检测的标记。
[0031]在某些实施方案中，所述试剂还包含对所述一级抗体特异性的二级抗体，所述二级抗体带有可检测的标记。
[0032]在某些实施方案中，所述本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.能够检测生物标记物的试剂在制备用于确定受试者是否患有或有风险患有结直肠癌(CRC)的试剂盒中的用途，所述生物标记物选自CORO1C、APRC5、RAD23B、BHMT、DCP1B、TPM3、CALD1、ATP5F1A中的一种或多种(例如1种，2种，3种，4种，5种，6种，7种或全部8种)。2.权利要求1所述的用途，其中，所述生物标记物包含选自CORO1C、APRC5、RAD23B中的一种或多种(例如1种，2种或全部3种)；优选地，所述生物标记物包含CORO1C、APRC5和RAD23B；任选地，所述生物标记物还包含选自BHMT、DCP1B、TPM3、CALD1、ATP5F1A中的一种或多种(例如1种，2种，3种，4种，或全部5种)。3.能够检测生物标记物的试剂在制备用于在受试者中区分结直肠癌状态的试剂盒中的用途，所述生物标记物选自CORO1C、RAD23B、GSPT2、NDN、KRT7、PROZ、PRDX1、PAM、APRC5中的一种或多种(例如1种，2种，3种，4种，5种，6种，7种，8种或全部9种)。4.权利要求3所述的用途，其中，所述生物标记物包含选自CORO1C、RAD23B、GSPT2、NDN中的一种或多种(例如1种，2种，3种或全部4种)；优选地，所述生物标记物包含CORO1C、RAD23B、GSPT2和NDN；任选地，所述生物标记物还包含选自KRT7、PROZ、PRDX1、PAM、APRC5中的一种或多种(例如1种，2种，3种，4种，或全部5种)；优选地，所述区分结直肠癌状态包括区分非转移性结直肠癌和转移性结直肠癌；优选地，所述转移性结直肠癌包括淋巴结转移和/或远处转移(例如肝转移)。5.权利要求3所述的用途，其中，所述生物标记物包含选自CORO1C、RAD23B、GSPT2、NDN、APRC5中的一种或多种(例如1种，2种，3种，4种，或全部5种)；优选地，所述区分结直肠癌状态包括分期结直肠癌，例如TNM分期或M分期。6.权利要求1-5任一项所述的用途，其中，所述试剂通过免疫学检测来测定所述生物标记物的水平；优选地，所述免疫学检测选自ELISA、Elispot、蛋白斑点印迹(Dot blot)或蛋白质印迹(Western blot)。7.权利要求6所述的用途，其中，所述试剂包含能够特异性结合所述生物标记物的一级抗体；优选地，所述一级抗体带有可检测的标记；优选地，所述试剂还包含对所述一级抗体特异性的二级抗体，所述二级抗体带有可检测的标记；优选地，所述可检测的标记选自酶(例如辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶)、化学发光试剂(例如吖啶酯类化合物)、荧光染料或生物素。8.权利要求1-5任一项所述的用途，其中，所述试剂通过质谱法来测定所述生物标记物的水平。9.权利要求1或2所述的用途，其中，所述试剂盒通过包括下述步骤的方法来确定受试者是否患有或有风险患有结直肠癌(CRC)：(1)测定来自所述受试者的体液样品中所述生物标记物的水平；和，(2)将所述水平与参考值相比较；优选地，所述体液样品选自血液、血清、血浆、尿液和唾液；优选地，所述体液样品是尿液；
优选地，所述受试者是人；优选地，所述参考值代表健康人群的体液样品中该生物标志物的水平；优选地，如果所述水平高于参考值的话，则判断所述受试者患有结直肠癌或处于患有结直肠癌的风险中。10.权利要求3-5任一项所述的用途，其中，所述试剂盒通过包括下述步骤的...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵晓航，孙伟，孙玉琳，郭正光，孙海丹，景宗攀，李军，杨丽君，蔡梦，
申请(专利权)人：中国医学科学院基础医学研究所，
类型：发明
国别省市：