一种用于食管鳞癌诊断的生物标志物及检测试剂盒制造技术

本发明专利技术属于医药生物技术领域，具体公开了一种用于食管鳞癌辅助诊断的生物标志物及检测试剂盒。本发明专利技术提供的用于食管鳞癌辅助诊断的生物标志物为抗肿瘤相关抗原ZPR1、HSF1、MAGEA4、HDAC1的自身抗体中的至少一种，该标志物在食管鳞癌患者血清中的表达水平高于正常人，差异具有统计学意义。本发明专利技术还提供一种用于食管鳞癌辅助诊断的试剂盒，该试剂盒含有用于检测上述标志物的试剂，所述试剂为通过酶联免疫吸附、蛋白芯片、免疫印迹或微流控免疫检测样本中所述生物标志物的试剂。本发明专利技术通过检测人血清中上述生物标志物的表达水平，可以有效区分食管鳞癌患者和正常人，可用于食管鳞癌诊断。诊断。

【技术实现步骤摘要】
一种用于食管鳞癌诊断的生物标志物及检测试剂盒


[0001]本专利技术属于医药生物
，具体公开了一种用于食管鳞癌诊断的生物标志物及检测试剂盒。

技术介绍

[0002]食管癌是全球肿瘤致死的第六大病因，而中国食管癌的发病率和病死率均居世界之首。全球癌症流行病学统计数据显示，2020年全球新增60.4万食管癌病例，有54.4万人因食管癌而死亡，食管癌死亡率居于恶性肿瘤第6位。食管癌的病理类型主要有鳞癌和腺癌，其中90％的病例是食管鳞状细胞癌(又称食管鳞癌，esophageal squamous cell carcinoma，ESCC)。由于早期症状不具有特异性容易被忽视，因而大部分ESCC患者确诊时已经是中晚期。另外，由于目前对ESCC的治疗手段非常有限，因此，患者的预后较差，其总的5年生存率不足20％。但是，与中晚期ESCC不同的是，现有的治疗方法对早期ESCC患者治疗的5年生存率可达60％以上。目前ESCC的检查手段主要有X线钡餐检查、CT/PET
‑
CT扫描、电子内窥镜检查及病理组织活检，但由于早诊效果有限、费用较高或侵袭性操作限制了广泛用于筛查的可能性。因此，探索ESCC早期诊断的分子标记物，具有重要的潜在临床价值。目前尚没有理想的可供临床使用的非侵袭性的ESCC诊断标志物。
[0003]越来越多的研究证实肿瘤患者血清中也存在各种类型的抗细胞自身抗原的抗体，这些与肿瘤发生有关的抗原被称为肿瘤相关抗原(tumor
‑
associated antigen,TAA)，肿瘤患者血清中存在的肿瘤相关抗原自身抗体有可能作为肿瘤发生过程中识别异常或失调细胞机制的早期信使员。同时机体通过免疫系统的级联放大效应针对这些异常表达的蛋白产生相应的抗体，这类抗体被称为肿瘤相关抗原自身抗体(autoantibody against tumor
‑
associated antigen,TAAb)。这些自身抗体可出现于肿瘤患者的临床症状之前，可在患者的血液中存在较长时间，同时易于被检测以及检测过程对患者创伤性小，因此具有肿瘤早期免疫学诊断的潜力。
[0004]目前关于能够用于食管鳞癌诊断的自身抗体的研究相对较少，为了提高食管鳞癌早期诊断的效率，提高食管鳞癌患者的生存率，亟需筛选更多的能够用于食管鳞癌诊断的血清学自身抗体标志物。

技术实现思路

[0005]针对现有技术中存在的问题和不足，本专利技术的目的之一是提供一种用于食管鳞癌诊断的生物标志物，本专利技术的目的之二旨在提供一种用于检测上述生物标志物的试剂在制备用于食管鳞癌诊断的产品中的应用，本专利技术的目的之三在于提供一种用于食管鳞癌诊断的试剂盒。
[0006]基于上述目的，本专利技术采用的技术方案如下：
[0007]本专利技术第一方面提供了一种用于食管鳞癌诊断的生物标志物，所述生物标志物为抗肿瘤相关抗原ZPR1自身抗体、抗肿瘤相关抗原HSF1自身抗体、抗肿瘤相关抗原MAGEA4自
身抗体、抗肿瘤相关抗原HDAC1自身抗体中的至少一种。抗肿瘤相关抗原ZPR1自身抗体、抗肿瘤相关抗原HSF1自身抗体、抗肿瘤相关抗原MAGEA4自身抗体、抗肿瘤相关抗原HDAC1自身抗体在食管鳞癌患者血清中的表达水平均高于正常人，且差异具有统计学意义。
[0008]根据上述的生物标志物，优选地，抗肿瘤相关抗原ZPR1自身抗体、抗肿瘤相关抗原HSF1自身抗体、抗肿瘤相关抗原MAGEA4自身抗体、抗肿瘤相关抗原HDAC1自身抗体均为受试者血清、血浆、组织间隙液或尿液中抗肿瘤相关抗原自身抗体。
[0009]根据上述的生物标志物，优选地，抗肿瘤相关抗原ZPR1自身抗体、抗肿瘤相关抗原HSF1自身抗体、抗肿瘤相关抗原MAGEA4自身抗体、抗肿瘤相关抗原HDAC1自身抗体为受试者接受肿瘤治疗之前血清、血浆、组织间隙液或尿液中的抗肿瘤相关抗原自身抗体。更加优选地，所述肿瘤治疗为化疗、放疗或肿瘤手术切除。
[0010]根据上述的生物标志物，优选地，所述受试者为哺乳动物，更加优选地，所述受试者为灵长类哺乳动物；最优选地，所述受试者为人。
[0011]本专利技术第二方面提供了用于检测上述第一方面所述生物标志物的试剂在制备用于食管鳞癌诊断的产品中的应用。
[0012]根据上述的应用，优选地，所述试剂为通过酶联免疫吸附、蛋白芯片、免疫印迹或微流控免疫检测样本中所述生物标志物的试剂。
[0013]根据上述的应用，优选地，所述样本为血清、血浆、组织间隙液或尿液。
[0014]根据上述的应用，优选地，所述试剂为检测所述生物标志物的抗原。更加优选地，所述试剂为ZPR1蛋白、HSF1蛋白、MAGEA4蛋白、HDAC1蛋白中的至少一种。
[0015]根据上述的应用，优选地，所述产品为蛋白芯片、试剂盒或制剂。
[0016]本专利技术第三方面提供了一种用于食管鳞癌诊断的试剂盒，所述试剂盒包含用于检测上述第一方面所述生物标志物的试剂。
[0017]根据上述的试剂盒，优选地，所述试剂盒通过酶联免疫吸附、蛋白芯片、免疫印迹或微流控免疫检测样本中的所述生物标志物。更加优选地，所述试剂盒通过抗原抗体反应对样本中的所述生物标志物进行检测。
[0018]根据上述的试剂盒，优选地，所述试剂盒为ELISA检测试剂盒。更加优选地，所述ELISA检测试剂盒包括固相载体和包被在固相载体上的抗原；所述抗原为ZPR1蛋白、HSF1蛋白、MAGEA4蛋白、HDAC1蛋白中的至少一种。
[0019]根据上述的试剂盒，优选地，所述样本为血清、血浆、组织间隙液或尿液。
[0020]根据上述的试剂盒，优选地，所述ELISA检测试剂盒还包括样品稀释液、第二抗体、抗体稀释液、洗涤液、显色液和终止液。
[0021]本专利技术中肿瘤相关抗原ZPR1、HSF1、MAGEA4、HDAC1的基本信息为：
[0022]ZPR1是一种锌指蛋白，作为一种信号分子，将增殖生长信号从细胞质传递到细胞核。在亚核小体(包括gems和Cajal小体)中对存活运动神经元蛋白SMN1的定位和积累起作用。HSF1是热休克因子蛋白1，是一种转录因子，在温度胁迫后迅速诱导并结合热休克启动子元件，该基因的表达被磷酸化抑制，磷酸化促进热休克蛋白90的结合。MAGEA4是MAGEA基因家族的一员，MAGEA基因的启动子和第一外显子表现出相当大的变异性，表明该基因家族的存在使相同的功能能够在不同的转录控制下表达。HDAC1属于组蛋白去乙酰化酶家族，是组蛋白去乙酰化酶复合物的组成部分，是控制细胞增殖和分化的关键元素，它与转移相关
蛋白
‑
2一起，使p53脱乙酰并调节其对细胞生长和凋亡的影响。在NCBI中ZPR1蛋白的蛋白序列号为：NP_003895.1；HSF1蛋白的蛋白序列号为：NP_005517.1；MAGEA4蛋白的蛋白序列号为：NP_001011548.1；HDAC1蛋白的蛋白序列号为：NP_004955.2。
[0023]与现有技术相本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于食管鳞癌诊断的生物标志物，其特征在于，所述生物标志物为抗肿瘤相关抗原ZPR1、HSF1、MAGEA4、HDAC1的自身抗体中的至少一种。2.根据权利要求1所述的生物标志物，其特征在于，所述抗肿瘤相关抗原ZPR1、HSF1、MAGEA4、HDAC1的自身抗体为受试者血清、血浆、组织间隙液或尿液中抗肿瘤相关抗原ZPR1、HSF1、MAGEA4、HDAC1的自身抗体。3.用于检测权利要求1或2所述生物标志物的试剂在制备用于食管鳞癌诊断的产品中的应用。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述试剂为通过酶联免疫吸附、蛋白芯片、免疫印迹或微流控免疫检测样本中所述生物标志物的试剂。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述样本为血清、...

【专利技术属性】
技术研发人员：王鹏，孙桂英，叶华，陈慧丽，史健翔，代丽萍，王科妍，
申请(专利权)人：郑州大学，
类型：发明
国别省市：