一种利用红豆杉枝叶乙酸乙酯萃余相制备紫杉黄酮的方法技术

本发明专利技术公开了一种利用红豆杉枝叶乙酸乙酯萃余相制备紫杉黄酮的方法，涉及天然有机化合物的分离纯化领域；本发明专利技术以红豆杉醇提后，经水溶解并由乙酸乙酯萃取紫杉烷类化合物后所余下的水相为原材料，经过多次有机溶剂萃取、多次吸附树脂柱层析并减压蒸馏抽干，得到含量为50％

【技术实现步骤摘要】
一种利用红豆杉枝叶乙酸乙酯萃余相制备紫杉黄酮的方法


[0001]本专利技术涉及天然有机化合物的分离纯化领域，具体是一种利用红豆杉枝叶乙酸乙酯萃余相制备紫杉黄酮的方法。

技术介绍

[0002]黄酮类化合物是以C6
‑
C3
‑
C6为基本骨架的天然化合物，是药用植物中的主要活性成分之一，以糖苷或游离态(苷元)的形式广泛存在于植物中，具有独特的生物活性。有抑菌性、对多种肿瘤细胞均有一定的细胞毒性，抑制肿瘤细胞的生长，降低血脂等多种功效。人类只可通过食物摄取黄酮类化合物，不同食物中所含黄酮类化合物种类也不相同，因此黄酮类化合物提取方法的研究就显得尤为重要。
[0003]生物类黄酮物质具有优良的药理活性，具有提高机体免疫能力、抗炎、护肝、杀菌、抗病毒、抗风湿等作用，红豆杉中黄酮的含量会受品种、季节和树龄等影响，建立一种红豆杉中黄酮含量的检测方法，并对红豆杉中黄酮含量进行分析，能使红豆杉的开发和利用达到最大限度，从而获得更大的经济利益。
[0004]红豆杉枝叶中含有紫杉醇、紫杉黄酮和红豆杉多糖等药效成分，授权号为 ZL200910157034.0的中国专利技术专利公开了一种南方红豆杉叶片的提取物及提取方法，该方法以红豆杉叶片为原料，经烘干、粉碎过筛、乙醇超声浸提、浓缩脱醇脱脂等步骤制得紫杉黄酮的混合物，该混合物中紫杉黄酮的含量为65
‑
70％，且该紫杉黄酮混合物的主要成分包括芦丁
‑3‑0‑
槲皮素、芦丁
‑3‑0‑
山奈酚、芦丁
‑3‑0‑
杨梅酮、山奈酚
‑7‑0‑
葡萄糖和葡萄糖
‑7‑0‑
槲皮素等。此提取方法提取工艺较为复杂，成本较高，不适合市场推广和商业生产。而公开号为CN201210589638.4的中国专利技术专利公开了一种从南方红豆杉提取紫杉黄酮的方法中，直接采用红豆杉枝叶提取紫杉黄酮，造成了红豆杉资源的浪费。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种利用红豆杉枝叶乙酸乙酯萃余相制备紫杉黄酮的方法，以解决上述
技术介绍
中提出的问题。
[0006]为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种利用红豆杉枝叶乙酸乙酯萃余相制备紫杉黄酮的方法，包括以下步骤：
[0007]步骤一、以红豆杉枝叶乙酸乙酯萃余水相为原料，用氯仿搅拌萃取，得到有机相，有机相减压浓缩抽干，得到浓缩有机液一；剩余水相继续用正丁醇萃取，所得有机相分别减压浓缩抽干，得到浓缩有机液二，将浓缩有机液一与浓缩有机液二混合均匀；
[0008]混合均匀的浓缩有积液按比1g：3
‑
5ml用甲醇溶解后过滤，滤液加等体积的正己烷充分搅拌均匀后静置分层，分离取出甲醇溶液；在甲醇溶液中加入脱色絮泥剂脱色2
‑
4h，过滤，滤液减压浓缩抽干得紫杉黄酮粗品；
[0009]步骤二、将步骤一中所得到的紫杉黄酮粗品用乙醇水溶液溶解，采用大孔吸附树脂柱吸附，接着采用体积分数依次增大的乙醇水溶液梯度洗脱大孔吸附树脂柱，收集并且
合并含紫杉黄酮组分的洗出液，减压浓缩洗出液回收乙醇；浓缩至洗出液无醇味时停止浓缩，得到浓缩液；将浓缩液静置冷却至室温后上样至大孔吸附树脂柱，待吸附平衡后，用弱酸性甲醇水溶液洗出，洗出液减压旋蒸抽干即得淡黄色浓缩液，淡黄色浓缩液用氯仿萃取，所得有机相通过减压旋蒸抽干得到含紫衫黄酮的淡黄色浓缩物，淡黄色浓缩物中紫杉黄酮总含量为50％
‑
80％。
[0010]作为本专利技术的一种优选技术方案，上述步骤一中所述的红豆杉乙酸乙酯萃余相是为红豆杉醇提后，经水溶解并由乙酸乙酯萃取紫杉烷类化合物后所余下的水相。
[0011]作为本专利技术的一种优选技术方案，上述步骤一采用氯仿萃取2
‑
3次，每次静置分层 30
‑
60min，将每次萃取所得有机相混合后在温度为60℃
‑
68℃，压力为真空0
‑
0.08MPA减压浓缩得到浓缩有机液一；将每次萃取所得水相混合后继续进行正丁醇萃取，所述步骤一采用正丁醇萃取2
‑
3次，每次静置分层30
‑
60min，每次萃取所得有机相混合后在温度为 60℃
‑
68℃，压力为真空0
‑
0.08MPA减压浓缩抽干，得到浓缩有机液二。
[0012]作为本专利技术的一种优选技术方案，上述步骤一中滤液减压浓缩抽干温度为60℃
‑
68℃，压力为真空0
‑
0.08MPA。
[0013]作为本专利技术的一种优选技术方案，上述步骤二中紫杉黄酮粗品使用体积分数为5
‑
10％的乙醇水溶液溶解；所述步骤二中依次采用体积分数为10％、40％、50％的乙醇水溶液梯度洗脱大孔吸附树脂柱。
[0014]作为本专利技术的一种优选技术方案，上述步骤二中梯度洗脱分离时，用体积分数10％的乙醇水溶液洗脱4
‑
6BV，用体积分数40％的乙醇水溶液洗脱8
‑
12BV，用体积分数为50％的乙醇水溶液洗脱2
‑
4BV。
[0015]作为本专利技术的一种优选技术方案，上述步骤二中三次减压旋蒸抽干条件均为温度65℃
ꢀ‑
75℃，真空0
‑
0.08MPA。
[0016]作为本专利技术的一种优选技术方案，上述步骤一中脱色絮凝剂是由活性炭和硅藻土按照 2:1的质量比混合制备。
[0017]作为本专利技术的一种优选技术方案，上述步骤二中弱酸性甲醇水溶液中甲醇质量分数为 50％
‑
80％。
[0018]作为本专利技术的一种优选技术方案，上述步骤二中氯仿萃取2
‑
3次，收集合并每次氯仿萃取所得的有机相。
[0019]与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：
[0020]本专利技术提供的方法在充分利用抗癌原料药紫杉醇及其衍生物的同时，进一步提高了红豆杉枝、皮、叶的综合利用率，实现了植物的循环利用，达到对该植物的保护和开发的双重作用；本专利技术提供的方法设备要求低、操作简单易行，生产周期短，成本低，纯化效率高，在工业生产中有利于提高生产经济效益，所以适于工业化应用和市场推广。
具体实施方式
[0021]为了使本领域的技术人员更好地理解本申请方案，下面将对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整的描述，显然，所描述的实施例仅仅是本申请一部分的实施例，而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动成果前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本申请保护的范围。
[0022]需要说明的是，在不冲突的情况下，本申请中的实施例及实施例中的特征可以相互组合，下面将结合实施例来详细说明本申请。
[0023]本实施例提供了一种利用红豆杉枝叶乙酸乙酯萃余相制备紫杉黄酮的方法，具体如下：
[0024本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种利用红豆杉枝叶乙酸乙酯萃余相制备紫杉黄酮的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、以红豆杉枝叶乙酸乙酯萃余水相为原料，用氯仿搅拌萃取，得到有机相，有机相减压浓缩抽干，得到浓缩有机液一；剩余水相继续用正丁醇萃取，所得有机相分别减压浓缩抽干，得到浓缩有机液二，将浓缩有机液一与浓缩有机液二混合均匀；混合均匀的浓缩有积液按比1g：3
‑
5ml用甲醇溶解后过滤，滤液加等体积的正己烷充分搅拌均匀后静置分层，分离取出甲醇溶液；在甲醇溶液中加入脱色絮泥剂脱色2
‑
4h，过滤，滤液减压浓缩抽干得紫杉黄酮粗品；步骤二、将步骤一中所得到的紫杉黄酮粗品用乙醇水溶液溶解，采用大孔吸附树脂柱吸附，接着采用体积分数依次增大的乙醇水溶液梯度洗脱大孔吸附树脂柱，收集并且合并含紫杉黄酮组分的洗出液，减压浓缩洗出液回收乙醇；浓缩至洗出液无醇味时停止浓缩，得到浓缩液；将浓缩液静置冷却至室温后上样至大孔吸附树脂柱，待吸附平衡后，用弱酸性甲醇水溶液洗出，洗出液减压旋蒸抽干即得淡黄色浓缩液，淡黄色浓缩液用氯仿萃取，所得有机相通过减压旋蒸抽干得到含紫衫黄酮的淡黄色浓缩物，淡黄色浓缩物中紫杉黄酮总含量为50％
‑
80％。2.根据权利要求1所述的一种利用红豆杉枝叶乙酸乙酯萃余相制备紫杉黄酮的方法，其特征在于，所述步骤一中所述的红豆杉乙酸乙酯萃余相是为红豆杉醇提后，经水溶解并由乙酸乙酯萃取紫杉烷类化合物后所余下的水相。3.根据权利要求1所述的一种利用红豆杉枝叶乙酸乙酯萃余相制备紫杉黄酮的方法，其特征在于，所述步骤一采用氯仿萃取2
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3次，每次静置分层30
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60min，将每次萃取所得有机相混合后在温度为60℃
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68℃，压力为真空0
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0.08MPA减压浓缩得到浓缩有机液一；将每次萃取所得水相混合后继续进行正丁醇萃取，所述步骤一采用正丁醇萃取2
‑
3次，每次静置分层30
‑

【专利技术属性】
技术研发人员：杨青春，赵泽熙，滕院，赵晓怡，胡倩，马秋丽，
申请(专利权)人：上海卓鼎生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：