一种用于胃癌辅助诊断的标志物及试剂盒制造技术

本发明专利技术属于医药生物技术领域，公开了一种用于胃癌辅助诊断的分子标志物——LncRNA PAX8

【技术实现步骤摘要】
一种用于胃癌辅助诊断的标志物及试剂盒


[0001]本专利技术属于医药生物
，具体涉及一种用于胃癌辅助诊断的标志物及试剂盒。

技术介绍

[0002]胃癌是危及世界尤其是我国国民的最常见的消化道恶性肿瘤，近年来其发病率及死亡率不断升高。根据最新全球癌症数据显示，中国年癌症新发病例已达457万，其中胃癌约有48万，占10.8％，死亡例数约37万，占12.4％，发病率及死亡率位均位列前三。因此，揭示胃癌发生发展的分子机制对胃癌的早期诊断及探寻有效的治疗靶点具有重大的科学意义及临床意义。
[0003]近年来关于长链非编码RNA(long non
‑
coding RNA,lncRNA)在肿瘤中的功能越来越受到重视，长链非编码RNA是一类真核生物中长度大于200nt的非编码RNA分子。根据其与邻近基因的位置可以分为反义lncRNA、增强子lncRNA、基因间lncRNA、双向lncRNA和内含子lncRNA。它具有多种生物学功能，比如在细胞核中作为分子支架、协助可变剪接、调节染色体结构，或在细胞质中调控翻译、促进或抑制mRNA降解等。这些功能显示lncRNA可能与肿瘤的发生、发展密切相关，可以作为新的肿瘤标记物及特异性的治疗靶点。
[0004]PAX8
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AS1是一种反义lncRNA，位于2号染色体q14.1。近年来有研究表明PAX8
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AS1在甲状腺癌发挥抑癌基因作用，PAX8
‑
AS1亚型PAX8
‑
AS1
‑
N在乳腺癌中抑制肿瘤的生长，且与骨质疏松症、糖尿病肾病等疾病相关，但PAX8
‑
AS1在胃癌中的作用及机制未有报道。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的之一旨在提供一种用于胃癌辅助诊断的分子标志物——LncRNA PAX8
‑
AS1；本专利技术的目的之二旨在提供一种LncRNA PAX8
‑
AS1的检测试剂在制备用于胃癌辅助诊断的产品中的应用；本专利技术的目的之三旨在提供一种用于胃癌辅助诊断的试剂盒；本专利技术的目的之四旨在提供一种抑制LncRNA PAX8
‑
AS1表达和/或功能的物质在制备治疗胃癌的药物中的应用；本专利技术的目的之五旨在提供一种治疗胃癌的药物。
[0006]为实现专利技术目的，本专利技术采用的技术方案如下：
[0007]本专利技术第一方面提供了一种可用于胃癌辅助诊断的分子标志物，所述分子标志物为LncRNA PAX8
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AS1(NCBI基因ID：654433)。
[0008]通过实时荧光定量PCR检测LncRNA PAX8
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AS1在胃癌组织和癌旁正常组织中表达情况，发现LncRNA PAX8
‑
AS1在胃癌的癌组织中的表达水平显著高于癌旁正常组织；说明LncRNA PAX8
‑
AS1在胃癌组织中均有不同程度的表达上调。
[0009]通过实时荧光定量PCR检测LncRNA PAX8
‑
AS1在胃癌细胞系SNU
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16、MGC
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803、MKN
‑
7、MKN
‑
45、MKN
‑
28以及正常胃黏膜上皮细胞株GSE
‑
1中的表达情况，发现LncRNA PAX8
‑
AS1在胃癌细胞系中的表达水平显著高于正常胃黏膜细胞株；说明LncRNA PAX8
‑
AS1在胃癌细胞系中均有不同程度的表达上调。
[0010]本专利技术第二方面提供了LncRNA PAX8
‑
AS1的检测试剂在制备用于胃癌辅助诊断的产品中的应用。
[0011]根据上述的应用，优选地，所述产品通过实时荧光定量PCR、原位杂交、Northern blotting、芯片或高通量测序平台检测样本中LncRNA PAX8
‑
AS1基因的表达水平。
[0012]根据上述的应用，优选地，所述产品中含有扩增LncRNA PAX8
‑
AS1的特异性引物或与LncRNA PAX8
‑
AS1杂交的探针。
[0013]根据上述的应用，优选地，通过实时定量PCR检测样本中LncRNA PAX8
‑
AS1基因的表达水平的产品包含一对扩增LncRNA PAX8
‑
AS1的特异性引物。
[0014]根据上述的应用，优选地，通过原位杂交检测样本中LncRNA PAX8
‑
AS1的表达水平的产品包含与LncRNA PAX8
‑
AS1核苷酸序列杂交的探针。
[0015]根据上述的应用，优选地，通过Northern blotting检测样本中LncRNA PAX8
‑
AS1的表达水平的产品包含与LncRNA PAX8
‑
AS1核苷酸序列杂交的探针。
[0016]根据上述的应用，优选地，通过芯片检测样本中LncRNA PAX8
‑
AS1的表达水平包含与LncRNA PAX8
‑
AS1基因核苷酸序列杂交的探针。
[0017]根据上述的应用，优选地，扩增LncRNA PAX8
‑
AS1基因的特异性引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1(5
’‑
CTCACCATGCCTCCCTCTCCTAC
‑3’
)和SEQ ID NO.2(5
’‑
CCTCTGCCTTCGTGCTGACATTC
‑3’
)。
[0018]根据上述的应用，优选地，所述样本为所述样本包括(但不限于)组织、细胞、体液(血液、淋巴液)。更加优选地，所述样本为组织、血液。
[0019]根据上述的应用，优选地，所述产品为芯片、制剂或试剂盒。
[0020]本专利技术第三方面提供了一种用于胃癌诊断的试剂盒，所述试剂盒包括检测样本中LncRNA PAX8
‑
AS1表达水平的试剂。
[0021]根据上述的试剂盒，优选地，所述试剂包括通过RT
‑
PCR、实时荧光定量PCR、原位杂交、Northern blotting、芯片或高通量测序平台检测LncRNA PAX8
‑
AS1表达水平的试剂。
[0022]根据上述的试剂盒，优选地，通过实时定量PCR检测LncRNA PAX8
‑
AS1表达水平的试剂包括一对扩增LncRNA PAX8
‑
AS1的特异性引物。
[0023]根据上述的试剂盒，优选地，通过原位杂交检测LncRNA PAX8
‑
AS1表达水平的试剂包括与LncRNA PAX8
‑
AS1核苷酸序列杂交的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1. LncRNA PAX8
‑
AS1的检测试剂在制备用于胃癌辅助诊断的产品中的应用。2. 根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品通过实时定量PCR、原位杂交、Northern blotting、芯片或高通量测序平台检测样本中LncRNA PAX8
‑
AS1的表达水平。3. 根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品中含有扩增LncRNA PAX8
‑
AS1的特异性引物或与LncRNA PAX8
‑
AS1杂交的探针。4. 根据权利要求3所述的应用，其特征在于，扩增LncRNA PAX8
‑
AS1的特异性引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述样本包括组织、细胞、体液；所述产品为芯片、制剂或试剂盒。6. 抑制LncRNA PAX8
‑
AS1表达和/或功能的物质在制备用于治疗胃癌的产品中的应用。7. 抑制LncRNA PAX8
‑
AS1表达和/或功能的物质在如下任一中的应用：（a1）制备用于抑制肿瘤生长的产品，或抑制肿瘤生长中的应用；所述肿瘤为胃癌；（a2）制备用于抑...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐登飞，仓顺东，陈文超，胡金龙，任子瑞，孙培春，李德宇，李祥，冯浩，
申请(专利权)人：河南省人民医院，
类型：发明
国别省市：