尿液蛋白标志物在诊断遗传性血管水肿中的用途制造技术

本公开涉及尿液蛋白标志物在诊断遗传性血管水肿中的用途。具体而言，本公开涉及鉴定试剂在制备用于诊断受试者中遗传性血管水肿的装置中的用途，所述鉴定试剂特异性鉴定选自表1所述的蛋白的一种或多种。另一方面，本公开涉及用于诊断遗传性血管水肿的试剂盒或芯片，其包含所述鉴定试剂。其包含所述鉴定试剂。

【技术实现步骤摘要】
尿液蛋白标志物在诊断遗传性血管水肿中的用途


[0001]本公开涉及临床医学；具体而言涉及人遗传性血管水肿相关的尿液蛋白标志物。具体而言，本公开涉及利用遗传性血管水肿患者尿液样品和质谱分析蛋白组学技术获得的人遗传性血管水肿诊断的尿液蛋白标志物，及其用途。

技术介绍

[0002]疾病标志物是与病理生理过程相关的可测量的变化，可以用于疾病诊断、病程监测、疗效评估等。尿液是一种理想的疾病标志物临床样品来源，可以无创性地大量获得。而且尿液中缺乏内稳态机制的调控，可以富集人体排出的各种变化，这些变化就是潜在的标志物来源(参见Wu J&Gao Y.Physiological conditions can be reflected in human urine proteome and metabolome.Expert Review of Proteomics,2015；12(6):623
‑
636)。
[0003]尿液蛋白质组(urinary proteomics)旨在建立一种无创的“液体活检”诊断方法，通过检测尿液中特异的疾病标志物来部分替代组织穿刺活检,己成为重要的研究方向，具有十分巨大的临床转化应用前景。DIA(Data independent acquisition)是一种最新的数据非依赖蛋白组定量技术，它将质谱整个全扫描范围分成若干窗口，实现无差异无遗漏地获取样本中所有离子的全部碎片信息。因为DIA技术可以无歧视地获得临床样品中所有肽段的信息而不会造成低丰度蛋白的丢失，尤其适合不同实验室条件下对蛋白质进行稳健而准确的定量(参见Navarro P等人A multicenter study benchmarks software tools for label
‑
free proteome quantification.Nature Biotechnology,2016；34(11)：1130
‑
1136)。PRM(Parallel reaction monitoring)是一种靶向蛋白质组学技术，基于Orbitrap高分辨质谱的离子监视技术，能够对目标蛋白目标肽段进行选择性的检测从而实现靶向定量。
[0004]遗传性血管性水肿(Hereditary angioedema，HAE)是一种罕见的、潜在威胁生命的疾病，其特征是皮下和粘膜下肿胀的反复发作。HAE是一种罕见疾病，发病率为每5万人中有1例，通常不容易被发现。皮肤和腹部发作是HAE最常见的特征，很容易被误诊为水肿或急腹症导致患者接受无效的治疗或不必要的手术。此外，超过50％的HAE患者会发生喉头水肿，来不及抢救则会窒息死亡。因此，早期诊断标志物的发现对HAE的临床管理至关重要。

技术实现思路

[0005]鉴于本领域的上述需求，根据本公开的一些实施方案，提供了选自以下任一蛋白的鉴定试剂在制备用于遗传性血管水肿的诊断装置中的用途：
[0006]血浆蛋白酶C1抑制剂、己酮糖激酶、非那嗪类生物合成结构域蛋白、收缩蛋白α链、前纤维蛋白1、组织蛋白酶H前体、IST1同族体、苹果酸脱氢酶、Cochlin、含有崩解素和金属蛋白酶结构域的蛋白10、基底膜特异性硫酸肝素蛋白聚糖核心蛋白、激肽原1蛋白、含v
‑
集域的t细胞活化抑制剂1、表皮生长因子前体、连接粘附分子A、N
‑
乙酰化α
‑
联酸二肽酶2、跨
膜糖蛋白NMB、前胶原c内肽酶增强剂2、尿激酶纤溶酶原激活物表面受体、血小板反应蛋白解整合素金属肽酶1、组织蛋白酶Z、组织蛋白酶L1、内皮细胞选择性粘附分子、激肽释放酶1、补体成分C9、补体成分C1、钙结合蛋白、补体成分C7、水通道蛋白2、促卵泡激素β亚基、原钙粘附蛋白α
‑
C2、血管内皮生长因子受体2、钙粘附相关家族成员5、免疫球蛋白重链恒定区γ4和天冬氨酸蛋白酶A。
[0007]在具体的实施方案中，和对照中的蛋白水平相比较，选自以下的蛋白的表达水平提高，指示所述受试者患有遗传性血管水肿或者患遗传性血管水肿的风险增加：收缩蛋白α链、前纤维蛋白1、组织蛋白酶H前体、IST1同族体、Cochlin、含有崩解素和金属蛋白酶结构域的蛋白10、基底膜特异性硫酸肝素蛋白聚糖核心蛋白、连接粘附分子A、N
‑
乙酰化α
‑
联酸二肽酶2、跨膜糖蛋白NMB、前胶原c内肽酶增强剂2、尿激酶纤溶酶原激活物表面受体、血小板反应蛋白解整合素金属肽酶1、组织蛋白酶Z、组织蛋白酶L1、内皮细胞选择性粘附分子、补体成分C9、补体成分C1、补体成分C7、水通道蛋白2、促卵泡激素β亚基、原钙粘附蛋白α
‑
C2、血管内皮生长因子受体2、钙粘附相关家族成员5或其组合。
[0008]在具体的实施方案中，和对照中的蛋白水平相比较，选自以下的蛋白的表达水平降低，指示所述受试者患有遗传性血管水肿或者患遗传性血管水肿的风险增加：血浆蛋白酶C1抑制剂、己酮糖激酶、非那嗪类生物合成结构域蛋白、苹果酸脱氢酶、激肽原1、免疫球蛋白重链恒定区γ4、含v
‑
集域的t细胞活化抑制剂1、表皮生长因子前体、激肽释放酶1、天冬氨酸蛋白酶A、钙结合蛋白或其组合。反之，则风险降低。
[0009]在涉及遗传性血管水肿诊断的实施方案中，对照是指未患有遗传性血管水肿的个体。对照不一定是临床意义上健康的个体，优选是健康的个体。
[0010]本申请中所用的术语“鉴定试剂”是指能够定量和/或定性检测目标蛋白的试剂。具体地，但非限制性地，本专利技术的鉴定试剂能够特异性地识别受试样本中目标蛋白的存在或不存在；或者能够检测受试样本中目标蛋白的水平。
[0011]在本申请的一个实施方案中，所述鉴定试剂用于鉴定尿液样品中的蛋白，包括但不限于，用于定量和/或定性检测尿液样品中的蛋白。
[0012]在本申请的一个实施方案中，所述鉴定试剂能够鉴定与健康对照组或非遗传性血管水肿对照组相比，所述受试者的尿液样品中蛋白的含量增加或降低，优选地，所述增加或降低大于或等于1.5倍。本申请的鉴定试剂能够识别、或结合、或搜索、或监测、或靶向到这样的标签肽(如表1中所列蛋白包含的肽)。在一些实施方案中，适用于本公开的鉴定试剂是质谱鉴定试剂、抗体或其抗原结合片段。
[0013]在具体的实施方案中，抗体是单克隆抗体。本公开对单克隆抗体的物种来源没有限制，任何能够结合上述蛋白的抗体均可以使用。
[0014]在具体的实施方案中，抗原结合片段包括但不限于：Fab、Fab'、(Fab')2、Fv、ScFv、双特异抗体、三特异抗体、四特异抗体、双
‑
scFv、mimi抗体。任何保留了抗原结合活性的抗体片段均适用于本公开。
[0015]在一个实施方案中，当采用质谱鉴定试剂时，鉴定试剂作广泛理解，不能仅解释为实体存在的化学、生物试剂。该术语也包含质谱鉴定参数。作为一个示例，将质谱整个全扫描范围分为若干个窗口，高速、本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.鉴定试剂在制备用于诊断受试者中遗传性血管水肿的装置中的用途，所述鉴定试剂特异性鉴定选自以下的一种或多种蛋白：血浆蛋白酶C1抑制剂、己酮糖激酶、非那嗪类生物合成结构域蛋白、收缩蛋白α链、前纤维蛋白1、组织蛋白酶H前体、IST1同族体、苹果酸脱氢酶、Cochlin、含有崩解素和金属蛋白酶结构域的蛋白10、基底膜特异性硫酸肝素蛋白聚糖核心蛋白、激肽原1、含v
‑
集域的t细胞活化抑制剂1、表皮生长因子前体、连接粘附分子A、N
‑
乙酰化α
‑
联酸二肽酶2、跨膜糖蛋白NMB、前胶原c内肽酶增强剂2、尿激酶纤溶酶原激活物表面受体、血小板反应蛋白解整合素金属肽酶1、组织蛋白酶Z、组织蛋白酶L1、内皮细胞选择性粘附分子、激肽释放酶1、补体成分C9、补体成分C1、钙结合蛋白、补体成分C7、水通道蛋白2、促卵泡激素β亚基、原钙粘蛋白α
‑
C2、血管内皮生长因子受体2、钙粘附相关家族成员5、免疫球蛋白重链恒定区γ4和天冬氨酸蛋白酶A；优选地，所述鉴定试剂特异性鉴定以下蛋白的组合：血浆蛋白酶C1抑制剂、激肽释放酶1和血小板反应蛋白解整合素金属肽酶1的组合。2.根据权利要求1所述的用途，其中，所述受试者是哺乳动物受试者，优选是人。3.根据权利要求1或2所述的用途，其中所述蛋白是尿液中的蛋白。4.根据权利要求1或2所述的用途，其中所述装置是试剂盒或芯片。5.根据权利要求1或2所述的用途，所述鉴定试剂选自：质谱鉴定试剂、抗体或其抗原结合片段。6.根据权利要求5所述的用途，其中所述抗体是单克隆抗体。7.根据权利要求5所述的用途，其中所述质谱鉴定试剂包含质谱鉴定参数。8.根据权利要求1所述的用途，其中：相较于对照，以下蛋白的表达水平降低时，指示受试者患有遗传性血管水肿或发生遗传性血管水肿的风险增加，所述蛋白选自以下任一项或多项：血浆蛋白酶C1抑制剂、己酮糖激酶、非那嗪类生物合成结构域蛋白、苹果酸脱氢酶、激肽原1、免疫球蛋白重链恒定区γ4、含v
‑
集域的t细胞活化抑制剂1、表皮生长因子前体、激肽释放酶1、天冬氨...

【专利技术属性】
技术研发人员：支玉香，吴建强，刘鹏，汤晓悦，
申请(专利权)人：中国医学科学院北京协和医院，
类型：发明
国别省市：