具有改善的酶稳定性的清洗剂和清洁剂制造技术

本发明专利技术涉及清洗剂或清洁剂，其包含(i)至少一种蛋白酶，其包含氨基酸序列，所述氨基酸序列在其整个长度上与SEQ ID NO:1中指定的氨基酸序列具有至少70％的序列相同性，并且在对应于在每种情况下基于根据SEQ ID NO:1的编号的位置12、43、122、127、154、156、160、211或222的至少一个位置处具有氨基酸取代，以及(ii)选自苯基硼酸衍生物、硼酸、肽抑制剂以及它们的组合的至少一种稳定剂化合物。组合的至少一种稳定剂化合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】具有改善的酶稳定性的清洗剂和清洁剂
[0001]本专利技术属于酶
本专利技术涉及包含至少一种吉氏芽孢杆菌(Bacillus gibsonii)蛋白酶和至少一种稳定剂化合物的清洗剂或清洁剂，其中所述稳定剂化合物选自苯基硼酸衍生物、硼酸、肽抑制剂以及它们的组合。本专利技术的部分还是相应的洗涤方法和清洁方法，本文所述试剂(Mittel)的用途，以及选自苯基硼酸衍生物、硼酸、肽抑制剂以及它们的组合的稳定剂化合物用于改善清洗剂或清洁剂中的吉氏芽孢杆菌蛋白酶和/或清洗剂或清洁剂中任选包含的进一步酶的稳定性的用途。
[0002]酶在清洗剂和清洁剂中的使用在现有技术中已确立了数十年。它们根据其特殊活性用于扩展所讨论的试剂的性能范围。这些特别包括水解酶，例如蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶和纤维素酶。所提到的前三种酶水解蛋白质、淀粉和脂肪，并且因此直接促成污垢的去除。纤维素酶特别是由于其对织物的作用而使用。另一组清洗剂和清洁剂酶是氧化性酶，特别是氧化酶，其任选地与其它组分结合，优选用于漂白污渍或原位产生漂白剂。除经受不断优化的这些酶之外，其它酶例如果胶酶、β
‑
葡聚糖酶、甘露聚糖酶或其它半纤维素酶(糖苷酶)也不断地变得可用于清洗剂和清洁剂中，特别是以便能够最佳地处理特定污渍，以特别水解特定植物聚合物。
[0003]蛋白酶是历史最悠久的酶并且包含在实际上所有现代有效的清洗剂和清洁剂中。这使得其成为所有技术上最重要的酶之一。其中，依次地，由于催化活性的氨基酸而是丝氨酸蛋白酶的枯草杆菌蛋白酶类型的蛋白酶(枯草杆菌酶、枯草杆菌肽酶，EC 3.4.21.62)是特别重要的。它们充当非特异性内肽酶，并且水解肽或蛋白质内部的任何酸酰胺键。它们的最佳pH通常在明显的碱性范围内。例如，在R.Siezen的论文"Subtilases:Subtilisin
‑
like Proteases"，R.Bott和C.Betzel发表的"Subtilisin enzymes，New York，1996"中的第75
‑
95页中给出了此家族的概述。枯草杆菌酶天然地由微生物形成。特别地，通过芽孢杆菌属(Bacillus)物种形成且分泌的枯草杆菌蛋白酶是最重要的枯草杆菌酶组。
[0004]在清洗剂和清洁剂中，蛋白酶用于分解待清洁物品上的含蛋白质污渍。然而，它们也水解自身(自蛋白酶解)以及所讨论的试剂中包含的所有其它蛋白质，即，特别是清洗剂和清洁剂中包含的其它酶。这特别是在清洁过程期间发生，即当存在比较有利的反应条件时，在水性洗涤液或清洁液中发生。然而，在较小程度上，这也在所讨论的试剂的贮存期间发生，这就是为什么长贮存期总是伴随着蛋白酶活性和其它酶活性的一定损失。由于酶活性的损失，酶不再证实最佳清洁性能。这在凝胶或液体且特别是含水配制剂中特别成问题，因为在这种形式中，反应介质和水解试剂两者均与所含有的水一起提供。
[0005]一般而言，在任何情况下，仅所选的蛋白酶适用于含表面活性剂的液体制剂。许多蛋白酶在此类制剂中并未显示出足够的催化性能，或者它们是不够稳定的。因此，对于蛋白酶在清洁剂中的使用，当它们在洗涤循环期间的条件下的高催化活性和稳定性是特别期望的。
[0006]因此，清洗剂和清洁剂制剂的开发中的一个目标是特别是在贮存期间稳定所含有的酶，以及特别是在清洗剂或清洁剂的贮存和/或使用期间，防止其由于物理影响或氧化等而变性和/或切割或分解和/或降解。这些开发的重点之一在于保护所含有的蛋白质和/或
酶免于(自)蛋白酶解切割。这可以通过建立物理屏障来实现，例如通过将酶封装在特定的酶颗粒中或者将试剂包装在两室或多室系统中。频繁使用的另一种方法由添加化学化合物组成，所述化学化合物抑制蛋白酶，并且因此一般而言充当蛋白酶以及所包含的其它蛋白质和酶的稳定剂。然而，这些必须是可逆的蛋白酶抑制剂，因为蛋白酶活性仅应该被暂时阻止，特别是在贮存期间，而不是在清洁过程期间。
[0007]现有技术描述了各种可逆的蛋白酶抑制剂，例如多元醇，特别是甘油和1,2
‑
丙二醇、苯甲脒盐酸盐、硼砂、硼酸硼酸或其盐或酯。将硼酸衍生物连同多元醇一起使用也是已知的。4
‑
甲酰基苯基硼酸(4
‑
FPBA)也是由现有技术已知的蛋白酶抑制剂。为此目的还描述了肽醛，即具有还原的C末端的寡肽，特别是由2至50个单体组成的那些寡肽。可逆的肽蛋白酶抑制剂尤其包括卵类粘蛋白和亮抑酶肽。特定的，可逆的肽抑制剂以及来自蛋白酶和特定肽抑制剂的融合蛋白也用于此目的。
[0008]然而，仍然需要改善含酶清洗剂和清洁剂的清洁性能，并且更好地稳定化清洗剂和清洁剂中所含有的酶。
[0009]令人惊讶地，现在发现了与常规蛋白酶相比，来自吉氏芽孢杆菌的蛋白酶可以通过选自苯基硼酸衍生物、硼酸、肽抑制剂以及它们的组合的稳定剂化合物更好地稳定化，并且因此特别适用于清洗剂或清洁剂中，所述蛋白酶在其整个长度上与SEQ ID NO:1中指定的氨基酸序列具有至少70％的序列相同性，并且在对应于在每种情况下基于根据SEQ ID NO:1的编号的位置12、43、122、127、154、156、160、211、212和222的至少一个位置处具有氨基酸取代。
[0010]因此，在第一个方面，本专利技术的目的是包含至少一种吉氏芽孢杆菌蛋白酶和至少一种稳定剂化合物的清洗剂或清洁剂，所述吉氏芽孢杆菌蛋白酶在其整个长度上与SEQ ID NO:1中指定的氨基酸序列具有至少70％的序列相同性，并且在对应于每种情况下基于根据SEQ ID NO:1的编号的位置12、43、122、127、154、156、160、211、212和222的至少一个位置处具有氨基酸取代，其中所述稳定剂化合物选自苯基硼酸衍生物、硼酸、肽抑制剂以及它们的组合。
[0011]在本专利技术的上下文中，“肽抑制剂”应理解为意指通式(I)的化合物或通式(II)的化合物，其中所述式(I)或(II)的化合物任选地连同式(III)的盐一起存在。
[0012]式(I)的化合物具有下述结构式：
[0013]Z
‑
A
‑
NH
‑
CH(R)
‑
C(O)
‑
X
ꢀꢀꢀꢀ
(I)，
[0014]其中A是氨基酸官能团；X是氢；Z是选自以下的N封端官能团：氨基磷酸酯[(R'O)2(O)P
‑
]、次磺酰胺[(SR')2‑
]、磺酰胺[(R'(O)2S
‑
]、磺酸[SO3H]、次膦酰胺(phosphinamid)[(R')2(O)P
‑
]、氨磺酰衍生物[R'O(O)2S
‑
]、硫脲[(R')2N(O)C
‑
]、硫代氨基甲酸酯[R'O(S)C
‑
]、膦酸酯[R'
‑
P(O)OH]、酰胺磷酸酯[R'O(OH)(O)P
‑
]、氨基甲酸酯(R'O(O)C
‑
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种清洗剂或清洁剂，其包含(i)至少一种蛋白酶，其包含氨基酸序列，所述氨基酸序列在其整个长度上与SEQ ID NO:1中指定的氨基酸序列具有至少70％的序列相同性，并且在对应于在每种情况下基于根据SEQ ID NO:1的编号的位置12、43、122、127、154、156、160、211、212或222的至少一个位置处具有至少一个氨基酸取代，和(ii)选自苯基硼酸衍生物、硼酸、肽抑制剂以及它们的组合的至少一种稳定剂化合物。2.根据权利要求1的清洗剂或清洁剂，其中所述至少一个氨基酸取代选自在每种情况下基于根据SEQ ID NO:1的编号的Q12L、I43V、M122L、D127P、N154S、T156A、G160S、M211N、M211L、P212D、P212H或A222S。3.根据权利要求1或2的清洗剂或清洁剂，其中所述蛋白酶具有在每种情况下基于根据SEQ ID NO:1的编号的以下氨基酸取代变体之一：(i)I43V；(ii)M122L、N154S和T156A；(iii)M211N和P212D；(iv)M211L和P212D；(v)G160S；(vi)D127P、M211L和P212D；(vii)P212H；或(viii)Q12L、M122L和A222S。4.根据权利要求1至3之一的清洗剂或清洁剂，其中相对于所述清洗剂或清洁剂的总重量，所述蛋白酶按重量计的比例基于有活性的蛋白质为0.005至5.0wt.％，优选0.05至2wt.％，更优选0.01至0.5wt.％，并且甚至更优选0.02至0.2wt.％。5.根据权利要求1至4之一的清洗剂或清洁剂，其中所述肽抑制剂选自式(I)的化合物、式(II)的化合物以及它们的组合，其中所述式(I)的化合物和/或所述式(II)的化合物任选地和式(III)的盐一起存在，其中所述式(I)的化合物具有以下结构式：Z
‑
A
‑
NH
‑
CH(R)
‑
C(O)
‑
X
ꢀꢀ
(I)，其中A是氨基酸官能团；X是氢；Z是选自以下的N封端官能团：氨基磷酸酯[(R'O)2(O)P
‑
]、次磺酰胺[(SR')2‑
]、磺酰胺[(R'(O)2S
‑
]、磺酸[SO3H]、次膦酰胺[(R')2(O)P
‑
]、氨磺酰衍生物[R'O(O)2S
‑
]、硫脲[(R')2N(O)C
‑
]、硫代氨基甲酸酯[R'O(S)C
‑
]、膦酸酯[R'
‑
P(O)OH]、酰胺磷酸酯[R'O(OH)(O)P
‑
]、氨基甲酸酯(R'O(O)C
‑
)和脲(R'NH)(O)C
‑
)，其中每个R'独立地选自直链或分支的C1‑
C6未取代的烷基、苯基、C7‑
C9烷芳基和环烷基官能团，其中所述环烷基环可以是C4‑
C8环烷基环，并且可以含有选自O、N和S的一个或多个杂原子；并且R选自直链或分支的C1‑
C6未取代的烷基、苯基和C7‑
C9烷芳基官能团；以及它们的立体异构体、互变异构体和盐；其中所述式(II)的化合物具有以下结构式：Y
‑
B1‑
B0‑
X
ꢀꢀꢀ
(II)，其中X是氢；B1是单个D或L氨基酸官能团；B0是氨基酸官能团，并且Y由一个或多个，优选一个或两个氨基酸官能团，以及任选存在的N封端官能团组成，其中所述N封端官能团如(I)
下所定义；其中所述式(III)的盐具有以下结构式：(C
E+
)
p
(D
F
‑
)
q
ꢀꢀꢀꢀ
(III)，其中C是选自Al
3+
、Ca
2+
、Li
+
、Mg
2+
、Mn
2+
、Ni
2+
、K
+
、NR"
4+
和Na
+
的阳离子，其中每个R"彼此独立地代表H或者线性或分支的、取代或未取代的烷基、芳基或烯基，其可以全部任选地含有一个或多个杂原子；E是1至3的整数，并且对应于所述阳离子的价；p对应于所述盐中的阳离子数目；D是选自CH3COO
‑
、Br
‑
、CO
32
‑
、Cl
‑
、C3H5O(COO)
33
‑
、HCOO
‑
、HCO3‑

【专利技术属性】
技术研发人员：N，
申请(专利权)人：汉高股份有限及两合公司，
类型：发明
国别省市：