膀胱癌诊断用尿液miRNA标志物、诊断试剂及试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种膀胱癌诊断用尿液miRNA标志物、诊断试剂及试剂盒，所述尿液miRNA标志物选自hsa

【技术实现步骤摘要】
膀胱癌诊断用尿液miRNA标志物、诊断试剂及试剂盒


[0001]本专利技术涉及分子诊断
，特别涉及一种膀胱癌诊断用尿液miRNA标志物、诊断试剂及试剂盒。

技术介绍

[0002]膀胱癌(bladder cancer，BC)是起源于膀胱尿路上皮的恶性肿瘤，是泌尿系统最常见的恶性肿瘤之一,占我国泌尿生殖系肿瘤发病率的第一位。全球范围内膀胱癌发病情况：发病率位居所有恶性肿瘤第11位，膀胱癌发病存在地区性、种族性及性别的差异，可见于各年龄段，高发年龄50～70岁，且随着年龄增加，发病率也逐渐增加。
[0003]BC具有早期发现生存率高，高复发率需要频繁和长时间的监测的特点。虽然现在存在如手术，放疗，化疗等治疗方法，但由于晚期诊断和迅速转移，预后和5年生存率极为差。虽然诸如手术，放疗，化学疗法和治疗方法显着提高的膀胱癌患者的生活质量，但是早期诊断是提高存活率的关键。
[0004]目前，膀胱镜检和活检被认为是BC筛查诊断的金标准，但它们具有价格昂贵的特点，且有可能引起泌尿男生殖系统感染、尿道及膀胱出血、尿道损伤和尿道狭窄等并发症，且对低级别的肿瘤具有较低的检测敏感性。针对尿液或膀胱冲洗标本的尿细胞学检查是膀胱癌诊断和术后随诊的主要方法之一，该检测方式虽然是非侵入性的，但其在早期BC诊断上具有极低的敏感性。许多基于尿液的标志物如：核基质蛋白22(nuclear matrix protein 22，NMP22)，膀胱肿瘤抗原(bladder tumor antigen，BTA)和细胞角蛋白在过去几十年中持续发展，但没一个是理想的、可用于大规模癌症筛选的标志物。因此，迫切需要开发可用于早期阶段BC诊断、监测、具有高灵敏度和特异性的筛查标志物。
[0005]多项研究表明，尿液中含有许多不同种类的RNA，包括mRNA、微小RNA(miRNA)和其他非编码蛋白(nc)RNA。由于与血液相比更易于检测，尿液是用于泌尿系统癌症筛查的特别有吸引力的生物标志物来源，并且可以在较早阶段捕获疾病。
[0006]miRNA是长度为18
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25个核苷酸的短非编码RNA，可以通过特定目标mRNA的分解或通过抑制其翻译来阻止蛋白质表达，参与调控个体发育、细胞凋亡、增殖及分化等生命活动，在肿瘤的发生和发展过程中发挥着类似于致癌基因或抑癌基因的功能。miRNA的表达谱具有明显的组织特异性，在不同肿瘤中具有特定的表达模式。这些特点都使得miRNA有可能成为肿瘤诊断新的生物学标记和治疗靶标。
[0007]尽管现有的研究报道了一些泌尿系统癌证早期诊断用的miRNA标志物，但这些标志物或多或少都有检测的局限性，最终能用于膀胱癌筛查的尿液miRNA生物标志物以及生物标志物组合标志物还未见定论，急需开发新的适合于膀胱癌诊断用尿液miRNA标志物。

技术实现思路

[0008]本专利技术的目的在于提供一种膀胱癌诊断用尿液miRNA标志物、诊断试剂及试剂盒，相对国际上报道的其它miRNA标志物，具备有更高的人群特异性；所公开的miRNA诊断标志
物均为首次提出，相较于其他miRNA分子标志物更可靠。为膀胱癌诊断提供了一种新的可选途径。
[0009]本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是：一种膀胱癌诊断用尿液miRNA标志物，所述尿液miRNA标志物选自hsa
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miR
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143
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3p、hsa
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miR
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183
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5p、hsa
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miR
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21
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3p、hsa
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miR
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219a
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5p、hsa
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miR
‑1‑
3p、hsa
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miR
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18a
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3p中的一种或多种的组合。
[0010]作为优选，所述尿液miRNA标志物为hsa
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3p、hsa
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5p、hsa
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3p、hsa
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5p、hsa
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3p和hsa
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3p的组合。
[0011]一种膀胱癌诊断试剂，所述膀胱癌诊断试剂包括权利要求1所述尿液miRNA标志物。
[0012]一种膀胱癌诊断用试剂盒，所述膀胱癌诊断用试剂盒包括权利要求1所述尿液miRNA标志物作为标准品，以及检测权利要求1所述尿液miRNA标志物的相应引物。
[0013]本专利技术的有益效果是：本专利技术明确6个适用于中国人膀胱癌的特异性诊断标志物，及特异性诊断标志物组合，上述miRNA诊断标志物为首次提出，相较于其他miRNA分子标志物更可靠。
[0014]与现有技术相比，本专利技术的积极和有益效果在于：(1)本专利技术首次发现了hsa
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3p、hsa
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3p、hsa
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3p可作为新的膀胱癌标志物，上述标志物在泌尿系统肿瘤的早期检测和诊断中有重要的价值；(2)本专利技术的miRNA标志物检测，操作简便，可行性强，灵敏度和特异性高，具有临床诊断和指导意义。
[0015](3)本专利技术可通过尿液检测miRNA表达量，从而达到无创的目的。
附图说明
[0016]图1为16个((P<0.05)有差异表达的膀胱癌miRNA诊断标志物的表达水平热图。miRNA的表达水平(拷贝数/毫升)是以log2标度呈现的并且相对于零平均值标准化。点的颜色表示浓度。基于欧几里德距离针对两个维度(miRNA和样品)进行分层聚类。对于水平维度，使用颜色表示病例
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对照的受试者。
[0017]图2为膀胱癌miRNA诊断标志物组合在各队列的AUC图；其中，图2
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A为16个膀胱癌miRNA诊断标志物组合在各队列的AUC图，2
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B为6个膀胱癌miRNA诊断标志物组合在各队列的AUC图。
[0018]图3为6个膀胱癌miRNA诊断标志物组合在对照和本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种膀胱癌诊断用尿液miRNA标志物，其特征在于，所述尿液miRNA标志物选自hsa
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3p、hsa
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5p、hsa
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3p、hsa
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5p、hsa
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3p、hsa
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3p中的一种或多种的组合。2.根据权利要求1所述的膀胱癌诊断用尿液miRNA标志物，其特征在于，所述尿液miRNA标志物为hsa
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mi...

【专利技术属性】
技术研发人员：蒋贝尔，陈阳，郭辉，袁易初，杜晴晴，张楠，程赫，邹瑞阳，
申请(专利权)人：觅瑞实验室私人有限公司，
类型：发明
国别省市：