Akt1磷酸化PMS2蛋白在作为卵巢癌治疗靶点中的应用制造技术

本发明专利技术属于生物技术领域，公开了一种Akt1磷酸化PMS2蛋白在作为卵巢癌治疗靶点中的应用，所述鉴定Akt1磷酸化PMS2蛋白作为卵巢癌治疗靶点的方法包括：通过Western Blot检测活化Akt1和p

【技术实现步骤摘要】
Akt1磷酸化PMS2蛋白在作为卵巢癌治疗靶点中的应用


[0001]本专利技术属于生物
，尤其涉及一种Akt1磷酸化PMS2蛋白在作为卵 巢癌治疗靶点中的应用。

技术介绍

[0002]目前，卵巢癌是致死率最高的妇科恶性肿瘤，其中上皮性卵巢癌约占 85～90％。由于其早期临床症状不明显，且缺少早期诊断方法，大多数确诊时已 属晚期。据报道2014年，美国新发卵巢癌病例为21980例，死亡病例为14270 例，约2/3的新发病例发现时已是FIGOIII
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IV，即已有骨盆外转移。目前卵巢癌 临床治疗金标准是肿瘤细胞减灭术联合以铂为基础的化疗治疗，尽管大多数患 者初次治疗时对化疗反应好，仍有部分患者短期内复发，5年生存率仅不到30％。 目前，早期诊断困难和化疗耐药是影响卵巢癌治疗效果和预后差的主要原因。 因此寻求卵巢癌治疗新靶点、提高卵巢癌疗效，成为当前研究的热点。
[0003]Akt是丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，又称蛋白激酶B(protien kinase B，PKB)， 含3种异构体Akt1，Akt2和Akt3，也称为P本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种Akt1磷酸化PMS2蛋白在作为卵巢癌治疗靶点中的应用。2.一种实施如权利要求1所述的Akt1磷酸化PMS2蛋白在作为卵巢癌治疗靶点中的应用的鉴定Akt1磷酸化PMS2蛋白作为卵巢癌治疗靶点的方法，所述鉴定Akt1磷酸化PMS2蛋白作为卵巢癌治疗靶点的方法包括以下步骤：步骤一，通过Western Blot检测活化Akt1和p
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PMS2关系；步骤二，检测p
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PMS2 T156下调后卵巢癌细胞迁移能力的变化；步骤三，检测p
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PMS2 T156下调后卵巢癌细胞侵袭能力的变化；步骤四，通过平板克隆法检测转染PMS2
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T156A后卵巢癌细胞克隆形成能力的变化；步骤五，通过流式细胞仪及WesternBlot检测转染PMS2
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T156A卵巢癌细胞凋亡的影响。3.如权利要求2所述的鉴定Akt1磷酸化PMS2蛋白作为卵巢癌治疗靶点的方法，其特征在于，步骤一中，所述通过WesternBlot检测活化Akt1和p
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PMS2关系，包括：(1)通过Western Blot检测卵巢癌细胞系p
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Akt S473和p
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PMS2 T156的表达情况；(2)通过WesternBlot检测突变质粒PMS2
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T156A转染效果；(3)上调Akt1活性后，检测p
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PMS2 T156表达情况。4.如权利要求3所述的鉴定Akt1磷酸化PMS2蛋白作为卵巢癌治疗靶点的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述通过Western Blot检测卵巢癌细胞系p
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Akt S473和p
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PMS2 T156的表达情况，包括：通过Western Blot法检测4种卵巢癌细胞株中P
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Akt S473和p
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PMS2 T156的表达情况，因Hela细胞中存在正常的MMR功能和异常活化的Akt1而作为阳性对照。5.如权利要求3所述的鉴定Akt1磷酸化PMS2蛋白作为卵巢癌治疗靶点的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述通过Western Blot检测突变质粒PMS2
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T156A转染效果，包括：选取p
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PMS2 T156高表达的A2780和SKOV3作为转染对象，通过Western Blot验证转染效果。6.如权利要求3所述的鉴定Akt1磷酸化PMS2蛋白作为卵巢癌治疗靶点的方法，其特征在于，步骤(3)中，所述上调Akt1活性后，检测p
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PMS2 T156表达情况，包括：选取A2780和SKOV3细胞作为实验对象，加入Akt1活化剂IG...

【专利技术属性】
技术研发人员：高芳芳，
申请(专利权)人：郑州大学第三附属医院河南省妇幼保健院，
类型：发明
国别省市：