知母皂苷AⅢ的制备方法技术

本发明专利技术涉及知母皂苷AⅢ的制备方法，属于天然提取物制备领域。知母皂苷AⅢ的制备方法，将破碎后的知母与水混合，在40～60℃下保温至少12h，即将知母中的知母皂苷BⅡ转化为知母皂苷AⅢ；或将知母皂苷BⅡ、破碎后的知母和水在40～60℃下保温至少12h，即将知母皂苷BⅡ转化为知母皂苷AⅢ。本发明专利技术方法简单、成本低。成本低。成本低。

【技术实现步骤摘要】
知母皂苷AⅢ的制备方法


[0001]本专利技术涉及知母皂苷AⅢ的制备方法，属于天然提取物制备领域。

技术介绍

[0002]知母为百合科植物知母的根茎，知母Anemarrhena asphodeloides Bunge，为多年生草本。全株无毛。根茎横生，粗壮，密被许多黄褐色纤维状残叶基，下面生有多数肉质须根。叶基生，丛出，线形，长20
‑
70cm，宽3
‑
7mm，上面绿色，下面深绿色，无毛，质稍硬，叶基部扩大包着根茎。花葶直立，不分枝，高50
‑
120cm，下部具披针形退化叶，上部疏生鳞片状小苞片；花2
‑
6朵成一簇，散生在花葶上部呈总状花序，长20
‑
40cm；花黄白色，干后略带比色，多于夜间开放，具短梗；花被片6，基部稍连合，2轮排列，长圆形，长5
‑
8mm，宽1
‑
1.5mm，先端稍内折，边缘较薄，具3条淡绿色纵脉纹；发育雄蕊3，着生于内轮花被片近中部，花药黄色，退化雄蕊3，着生于外轮花被片近基部，不具花药；雌蕊1，子房长卵形，3室，花柱短，柱头1。蒴果卵圆形，长10
‑
15mm，直径5
‑
7mm，成熟时沿腹缝线上方开裂为3裂片，每裂片内能常具1颗种子。种子长卵形，具3棱，一端尖，长8
‑
12mm，黑色。花期5
‑
8月。果期7
‑
9月。主产于河北、山西、陕西、内蒙古等地。具清热泻火，滋阴润燥之功效，为中国药典历版所收载品种。
[0003]知母药材化学成分主含皂苷。含总皂苷约6％，从中检出6种皂甙苷，分别称为知母皂苷A
‑Ⅰ
，A
‑Ⅱ
，A
‑Ⅲ
、A
‑Ⅳ
、B
‑Ⅰ
和B
‑Ⅱ
，其中知母皂苷B
‑Ⅱ
即是原知母皂苷A
‑Ⅲ
(prototimosaponinA
‑Ⅲ
)，知母皂苷A
‑Ⅲ
即是知母皂苷(zhimrsaponin)A，又是知母皂苷(anemarsaponin)A1，是萨尔萨皂苷元与知母双糖结合而成的双糖苷，知母皂苷A
‑Ⅰ
是萨尔萨皂苷元β
‑
D
‑
吡喃半乳糖苷。此外还有马尔考皂苷元、新芰脱皂苷元。尚含多量的还原糖和粘液质、鞣酸、脂肪油等。另含芒果苷约0.5％。
[0004]知母所含皂苷中知母皂苷BⅡ的含量最高，《中国药典》2020版规定知母药材含知母皂苷BⅡ不少于3.0％；文献报道(不同产地知母药材中芒果苷和知母皂苷BⅡ的含量测定，中国实验方剂学杂志，2010年第16期49
‑
51页)药材中含知母皂苷BⅡ多在5％左右，最高测得含量达10.25％。
[0005]知母皂苷BⅡ为呋甾皂苷元；知母皂苷AⅢ为螺甾皂苷元，是知母皂苷BⅡC
‑
22位脱羟基、C
‑
26糖链脱葡萄糖基而成。用传统的酸水解方法将知母皂苷BⅡ水解为知母皂苷AⅢ，反应强烈，条件不容易控制，且C
‑
3糖链容易脱糖而水解为菝葜皂苷元。
[0006]随着提取、分离、纯化等技术的发展和应用，目前，国内外对知母各种皂苷及其苷元的研究日渐广泛深入。如授权专利技术专利ZL201210234803.4公开了一种知母皂苷AⅢ的制备方法。该方法将市售的中药知母饮片或者新鲜采集的知母根茎或须根为原料，采用醇提、酶解、萃取、树脂及硅胶柱层析、结晶组合工艺制得知母皂苷AⅢ。文献报道知母皂苷AⅢ具有抗血小板聚集、改善学习能力和记忆力、降血糖和抗肿瘤等作用，对肝癌、乳腺癌、宫颈癌等肿瘤细胞的增殖具有抑制作用，如授权专利技术专利ZL201610637699.1提供了一种用于抑制肝癌、黑色素瘤和乳腺癌等多种恶性肿瘤的TAⅢ脂质体。

技术实现思路

[0007]本专利技术解决的第一个问题是提供一种不外加任何试剂试药，工艺简单的将知母皂苷BⅡ转化为知母皂苷AⅢ的方法。
[0008]知母皂苷AⅢ的制备方法，将破碎后的知母与水混合，在40～60℃下保温至少12h，即将知母中的知母皂苷BⅡ转化为知母皂苷AⅢ；或，将知母皂苷BⅡ、破碎后的知母和水在40～60℃下保温至少12h，即将知母皂苷BⅡ转化为知母皂苷AⅢ。
[0009]在一种实施方式中，保温温度为40～55℃；在另一种实施方式中，保温温度为45～55℃；在一种具体的实施方式中，保温温度为50℃。
[0010]在一种实施方式中，知母与水的重量比为1:4～12；在另一种实施方式中，知母和水的重量比为1:6～10；在一种具体的实施方式中，知母和水的重量比为1:8。
[0011]在一种实施方式中，保温时间为至少18h；在另一种实施方式中，保温时间为18～36h；在一种具体的实施方式中，保温时间为24h。
[0012]在一种实施方式中，知母皂苷AⅢ的制备方法，按以下步骤进行：
[0013]a、将破碎后的知母药材与水混合，在40～60℃下保温至少12h；然后过滤，得到滤渣和滤液；
[0014]b、将滤液浓缩成浸膏A；将滤渣用有机溶剂回流提取，再将提取液浓缩成浸膏B；
[0015]c、将浸膏A和浸膏B合并，用水稀释后，加入浸膏总重量3％～8％的活性炭，静置8小时以上，过滤，得到知母皂苷AⅢ提取物滤饼；优选稀释用水的水温为50～100℃；更优选水温为80～95℃；
[0016]d、将知母皂苷AⅢ提取物滤饼用有机溶剂加热溶解澄清后，过滤出活性炭，再静置12h以上，过滤，所得滤饼为知母皂苷AⅢ粗品；
[0017]e、将知母皂苷AⅢ粗品重结晶，收集结晶，干燥，即为高纯度知母皂苷AⅢ。
[0018]在一种实施方式中，步骤a中，破碎后的知母药材粒径在1cm以下。
[0019]在一种实施方式中，步骤b中，浸膏A、浸膏B的相对密度均为1.05～1.25，优选相对密度为1.11～1.12。
[0020]在一种实施方式中，步骤b和步骤d中的有机溶剂为醇；优选的，醇的浓度为60～80％；进一步优选醇的浓度为70％；更进一步优选为有机溶剂为甲醇或乙醇；再更进一步优选有机溶剂为甲醇。
[0021]在一种实施方式中，步骤b中，回流提取时，滤渣与有机溶剂的重量比为1:4～8，优选重量比为1:6；每次提取1～2h，回流提取至少3次；优选回流提取方法为：第1次提取2小时，第2、3次每次提取1小时。
[0022]在一种实施方式中，步骤c中，浸膏总重量与水重量的比为1:4～8，优选重量比为1:5；优选过滤采用板框过滤；优选活性炭加入量为5％；优选静置时间为8～36h；更优选静置时间为24h。
[0023]在一种实施方式中，步骤d中，知母皂苷AⅢ提取物滤饼与有机溶剂的比为1:8～1:16；优选知母皂苷AⅢ提取物滤饼与有机溶剂的比为1:12，静置时间为30小时本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.知母皂苷AⅢ的制备方法，其特征在于，将破碎后的知母与水混合，在40～60℃下保温至少12h，即将知母中的知母皂苷BⅡ转化为知母皂苷AⅢ；或将知母皂苷BⅡ、破碎后的知母和水在40～60℃下保温至少12h，即将知母皂苷BⅡ转化为知母皂苷AⅢ。2.根据权利要求1所述的知母皂苷AⅢ的制备方法，其特征在于，保温温度为40～55℃；优选为45～55℃；更优选为50℃。3.根据权利要求1所述的知母皂苷AⅢ的制备方法，其特征在于，知母与水的重量比为1:4～12；优选为1:6～10；更优先为1:8。4.根据权利要求1所述的知母皂苷AⅢ的制备方法，其特征在于，保温时间为至少18h；优选为18～36h；更优选为24h。5.根据权利要求1所述的知母皂苷AⅢ的制备方法，其特征在于，按以下步骤进行：a、将破碎后的知母药材与水混合，在40～60℃下保温至少12h；然后过滤，得到滤渣和滤液；优选的，破碎后的知母药材粒径在1cm以下；b、将滤液浓缩成浸膏A；将滤渣用有机溶剂回流提取，再将提取液浓缩成浸膏B；优选的，浸膏A、浸膏B的相对密度均为1.05～1.25，更优选相对密度为1.11～1.12。c、将浸膏A和浸膏B合并，用水稀释后，加入浸膏总重量3％～8％的活性炭，静置8小时以上，过滤，得到知母皂苷AⅢ提取物滤饼；优选稀释用水的水温为50～100℃；更优选水温为80～95℃；d、将知母皂苷AⅢ提取物滤饼用有机溶剂加...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢海峰，李伟，潘华，谢期林，胡云岭，
申请(专利权)人：成都普睿法药物研发有限公司，
类型：发明
国别省市：