示踪粒子标记目标分子及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及生物检测领域，具体而言，提供了一种示踪粒子标记目标分子及其制备方法和应用。本发明专利技术提供的示踪粒子标记目标分子的制备方法，将目标分子与酪蛋白混合后与示踪粒子结合反应，得到示踪粒子标记目标分子。该方法能够改善标记状态，增强目标分子与示踪粒子的结合能力和稳定性，从而使得免疫反应中的活性和特异性提高。和特异性提高。

【技术实现步骤摘要】
示踪粒子标记目标分子及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及生物检测领域，具体而言，涉及一种示踪粒子标记目标分子及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]免疫层析技术是根据免疫学原理，利用吸附载体、通过示踪粒子显色实现定性、半定量或定量检测样本中抗原或抗体含量的一种快速检测技术。以检测样品中的抗体为例，将抗原先固定于吸附载体如硝酸纤维素膜的某一区带，当该干燥的硝酸纤维素一端浸入样品(如尿液、唾液、血清)后，由于毛细作用，样品将沿着该膜向前移动，当移动至固定有抗原的区域时，样品中相应的抗体即与该抗原发生特异性结合，其中，抗原被示踪粒子所标记，当抗原抗体结合反应发生时，会显示一定的颜色，从而实现特异性的免疫检测。常用的示踪粒子包括胶体金、乳胶、荧光微球等等。
[0003]免疫层析诊断试剂在制备过程中，需要将示踪粒子与目标分子结合，即实现目标分子的示踪粒子标记。在实际应用过程中，例如乳胶、胶体金、荧光微球等等，均可能存在示踪粒子与目标分子之间结合力相对较弱，容易出现断裂的问题。在进行免疫反应时，如果样本中目标分子与特异性受体/配体存在较高的亲和力时，往往还会出现目标分子与示踪粒子断裂的现象，进而导致免疫反应活性降低、特异性差等问题，例如在胶体金免疫层析中会引起死金现象。
[0004]有鉴于此，特提出本专利技术。

技术实现思路

[0005]本专利技术的第一目的在于提供一种示踪粒子标记目标分子的制备方法。
[0006]本专利技术的第二目的在于提供一种示踪粒子标记目标分子。
>[0007]本专利技术的第三目的在于提供示踪粒子标记目标分子的应用。
[0008]本专利技术的第四目的在于提供一种免疫层析检测试纸。
[0009]为了实现本专利技术的上述目的，特采用以下技术方案：
[0010]一种示踪粒子标记目标分子的制备方法，将目标分子与酪蛋白混合后与示踪粒子结合反应，得到示踪粒子标记目标分子；
[0011]所述示踪粒子包括胶体金、胶体硒、胶体银、乳胶或荧光微球。
[0012]进一步地，目标分子与酪蛋白的质量比为1：(0.5-5)；
[0013]可选的，目标分子与酪蛋白的质量比为1：(0.8-4)；
[0014]可选的，目标分子与酪蛋白的质量比为1：(1-3.5)；
[0015]可选的，目标分子与酪蛋白的质量比为1.5：(1.5-5)。
[0016]进一步地，目标分子为抗原或抗体；
[0017]进一步地，抗原或抗体选自以下免疫检测项目相关抗原或抗体：感染性疾病免疫检测、心肌标志物免疫检测或肿瘤相关标志物免疫检测。
[0018]进一步地，所述感染性疾病包括病毒感染疾病、细菌感染疾病、真菌感染疾病、衣原体感染疾病、支原体感染疾病或寄生虫感染疾病；
[0019]可选的，感染性疾病的相关抗原包括艾滋病毒抗原、甲型肝炎病毒抗原、乙型肝炎病毒抗原、丙型肝炎病毒抗原、丁型肝炎病毒抗原、戊型肝炎病毒抗原、庚型肝炎病毒抗原、风疹病毒抗原、人巨细胞病毒抗原、单纯疱疹病毒1型抗原、单纯疱疹病毒2型抗原、狂犬病毒抗原、人类T淋巴细胞白血病病毒抗原、登革热病毒抗原、人乳头瘤病毒抗原、西尼罗河病毒抗原、森林脑炎病毒抗原、麻疹病毒抗原、流感病毒抗原、副流感病毒抗原、水痘病毒抗原、艾柯病毒型抗原、柯萨奇病毒抗原、乙型脑炎病毒抗原、柯萨奇病毒抗原、EB病毒抗原、腮腺炎病毒抗原、梅毒螺旋体抗原、包柔氏螺旋体抗原、沙眼衣原体抗原、肺炎衣原体抗原、鹦鹉热衣原体抗原、解脲脲原体抗原、肺炎支原体抗原、结核分枝杆菌抗原、幽门螺旋杆菌抗原、淋球菌抗原、疟原虫抗原、枯氏锥虫抗原或弓形虫抗原；
[0020]可选的，所述心肌标志物包括肌钙蛋白、肌红蛋白、肌酸激酶同工酶、N末端脑钠肽前体、心脏型脂肪酸结合蛋白、D-二聚体、脂蛋白相关磷脂酶A2、髓过氧化物酶或生长刺激表达基因2蛋白；
[0021]可选的，所述肿瘤相关标志物包括：胃泌素释放肽前体、糖类抗原、细胞角质蛋白19、附睾蛋白4、甲胎蛋白、癌胚抗原、前列腺特异性抗原、鳞状细胞癌抗原或人前列腺特异性基因1。
[0022]进一步地，目标分子与示踪粒子结合后还包括封闭的步骤，再得到示踪粒子标记目标分子。
[0023]上述制备方法制备得到的示踪粒子标记目标分子。
[0024]上述示踪粒子标记目标分子在免疫检测或制备免疫检测试剂中的应用。
[0025]一种免疫层析检测试纸，包括上述示踪粒子标记目标分子。
[0026]进一步地，所述免疫层析检测试纸包括乳胶免疫层析检测试纸、胶体金免疫层析检测试纸、胶体硒免疫层析检测试纸、胶体银免疫层析检测试纸或荧光免疫层析检测试纸。
[0027]与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：
[0028]本专利技术提供的示踪粒子标记目标分子的制备方法，将目标分子与酪蛋白混合后与示踪粒子结合反应，得到示踪粒子标记目标分子。在常规的认知中，在目标分子标记示踪粒子前加入无关的蛋白往往会竞争结合位点，从而导致灵敏度下降。然而，专利技术人却发现在酪蛋白存在的环境中，进行目标分子与示踪粒子的结合反应，能够增强目标分子与示踪粒子的结合能力和稳定性，从而使得免疫反应中的活性和特异性提高，例如胶体金层析反应中死金现象的消失等，取得了预料不到的技术效果。特别是现有技术中本身存在目标分子与示踪粒子结合较为困难需要间接标记的方案，采用本专利技术的目标分子与酪蛋白混合后与示踪粒子结合反应的方法可以取得比间接标记更好的效果。
具体实施方式
[0029]下面将结合实施例对本专利技术的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本专利技术，而不应视为限制本专利技术的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。
[0030]除非另有说明，本文中所用的专业与科学术语与本领域熟练人员所熟悉的意义相
同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法或材料也可应用于本专利技术中。
[0031]本专利技术提供一种示踪粒子标记目标分子的制备方法，将目标分子与酪蛋白混合后与示踪粒子结合反应，得到示踪粒子标记目标分子，其中，示踪粒子包括胶体金、胶体硒、胶体银、乳胶或荧光微球。
[0032]在常规的认知中，在目标分子标记示踪粒子前加入无关的蛋白往往会竞争结合位点，从而导致灵敏度下降。然而，专利技术人却发现在酪蛋白存在的环境中，进行目标分子与示踪粒子的结合反应，能够改善标记状态，增强目标分子与示踪粒子的结合能力和稳定性，从而使得免疫反应中的活性和特异性提高，例如胶体金层析反应中死金现象的消失等，取得了预料不到的技术效果。特别是现有技术中本身存在目标分子与示踪粒子结合较为困难需要间接标记的方案，采用本专利技术的目标分子与酪蛋白混合后与示踪粒子结合反应的方法可以取得比间接标记更好的效果。
[0033]需要说明的是，本专利技术中目标分子与示踪粒子的结合反应可以为本领域常规的制备过程，在此不作特定的限定，不同之处可以仅在于，先在目标分子中混入酪蛋白，再将目标分子与酪蛋白的混本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种示踪粒子标记目标分子的制备方法，其特征在于，将目标分子与酪蛋白混合后与示踪粒子结合反应，得到示踪粒子标记目标分子；所述示踪粒子包括胶体金、胶体硒、胶体银、乳胶或荧光微球。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，目标分子与酪蛋白的质量比为1：(0.5-5)；可选的，目标分子与酪蛋白的质量比为1：(0.8-4)；可选的，目标分子与酪蛋白的质量比为1：(1-3.5)；可选的，目标分子与酪蛋白的质量比为1.5：(1.5-5)。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，目标分子为抗原或抗体。4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，抗原或抗体选自以下免疫检测项目相关抗原或抗体：感染性疾病免疫检测、心肌标志物免疫检测或肿瘤相关标志物免疫检测。5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述感染性疾病包括病毒感染疾病、细菌感染疾病、真菌感染疾病、衣原体感染疾病、支原体感染疾病或寄生虫感染疾病；可选的，感染性疾病的相关抗原包括艾滋病毒抗原、甲型肝炎病毒抗原、乙型肝炎病毒抗原、丙型肝炎病毒抗原、丁型肝炎病毒抗原、戊型肝炎病毒抗原、庚型肝炎病毒抗原、风疹病毒抗原、人巨细胞病毒抗原、单纯疱疹病毒1型抗原、单纯疱疹病毒2型抗原、狂犬病毒抗原、人类T淋巴细胞白血病病毒抗原、登革热病毒抗原、人乳头瘤病毒抗原、西尼罗河病毒抗原、森林脑炎病毒抗原、麻疹病毒抗原、流感病毒抗原、副流感病毒抗原、水痘病...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑锦龙，李瑞净，魏钟杰，黄荣生，岑静，覃丽芳，詹佩文，丁正辉，张耀东，陈一尘，庞土玲，
申请(专利权)人：广东菲鹏生物有限公司，
类型：发明
国别省市：