一种溶洞水环境DNA样品的现场采集方法技术

技术编号:32338809 阅读:70 留言:0更新日期:2022-02-16 18:47
本发明专利技术涉及一种溶洞水环境DNA样品的现场采集方法,包括以下步骤:一、用贝勒管到溶洞水环境DNA检测点进行采水,采到的水样放入一次性塑料盆中待用;第二步,将第一步采集获得的溶洞环境DNA水样初步过滤,去除大颗粒杂质,第三步,取一次性注射器,吸取初步过滤后的水样,连接到已经装入玻璃纤维膜的可换膜针式过滤器上,人工匀速挤压注射器使水样通过可换膜针式过滤器后排出,将更换的滤膜放入装有无水酒精的离心管中于低温下保存。该方法能够在现场对溶洞水环境DNA样品进行采集,解决了将水样远距离运输到实验室真空抽滤存在的DNA会降解、交叉污染等问题,且该采集方法成本低、操作简便、采集的样品准确性高。采集的样品准确性高。采集的样品准确性高。

【技术实现步骤摘要】
一种溶洞水环境DNA样品的现场采集方法


[0001]本专利技术涉及一种水环境DNA样品的采集方法,特别涉及一种溶洞水环境DNA样品的现场采集方法。

技术介绍

[0002]广西溶洞鱼类生物多样性非常丰富,是全球洞穴鱼类研究的热点区域之一。传统溶洞鱼类多样性的研究方法主要靠网具捕捞、垂钓、电击等采集方法,由于地下溶洞的复杂性、危险性,采集难度极大,耗时费力,相关研究工作进展缓慢,物种保护工作形势严峻。近年来,环境DNA技术因高灵敏、效率高、低成本等特点已成为生物多样性研究的重要工具,应用该项技术可加快溶洞鱼类多样性的研究进程,满足当前生物多样性资源可持续利用的重大科学需求。由于目标检测点水样中鱼类DNA容易受到外界和人为不正当操作影响,造成检测数据假阳性,引起误判,因此在采样和过滤环节,应当尽可能避免非采样点的外源DNA污染。目前水环境DNA采样都是通过在采样点收集水样后,通过药物固定或者低温运输到实验室中进行真空抽滤富集DNA,该方法采样存在较多不可预知的污染和DNA降解风险,例如采样和过滤器具反复使用可能会有外源DNA残留,产生交叉污染,水样运本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种溶洞水环境DNA样品的现场采集方法,其特征在于:包括以下步骤:第一步,在采样前,采样人员需佩戴一次性乳胶手套,同时将贝勒管和一次性塑料盆用采样点水样进行润洗1

4次;然后剪取足够长的牵引绳,两端分别系于贝勒管上方和牵引杆,通过牵引杆牵引贝勒管到溶洞水环境DNA检测点进行采水,采到的水样放入一次性塑料盆中待用;第二步,将第一步采集获得的溶洞环境DNA水样初步过滤,去除大颗粒杂质,具体操作为:将医用纱布叠2

4层垫入纸漏斗内侧,将溶洞环境水样倒入到纸漏斗中,并用一次性塑料杯接过滤后水样1

2L备用;第三步,取一次性注射器,吸取400

500mL第二步初步过滤后的水样,连接到已经装入玻璃纤维膜的可换膜针式过滤器上,人工匀速挤压注射...

【专利技术属性】
技术研发人员:罗福广文衍红王志强黄杰石国凡杨军
申请(专利权)人:柳州市渔业技术推广站
类型:发明
国别省市:

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