包括免疫原性肽组合的药物组合物制造技术

本发明专利技术涉及包括免疫原性肽组合的药物组合物，包括长度为25至60个氨基酸的免疫原性肽的组合，每个与碳氟化合物载体共价连接用于所述肽的细胞内递送，其中所述碳氟化合物载体包括包含3至30个碳原子的链，其中至少一个被氟、氯、溴或碘取代，其中所述组合物包括包含SEQ IDNOs：24、SEQ ID NOs：25、SEQ ID NOs：28、SEQ ID NOs：33、SEQ IDNOs：34、SEQ ID NOs：36、SEQ ID NOs：37、SEQ ID NOs：38和SEQ IDNOs：222所示序列的肽。示序列的肽。

【技术实现步骤摘要】
包括免疫原性肽组合的药物组合物
[0001]本申请是申请日为2013年12月20日，申请号为201380067602.2，专利技术名称为“抗乙型肝炎病毒的疫苗”的中国专利技术专利申请的分案申请。


[0002]本专利技术涉及免疫原性HBV肽组合物以及使用该组合物来治疗HBV。

技术介绍

[0003]乙型肝炎病毒(HBV)感染是欧洲和全世界的肝脏相关的发病率和死亡率的一个主因。估计每年有650000个个体死于肝功能衰竭或肝细胞癌。尽管疫苗接种计划已经在许多国家使得HBV感染开始减少，但是由于来自流行地区的HBV携带者的移民，慢性乙型肝炎(CHB)在欧洲是一个迅速增长的问题。
[0004]从概念的观点来看，慢性HBV感染可分为三个阶段(或免疫应答类型)：免疫耐受、免疫活性和非活性慢性携带者。这些不同的慢性感染的阶段对应于特性血清学图案并且与患者对HBV的免疫应答相关。通常，患有持续免疫活性慢性HBV感染的患者接受HBV治疗。
[0005]有限的治疗方案可用于慢性乙型肝炎(CHB)。利用抗病毒药物(诸如，α
‑
干扰素和核苷/核苷酸类似物(NUC))来抑制病毒复制是降低慢性HBV感染的发病率和死亡率的唯一途径，其终极目标是改善生存。然而，血清HBsAg的损失和抗HBs抗体的发展(血清转化)是对HBV感染的成功免疫应答的标志和临床治愈的最接近结果。仅α
‑
干扰素已经能够诱导显著的HBsAg损失，但只对于相对较低比例(<10％)的患者是这样的。干扰素具有高成本、低耐受性，并且一些HBV基因型仍然很差地应答治疗。
[0006]因此，NUC仍然是主要的治疗策略，其中在欧洲五个NUC被批准治疗CHB。最有效的和优选的药物(替诺福韦和恩替卡韦)具有非常有利的副作用分布并且能够在几乎所有的患者中诱导HBV DNA抑制。然而，在大多数国家和国际准则下，对于大多数患者需要终生治疗。即使在NUC治疗的几年之后，只有极少数的HBeAg阳性患者，并且没有HBeAg阴性患者，能够清除HBsAg。NUC治疗的长期安全性目前是未知的。因此，迫切需要能够及时停止NUC疗法的概念。
[0007]治疗性疫苗接种是对于乙肝的一种有前途的干预，以此来诱导对于疾病的免疫控制。T细胞应答已被证明对于急性HBV感染的清除是至关重要的。然而，即使是在有效的抗病毒治疗下，基于HBsAg的治疗性HBV疫苗尚未能示出出益处，这是因为来自高水平的循环HBsAg的被诱导的免疫耐受性。

技术实现思路

[0008]本专利技术人已经识别出HBV蛋白质组的一些区域，这些区域在不同的HBV基因型之间具有高度保守性，并且与HBV蛋白的其它类似保守区域相比，具有预料不到的更好的免疫原性性质。特别地，专利技术人使用体外测定出乎意料地表明，HBV聚合酶和HBV核心蛋白的特定结构域内的肽序列能够在来自感染了不同HBV基因型的慢性感染HBV的患者和/或来自不同种
族的慢性感染HBV患者的PBMC中引发应答。特别地，本专利技术人已经令人惊讶地识别了HBV聚合酶的末端结构域中的免疫显性区。
[0009]因此，本专利技术提供了一种包含长度为15至60个氨基酸的至少两种肽的药物组合物，所述肽选自包括SEQ ID NOs.1
‑
4中所示的序列之一或与SEQ ID NOs.1
‑
4中所示的序列之一具有至少80％同一性的序列的至少15个连续氨基酸的序列的肽(或者所述肽选自包括SEQ ID NOs.1
‑
4中所示的序列之一的至少15个连续氨基酸的序列或与SEQ ID NOs.1
‑
4中所示的序列之一具有至少80％同一性的序列的肽)，其中，每个肽包含至少一个CD8+T细胞表位和/或至少一个CD4+T细胞表位，并且其中，每个肽在体外测定中在来自至少一种慢性感染HBV个体的外周血单核细胞(PBMC)中引发应答。
[0010]所述组合物可以包括包含SEQ ID NOs.1
‑
3中所示的序列之一的至少15个氨基酸的至少一个肽以及包含在SEQ ID NO：4中所示序列的至少15个氨基酸的至少一个肽。
[0011]所述肽中的至少一个可以包括SEQ ID NOs.24
‑
33之一中所示的序列，或与SEQ ID NOs.24
‑
33中所示序列之一具有至少80％同一性的序列。所述肽中的一个或多个可以包括位于N
‑
末端和/或C
‑
末端的一个或多个氨基酸以增加净正电荷和/或减少肽的疏水性。因此，该组合物可以包括包含SEQ ID NOs：34至38之一中所示的序列的肽。
[0012]该组合物可以进一步包含衍生自HBV表面蛋白的至少一个肽。衍生自HBV表面蛋白的肽的长度可以是15至60个氨基酸，并且包括SEQ ID NO：55中所示的序列的至少15个连续氨基酸的序列或与SEQ ID NO：55中所示序列的至少15个连续氨基酸具有至少80％同一性的序列，其中，所述肽包含至少一个CD8+T细胞表位和/或至少一个CD4+T细胞表位，并且在体外测定中在来自至少一个慢性感染HBV的个体的外周血单核细胞(PBMC)中引起应答。
[0013]组合物，其中所述组合物能够在来自不同种族的至少两个个体以及来自感染有不同HBV基因型的两个个体的PBMC中引发免疫应答。
[0014]该组合物能够在以下中引发免疫应答：(a)在来自感染HBV基因型A的个体、感染HBV基因型B的个体、感染HBV基因型C的个体、和感染HBV基因型D的个体中的两个、三个或全部的PBMC中；和/或在来自感染HBV的东方或印度个体、感染HBV的高加索人(白人)个体、和感染HBV的非洲或阿拉伯个体中的两个、三个或全部的PBMC中。
[0015]在本专利技术的组合物中的肽可以连接至碳氟化合物载体。该组合物可以进一步包括HBc、HBe或HBs抗原和/或佐剂。
[0016]本专利技术提供了本专利技术的用于HBV感染的治疗或预防的组合物，特别是用于HBeAg阴性患者或HBeAg阳性患者的治疗。本专利技术的组合物可与以下组合使用：(i)α干扰素和/或核苷/核苷酸类似物(NUC)；和/或(ii)抗PD1阻断抗体、抗CTLA4阻断抗体、抗PD1L阻断抗体、抗LAG3阻断抗体、抗TIM3阻断抗体和/或环磷酰胺。利用该组合物的治疗可导致HBsAg损失或HBsAg血清转换。
[0017]本专利技术还提供了本专利技术的用于终末期肝病或肝细胞癌的治疗或预防或用于丁型肝炎病毒(HDV)感染的治疗或预防的组合物。
[0018]一种治疗或预防HBV感染的方法，该方法包括给予需要其的受试者治疗有效量的根据本专利技术的组合物，并且还提供了根据本专利技术的组合物在制备用于治疗或预防HBV的药物中的应用。
[0019]此外，本专利技术提供了长度为15到60个氨基酸的肽，包含SED ID NOs：1
‑
4中任一个
中所示的序列，或与在SED ID NOs本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种药物组合物，包括长度为25至60个氨基酸的免疫原性肽的组合，每个与碳氟化合物载体共价连接用于所述肽的细胞内递送，其中所述碳氟载体包括包含3至30个碳原子的链，其中至少一个被氟、氯、溴或碘取代，其中所述组合物包括：包括SEQ ID NO:24中所示的氨基酸序列的第一肽，包括SEQ ID NO:25中所示的氨基酸序列的第二肽，包括SEQ ID NO:28中所示的氨基酸序列的第三肽，包括SEQ ID NO:33中所示的氨基酸序列的第四肽，包括SEQ ID NO:34中所示的氨基酸序列的第五肽，包括SEQ ID NO:36中所示的氨基酸序列的第六肽，包括SEQ ID NO:37中所示的氨基酸序列的第七肽，包括SEQ ID NO:38中所示的氨基酸序列的第八肽，以及包括SEQ ID NO:222中所示氨基酸序列的第九肽。2.根据权利要求1所述的组合物，其进一步包括佐剂。3.根据权利要求1所述的组合物，其中与所述碳氟化合物载体连接的所述肽包括结构C
m
F
n
‑
C
y
H
x
‑
(Sp)
‑
R，其中m＝3至30，n<2m+1，y＝0至15，x<2y，(m+y)＝3
‑
30，并且Sp为可选的间隔部分，并且R为所述肽。4.根据权利要求1所述的组合物，其中所述肽的组合以约0.1mM至约10mM的浓度存在于溶液中。5.根据权利要求1所述的组合物，其中所述组合物为干燥形式。6.根据权利要求1至5中任一项所述的组合物，用于治疗或预防HBV感染。7.一种包括长度为25至6...

【专利技术属性】
技术研发人员：伯特兰，
申请(专利权)人：奥提姆尼英国有限公司，
类型：发明
国别省市：