一种蛋白质亲和纯化方法技术

本公开中提供了一种蛋白质亲和纯化方法。具体而言，本公开提供了包括如下步骤的蛋白质亲和纯化方法：(a)用洗脱前处理缓冲液淋洗上样后的亲和层析柱；以及(b)用洗脱缓冲液洗脱目标蛋白；其中，所述洗脱前处理缓冲液的缓冲能力高于所述洗脱缓冲液的缓冲能力。本公开还提供了与该方法对应的产品。采用本公开的方法和产品可提高洗脱产品的pH环境，有效提高下游工艺的稳健性且易于放大，从而可广泛应用于蛋白质(例如抗体类)药物的纯化。白质(例如抗体类)药物的纯化。

【技术实现步骤摘要】
一种蛋白质亲和纯化方法


[0001]本专利技术属于蛋白质纯化和分离
具体而言，本专利技术涉及一种新型的蛋白质亲和纯化工艺，其尤为适于对低pH敏感的蛋白质的纯化。

技术介绍

[0002]抗体类药物中所存在的多聚体主要产生于细胞培养、蛋白质纯化以及制剂储存过程中。这些存在于抗体类药物中的多聚体在抗体类药物施用时有可能会引起受体的免疫原反应。由此，多聚体被相关监管机构乃至整个抗体类药物行业公认为抗体类药物产品的一个重要质量指标。
[0003]由于下游分离纯化工艺对于去除和控制多聚体含量具有更高的灵活性和可操作空间，使得其成为去除多聚体的主力。目前的下游纯化工艺主要依靠精纯步骤来去除多聚体，例如包括离子(阴离子或阳离子)交换层析、疏水层析等方式。
[0004]在常规操作中，亲和层析的主要功能是从发酵液中直接捕获产品，而通常不具备去除多聚体的能力。不仅如此，亲和层析中剧烈的低pH洗脱条件还有可能诱导形成多聚体，且这一影响在大规模生产中可能被放大。
[0005]目前，抗体类药物(包括单抗、FC融合蛋白和双抗蛋白类药物)纯化过本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种蛋白质亲和纯化方法，所述方法包括如下步骤：(a)用洗脱前处理缓冲液淋洗上样后的亲和层析柱；以及(b)用洗脱缓冲液洗脱目标蛋白；其中，所述洗脱前处理缓冲液的缓冲能力高于所述洗脱缓冲液的缓冲能力。2.如权利要求1所述的蛋白质亲和纯化方法，其中，所述蛋白质亲和纯化选自：Protein A亲和层析、Protein G亲和层析和Protein A/G亲和层析。3.如权利要求1所述的蛋白质亲和纯化方法，其中，所述目标蛋白为包含Fc区段的蛋白质分子，例如所述目标蛋白为：抗体，如多克隆抗体、单克隆抗体、双特异性抗体、多特异性抗体或Fc融合蛋白等；和/或所述目标蛋白为对低pH敏感和/或在常规低pH洗脱中易于产生多聚体的蛋白质。4.如权利要求1所述的蛋白质亲和纯化方法，其中，所述洗脱前处理缓冲液的pH范围为5.5
‑
8.5，例如5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5，优选7.0
‑
7.5；和/或所述洗脱缓冲液的pH范围为3.0
‑
4.5，例如3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4.0、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5；和/或所述洗脱前处理缓冲液的pH值比所述洗脱缓冲液的pH值高2.0～4.5，例如高2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4.0、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5。5.如权利要求1所述的蛋白质亲和纯化方法，其中，所述洗脱前处理缓冲液选自：Bis
‑
Tris缓冲体系、Tris缓冲体系(如Tris
‑
HCl缓冲体系)、MES缓冲体系、醋酸
‑
醋酸钠缓冲体系、醋酸钠缓冲体系、组氨酸缓冲体系、柠檬酸缓冲体系、磷酸缓冲体系，其中，当洗脱缓冲液为组氨酸缓冲体系时，所述洗脱前处理缓冲液不是组氨酸缓冲体系或具有与洗脱缓冲液不同的pH。6.如权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：林森珠，杨富豪，费丽，林世文，
申请(专利权)人：上海药明生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：