目的蛋白纯化方法技术

本发明专利技术提供了一种目的蛋白纯化方法。该方法包括：利用洗脱缓冲液对亲和层析柱进行洗脱处理，以便获得含有目的蛋白的洗脱液，所述亲和层析柱加载有待测样品，所述待测样品中含有待纯化目的蛋白，其中，所述洗脱缓冲液中含有醇类物质。利用本发明专利技术提供的方法进行目的蛋白亲和层析，可以显著提高洗脱蛋白质的纯度，抑制洗脱过程中多聚体的产生，提高蛋白回收率。提高蛋白回收率。

【技术实现步骤摘要】
目的蛋白纯化方法


[0001]本专利技术涉及生物
，具体地，本专利技术涉及一种目的蛋白纯化方法。

技术介绍

[0002]蛋白质亲和层析技术适用于理化性质差异较小而难分离的蛋白质，亲和层析利用固相介质中的配基与混合生物分子之间亲和能力不同而进行分离，当蛋白混合液通过层析柱时，与配基能够特异性结合的蛋白质就会被吸附固定在层析柱中，这种结合在一定条件下是可逆的，待亲和层析结束后，可被洗脱缓冲液洗脱，而其他对配基不具有特异性结合能力的蛋白在上样与洗涤过程中即通过柱体而流穿，不能结合于柱体上。蛋白质亲和层析技术通过目标蛋白质与配体间特异性亲和结合而达到分离纯化的目的，具有生物专一性的特点。
[0003]但有些类型的蛋白尤其是Fc融合蛋白在酸性溶液中进行蛋白亲和层析纯化时，容易形成聚集体甚至形成可见的沉淀，而造成纯化后获得蛋白的纯度和回收率低。
[0004]因此，利用蛋白亲和层析技术进行蛋白纯化的方法仍需要进一步开发和改进。

技术实现思路

[0005]本专利技术旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此，本本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种目的蛋白纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：利用洗脱缓冲液对亲和层析柱进行洗脱处理，以便获得含有目的蛋白的洗脱液，所述亲和层析柱加载有待测样品，所述待测样品中含有待纯化目的蛋白，其中，所述洗脱缓冲液中含有醇类物质。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述醇类物质包括选自甘露醇、木糖醇和乙二醇的至少之一。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述醇类物质在所述洗脱缓冲液中的体积分数为1％-16％，优选地，所述醇类物质在所述洗脱缓冲液中的体积分数为10％。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述洗脱缓冲液包括选自柠檬酸缓冲液、乙酸盐缓冲液和甘氨酸缓冲液的至少一种。5.根据权利要求2～5任一项所述的方法，其特征在于，所述洗脱缓冲液的pH为3-4。6.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述洗脱...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵雪冰，王妮，
申请(专利权)人：广州汉腾生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：