【技术实现步骤摘要】
本公开涉及蛋白质纯化的方法,具体涉及采用阳离子交换层析纯化igm的方法,igm的纯化方法,以及通过该方法得到的igm。
技术介绍
1、免疫球蛋白m(igm)是分子量最大的免疫球蛋白,主要由脾脏和淋巴结中的浆细胞分泌合成。igm通常是在血液和淋巴液中首先响应感染的一类抗体,并能够触发其他免疫系统细胞破坏外来物质。
2、因为igm抗体较大的分子量和复杂程度,一般认为该类型的抗体是比较难以大规模生产的。但是随着细胞系的改进,生产培养基的改良,生产过程的控制使得大规模生产igm抗体成为可能。同时,igm的一些特性也限制了它在标准抗体净化工具中使用,igm抗体溶解性范围较窄,为抗体的纯化带来了比较大的困难。
3、在传统的igm纯化中需要使用羟基磷灰石柱层析法。羟基磷灰石是一种环境友好的含羟基和磷的无机物质,具有优良的生物相容性和生物活性。但是,羟基磷灰石因其价格昂贵、可用循环数少、对于缓冲液的ph要求严苛等缺陷而不适合规模化生产。另外,在igm纯化中常规采用的阳离子层析捕获收率不足,也限制了igm纯化的产量。
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【技术保护点】
1.一种使用阳离子交换层析纯化目的蛋白IgM的方法,其特征在于,所述阳离子交换层析同时采用电导梯度和pH梯度进行洗脱;
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述目的蛋白IgM选自IgM五聚体或IgM六聚体。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述阳离子交换层析使用电导率8.0至100mS/cm,优选8.0至30mS/cm,更优选8.0至25mS/cm进行线性洗脱,和/或
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述阳离子交换层析的洗脱的起始pH为3.0~5.0,和/或所述阳离子交换层析的洗脱的终pH为6.0~10.0
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【技术特征摘要】
1.一种使用阳离子交换层析纯化目的蛋白igm的方法,其特征在于,所述阳离子交换层析同时采用电导梯度和ph梯度进行洗脱;
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述目的蛋白igm选自igm五聚体或igm六聚体。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述阳离子交换层析使用电导率8.0至100ms/cm,优选8.0至30ms/cm,更优选8.0至25ms/cm进行线性洗脱,和/或
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述阳离子交换层析的洗脱的起始ph为3.0~5.0,和/或所述阳离子交换层析的洗脱的终ph为6.0~10.0。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述阳离子交换层析的平衡缓冲液和/或洗脱缓冲液包含钠盐、钾盐、铵盐、钙盐或其组合,优选包含...
【专利技术属性】
技术研发人员:余剑平,张芷苓,
申请(专利权)人:广州汉腾生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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