一种适用于96通道qPCR仪的ARGs绝对定量试剂盒制造技术

本实用新型专利技术涉及生命科学技术领域，且公开了一种适用于96通道qPCR仪的ARGs绝对定量试剂盒，包括包装盒，所述包装盒内部中心处左右两侧均固定连接有隔板，两个所述隔板之间设置有放置槽二，本试剂盒将qPCR试剂及引物预加在预填96孔板内，用户仅需将预填96孔板短暂离心，然后加入样本即可进行qPCR反应，减少人为操作误差，保证结果的稳定性，且本试剂盒将MCR

【技术实现步骤摘要】
一种适用于96通道qPCR仪的ARGs绝对定量试剂盒


[0001]本技术涉及生命科学
，具体为一种适用于96通道qPCR仪的ARGs绝对定量试剂盒。

技术介绍

[0002]自20世纪20年代开始，大量天然抗生物包括青霉素、链霉素等相继被发现，由此人类打开了抗生素时代，在与细菌的对抗中占有绝对优势。但随着对抗生素使用的过度依赖，细菌抗药问题日益凸显。抗生素的滥用对随机变异的耐药性细菌被筛选并富集等，使得一代代抗生素药物威力减弱、甚至失效。人类与细菌的战争围绕"抗药性"问题逐渐转入"持久战"的局面。多粘菌素(Polymyxins)是多粘杆菌培养液中提得的一组多肽类抗生素，有5种成分(A，B，C，D，E)。临床常用的是多粘菌素B(P0lymyXinB)和多粘菌素 E(C0liSlin，抗敌素)。多粘菌素是一种包含药用粘菌素并在畜牧业中广泛使用的抗生素。多粘菌素被认为是人类抗击细菌的最后防线。
[0003]目前，研究人员发现一些动物和生肉中采集的大肠杆菌样本内存在一种新型的抗生素耐药基因MCR
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1基因；另外，在住院患者的大肠杆菌和肺炎克氏杆菌样本中也发现了MCR
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1基因。MCR
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1基因以质粒为载体存在于细菌中，能够以水平基因转移方式在不同菌株间进行遗传物质的交换。这种转移模式打破亲缘关系的界限，能够在不同细菌之间传播，且速度快。携带有NDM
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1的细菌几乎能够抵抗所有的抗生素，包括"杀手锎"碳青霉烯类。MCR
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1基因的发现，预示着抗生素最后一道防线——多粘菌素已然遭到威胁。
[0004]因此，对于MCR
‑
1基因的检测对于监控耐药细菌爆发，指导患者感染用药具有重要作用。
[0005]但是，目前关于MCR
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1基因的研究还仅限于实验室科研阶段，多数实验室设计有自己的引物，不同实验室由于引物的差异，从而导致监测结果差异较大，且监测需求日益增大以及检测结果不统一，因此，需要一种基于qPCR 技术，依托于96通道qPCR的MCR
‑
1绝对定量的检测试剂盒。

技术实现思路

[0006](一)解决的技术问题
[0007]针对现有技术的不足，本技术提供了一种适用于96通道qPCR仪的 ARGs绝对定量试剂盒，解决了上述
技术介绍
中的问题。
[0008](二)技术方案
[0009]为实现上述目的，本技术提供如下技术方案：一种适用于96通道qPCR 仪的ARGs绝对定量试剂盒，包括包装盒，所述包装盒内部中心处左右两侧均固定连接有隔板，两个所述隔板之间设置有放置槽二，所述包装盒内部左侧与左侧所述隔板之间设置有放置槽一，所述包装盒内部右侧与右侧所述隔板之间设置有放置槽三，所述放置槽一内部设置有不透光真空包装袋，所述不透光真空包装袋内部设置有预填96孔板，所述预填96孔板顶端
设置有封膜板，所述放置槽二8内部放置有qPCR光学封板膜，所述放置槽三内部放置有透光真空包装袋，所述透光真空包装袋内部放置有预填8连管。
[0010]优选的，所述预填96孔板内部开设有四个孔位。
[0011]优选的，所述预填8连管内部设置有八个试管。
[0012]优选的，所述包装盒顶端左右两侧均转动连接有盒盖。
[0013]优选的，两个所述盒盖顶端均固定连接有把手。
[0014](三)有益效果
[0015]本技术提供了一种适用于96通道qPCR仪的ARGs绝对定量试剂盒，具备以下有益效果：
[0016](1)、本试剂盒将qPCR试剂及引物预加在预填96孔板内，用户仅需将预填96孔板短暂离心，然后加入样本即可进行qPCR反应，减少人为操作误差，保证结果的稳定性。
[0017](2)、标准质粒稀释也是引起不同监测单位检测结果不一致的主要原因，本试剂盒将MCR
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1标准质粒提前按照1/10梯度稀释好，然后装入预填8连管中，用户只需要用排枪将标准品加入预填96孔板内，即可完成标准曲线的绘制。
[0018](3)、MCR
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1引物经过反复qPCR验证，以及扩增片段的一代测序，确保引物没有非特异性扩增以和引物二聚体以及扩增片段的准确性。
附图说明
[0019]图1为本技术结构示意图；
[0020]图2为本技术立体结构示意图。
[0021]图中：1、包装盒；2、放置槽一；3、不透光真空包装袋；4、预填96孔板；5、孔位；6、封板膜；7、隔板；8、放置槽二；9、放置槽三；10、透光真空包装袋；11、试管；12、预填8连管；13、qPCR光学封板膜；14、盒盖； 15、把手。
具体实施方式
[0022]下面将结合本技术实施例中的附图，对本技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本技术保护的范围。
[0023]如图1
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所示，本技术提供一种技术方案：一种适用于96通道qPCR 仪的ARGs绝对定量试剂盒，包括包装盒1，包装盒1内部中心处左右两侧均固定连接有隔板7，两个隔板7之间设置有放置槽二8，包装盒1内部左侧与左侧隔板7之间设置有放置槽一2，包装盒1内部右侧与右侧隔板7之间设置有放置槽三9，放置槽一2内部设置有不透光真空包装袋3，不透光真空包装袋3内部设置有预填96孔板4，预填96孔板4顶端设置有封膜板6，放置槽二8内部放置有qPCR光学封板膜13，放置槽三9内部放置有透光真空包装袋 10，透光真空包装袋10内部放置有预填8连管12，先用对应的核酸体积提取试剂盒提取样本(水样、土壤或粪便等)中的核酸，然后通过Qbuit进行浓度测定，Qbuit浓度测定的原理采用荧光定量结合双链DNA的方式进行浓度测定，相比于分光光度计法的仪器，更能真实的反映DNA浓度结果，浓度检测结束后，进行样本浓度的均一化，用ddH20将所有样本浓度稀释至10ng/μl，低于10ng/μl
的样本需要加大提取样本量重新提取，等到稀释结束后打开超净工作台，打开紫外灯，灭菌30分钟，关闭紫外灯，然后打开包装盒1，将预埋96孔板4的不透光真空包装袋3和预埋8连管12的透光真空包装袋10 打开，并在板式离心机以及排管离心机上短暂离心，将管壁上的液体离心至管底，再然后在超净工作台内打开预埋96孔板4的封板膜6，再打开预填8 连管12试管11的管盖，紧接着先用排枪将预填8连管12内标准品和阴性对照(ddH20)吸取2μl加入预埋96孔板4的1、2、3列，包装每个点三个技术重复，然后将上述均一化后的样本按照实验设计加入到对应孔内，包装每个样本有三个技术重复，样本加完后，将包装盒1内的qPCR光学封板膜13 取出进行封板，再然后短暂漩涡并离心，在封本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种适用于96通道qPCR仪的ARGs绝对定量试剂盒，包括包装盒(1)，其特征在于：所述包装盒(1)内部中心处左右两侧均固定连接有隔板(7)，两个所述隔板(7)之间设置有放置槽二(8)，所述包装盒(1)内部左侧与左侧所述隔板(7)之间设置有放置槽一(2)，所述包装盒(1)内部右侧与右侧所述隔板(7)之间设置有放置槽三(9)，所述放置槽一(2)内部设置有不透光真空包装袋(3)，所述不透光真空包装袋(3)内部设置有预填96孔板(4)，所述预填96孔板(4)顶端设置有封膜板(6)，所述放置槽二(8)内部放置有qPCR光学封板膜(13)，所述放置槽三(9)内部放置有透光真空包装袋(10)，所述透光真空包装袋(...

【专利技术属性】
技术研发人员：程亚双，李西清，路静，
申请(专利权)人：合肥元哉生物科技有限公司，
类型：新型
国别省市：