一种阿基瑞林的中间体组合物及其制备方法与应用技术

本申请公开了一种阿基瑞林的中间体组合物及其制备方法与应用。所述中间体组合物包括Ac

【技术实现步骤摘要】
一种阿基瑞林的中间体组合物及其制备方法与应用


[0001]本申请涉及一种阿基瑞林的中间体组合物及其制备方法与应用，属于多肽合成


技术介绍

[0002]目前阿基瑞林的固相合成方法公开报道的有以下几种方法：
[0003]方法一：在CN106749529A中，技术路线图如1所示，此路线简洁方便、树脂价格便宜，固相和液相结合的方法新颖，但上样量比传统AM树脂少，并且CTC树脂存在着对温度敏感、容易掉肽的问题，对合成效率和收率造成影响，且需要进行两次切割，气味大，容易污染环境。固相固有的上载量小、氨基酸投入需要过量、需大量溶剂洗涤且无法回收等问题也会导致生产成本较高。与此方法类似有专利CN110684077和CN111620928。所不同的是，专利CN110684077采用CTC树脂全保护切割后沉淀过滤烘干，生成OSu活化酯，反应6
‑
8小时后加入氨水生成酰胺，过柱纯化后再切割脱保护纯化得到产品。专利CN111620928也是采用CTC树脂全保护切割后沉淀过滤烘干，液相法合成全保护酰胺，用2,4
‑
二甲氧基苄胺进行二次酰胺化反应除去少量未反应完全的保护肽羧酸，最后脱保护纯化得到产品，与CN110684077比，后处理结晶工艺优化，原料杂质少，纯化压力小。这两个专利中样品载样量大，树脂便宜，酰胺化反应方便，切割方案温和无气味，但是也存在着多次切割沉淀的问题，Arg羧基端活化效率难以保证，酰胺化反应收率不高，全保护肽羧酸和全保护酰胺分子量接近，出峰时间也近，给纯化带来困难，不利于工业化生产。
[0004]方法二：在CN103694316B中，技术路线图如2所示，此路线简洁方便，但此方法放大生产对设备要求高，废液量大，生产成本都需要2
‑
3倍量，原料经济性差。Ac
‑
Glu(O
t
Bu)
‑
OH价格昂贵，此氨基酸为非氧碳基类保护基，存在很大的消旋风险，此外成本问题值得考虑，大生产不合适。与此类似的方法有专利CN106632609，该专利采用Fmoc
‑
Arg(Pbf)
‑
Arg(Pbf)
‑
OH片段与Rink AM树脂连接，但是Fmoc
‑
Arg(Pbf)
‑
Arg(Pbf)
‑
OH片段在多肽合成中属于困难序列，并且原料液相合成难度大，纯度不能保证，不适用于大规模生产。
[0005]目前阿基瑞林的液相合成方法公开报道的有一种方法：在专利CN103613642B中，技术路线如图3所示，相对固相合成法，片段液相合成法比较适合放大规模化生产，原料浪费少，但是此路线中，采用了活性酯OSu的方法，此方法在合成多肽上存在多个不确定风险，消旋是其中最大的风险，还有中间体储存问题，中间体原料降解或者未反应完的原料导致中间体不干净的副产物等，在上述的OSu酯中，均不是氧羰基保护的氨基酸，消旋杂质无法进行有效控制。并且，在各个步骤中所形成的中间体中，对产品的溶解性都存在很大的问题，不适合放大生产。在需要合成的多个活性中间体中，如AcOSu，Ac
‑
Glu(O
t
Bu)
‑
OSu，Ac
‑
Glu(O
t
Bu)
‑
Glu(O
t
Bu)
‑
OSu，Fmoc
‑
Gln(Trt)
‑
OSu中间体溶液活性高不容易保存；H
‑
Arg
‑
NH2.2HCl价格高，水溶性还特别好，不利于工业化大生产。在OSu的反应中，OSu酯的水解是一个不可避免的副反应，工艺中产生的中间体降解杂质特别多，很难获得干净的产品。

技术实现思路

[0006]根据本申请的一个方面，提供一种阿基瑞林的中间体组合物，所述阿基瑞林的中间体组合物用于阿基瑞林的合成，可以避免使用活性酯中间体，以及避免中间体保存的稳定性问题。
[0007]一种阿基瑞林的中间体组合物，所述中间体组合物包括Ac
‑
Glu(R1)
‑
Glu(R2)
‑
Met
‑
OH和H
‑
Gln(R3)
‑
Arg(R4)
‑
Arg(R5)
‑
NH2；
[0008]其中，R1、R2为Glu的侧链保护基团，独立地选自Glu侧链保护基团中的任一种；
[0009]R3为Gln的侧链保护基团，选自Gln侧链保护基团中的任一种；
[0010]R4、R5为Arg的侧链保护基团，独立地选自Arg侧链保护基团中的任一种。
[0011]可选地，所述Glu侧链保护基团选自
t
Bu、TBS、Dpm、苄基、甲氧基苄基中的任一种；
[0012]所述Gln侧链保护基团选自Trt、TMB、DM中的任一种；
[0013]所述Arg侧链保护基团选自Pbf、Pmc、Mtr中的任一种；
[0014]可选地，所述Ac
‑
Glu(R1)
‑
Glu(R2)
‑
Met
‑
OH和所述
[0015]H
‑
Gln(R3)
‑
Arg(R4)
‑
Arg(R5)
‑
NH2的质量比为400～800∶800～1500。
[0016]可选地，所述中间体组合物包括片段Ac
‑
Glu(O
t
Bu)
‑
Glu(O
t
Bu)
‑
Met
‑
OH与片段H
‑
Gln(Trt)
‑
Arg(Pbf)
‑
Arg(Pbf)
‑
NH2。
[0017]根据本申请的另一方面，提供上述任一项所述的中间体组合物的制备方法，所述H
‑
Gln(R3)
‑
Arg(R4)
‑
Arg(R5)
‑
NH2的制备包括：
[0018](S1)将Ri
‑
Arg(R5)
‑
OH和化合物i缩合i得到中间体i；
[0019]所述化合物i选自氨、铵盐中的至少一种；
[0020](S2)将中间体i脱保护基团Ri，和Rii
‑
Arg(R4)
‑
OH缩合ii得到中间体ii；
[0021](S3)将所述中间体ii脱保护基团Rii，和Riii
‑
Gln(R3)
‑
OH缩合iii得到中间体iii；
[0022](S4)将中间体iii脱保护基团Riii，得到所述本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种阿基瑞林的中间体组合物，其特征在于，所述中间体组合物包括Ac
‑
Glu(R1)
‑
Glu(R2)
‑
Met
‑
OH和H
‑
Gln(R3)
‑
Arg(R4)
‑
Arg(R5)
‑
NH2；其中，R1、R2为Glu的侧链保护基团，独立地选自Glu侧链保护基团中的任一种；R3为Gln的侧链保护基团，选自Gln侧链保护基团中的任一种；R4、R5为Arg的侧链保护基团，独立地选自Arg侧链保护基团中的任一种。2.根据权利要求1所述的中间体组合物，其特征在于，所述Glu侧链保护基团选自
t
Bu、TBS、Dpm、苄基、甲氧基苄基中的任一种；所述Gln侧链保护基团选自Trt、TMB、DM中的任一种；所述Arg侧链保护基团选自Pbf、Pmc、Mtr中的任一种；优选地，所述Ac
‑
Glu(R1)
‑
Glu(R2)
‑
Met
‑
OH和所述H
‑
Gln(R3)
‑
Arg(R4)
‑
Arg(R5)
‑
NH2的质量比为400～800∶800～1500。3.权利要求1～2任一项所述的中间体组合物的制备方法，其特征在于，所述H
‑
Gln(R3)
‑
Arg(R4)
‑
Arg(R5)
‑
NH2的制备包括：(S1)将Ri
‑
Arg(R5)
‑
OH和化合物i缩合i得到中间体i；所述化合物i选自氨、铵盐中的至少一种；(S2)将中间体i脱保护基团Ri，和Rii
‑
Arg(R4)
‑
OH缩合ii得到中间体ii；(S3)将所述中间体ii脱保护基团Rii，和Riii
‑
Gln(R3)
‑
OH缩合iii得到中间体iii；(S4)将中间体iii脱保护基团Riii，得到所述H
‑
Gln(R3)
‑
Arg(R4)
‑
Arg(R5)
‑
NH2；所述Ac
‑
Glu(R1)
‑
Glu(R2)
‑
Met
‑
OH的制备包括：(Sa)将H
‑
Met
‑
R
x
的酸盐和RI
‑
Glu(R2)
‑
OH缩合I，得到中间体I；(Sb)将所述中间体I脱保护基团RI，和RII
‑
Glu(R1)
‑
OH缩合II，得到中间体II；(Sc)将所述中间体II脱保护基团RII，和乙酰化试剂缩合III得到中间体III；(Sd)将所述中间体III脱保护基团R
x
，得到所述Ac
‑
Glu(R1)
‑
Glu(R2)
‑
Met
‑
OH；其中，Ri、Rii、Riii、RI、RII为氨基酸主链氨基的保护基团，所述Ri、Rii、Riii、RI、RII独立地选自氨基保护基团中的任一种；所述R
x
为氨基酸主链羧基的保护基团，选自羧基保护基团中的任一种。4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述铵盐包括氯化铵；所述乙酰化试剂选自醋酸酐、醋酸、乙酰氯中的至少一种；所述H
‑
Met
‑
R
x
的酸盐中的酸选自盐酸、硫酸、甲磺酸、对甲苯磺酸中的任一种；所述氨基保护基团包括Fmoc；所述羧基保护基团包括OMe。5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，(S1)中，所述缩合i包括：含有溶剂i、Ri
‑
Arg(R5)
‑
OH、化合物i、缩合剂i的原料反应i；优选地，所述溶剂i包括DMF；所述缩合剂i选自以下任一项所述的缩合剂组合中的任一种：EDCI/NMM/HOBt、DIC/HOBt、EDCI/HOBt、DCC/HOBt、DIEA/EDCI/HOBt、DIC/HOAt、EDCI/HOAt、DCC/HOAt、DIC/HOOBt、EDCI/HOOBt、DCC/HOOBt、DIC/Oxyma、EDCI/Oxyma、DCC/Oxyma、HBTU/NMM/DIEA；优选地，所述溶剂i、Ri
‑
Arg(R5)
‑
OH、化合物i、缩合剂i的比例为15～25L∶0.5～1.5kg∶100～200g∶800～1800g；
优选地，所述反应i的条件包括：反应时间为10～20h；优选地，(S2)中，所述脱保护基团Ri包括：含有溶剂i
’
、中间体i、脱保护剂i
’
的原料反应i
’
；优选地，所述溶剂i
’
包括DCM；脱保护剂i
’
包括哌啶；优选地，所述溶剂i
’
、中间体i、脱保护剂i
’
的比例为10～30L∶500～1500g∶3～8L；优选地，所述反应i
’
的条件包括：温度为10～40℃，反应时间为0.5～3h；优选地，(S2)中，所述缩合ii包括：含有脱保护基团Ri后的产物、溶剂ii、Rii
‑
Arg(R4)
‑
OH、缩合剂ii的原料反应ii；优选地，所述溶剂ii包括DCM；所述缩合剂ii选自以下任一项所述的缩合剂组合中的任一种：DIC/HOBt、EDCI/HOBt、DCC/HOBt、DIEA/EDCI/HOBt、DIC/HOAt、EDCI/HOAt、DCC/HOAt、DIC/HOOBt、EDCI/HOOBt、DCC/HOOBt、DIC/Oxyma、EDCI/Oxyma、DCC/Oxyma、HBTU/NMM/DIEA；优选地，所述中间体i、溶剂ii、所述Rii
‑
Arg(R4)
‑
OH、和所述缩合剂ii的比例为800～1200g∶10～30L∶800～1200g∶500～1000g；优选地，所述反应ii的条件包括：反应时间为10～20h；优选地，(S3)中，所述脱保护基团Rii包括：含有溶剂ii
’
、中间体ii、脱保护剂ii
’
的原料反应ii
’
；优选地，所述溶剂ii
’
包括DCM；脱保护剂ii
’
包括哌啶；优选地，所述溶剂ii
’
、中间体ii、脱保护剂ii
’
的比例为10～30L∶1000～1800g∶3～8L；优选地，所述反应ii
’
的条件包括：温度为10～40℃，反应时间为0.5～3h；优选地，(S3)中，所述缩合iii包括：含脱保护基团Rii后的产物、溶剂iii、Riii
‑
Gln(R3)
‑
OH、缩合剂iii的原料反应iii；优选地，所述溶剂iii包括DCM；所述缩合剂iii选自以下任一项所述的缩合剂组合中的任一种：DIC/HOBt、EDCI/HOBt、DCC/HOBt、DIEA/EDCI/HOBt、DIC/HOAt、EDCI/HOAt、DCC/HOAt、DIC/HOOBt、EDCI/HOOBt、DCC/HOOBt、DIC/Oxyma、EDCI/Oxyma、DCC/Oxyma、HBTU/NMM/DIEA；优选地，所述中间体ii、溶剂iii、所述Riii
‑
Gln(R3)
‑
OH和所述缩合剂iii的比例为1000～1500g∶10～30L∶500～1000g∶500～100...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘志国，王辉平，刘慧敏，傅小明，周永兵，
申请(专利权)人：浙江湃肽生物有限公司，
类型：发明
国别省市：