一种具有增强基因编辑效率的递送系统及制备方法、应用技术方案

本发明专利技术公开了一种具有增强基因编辑效率的递送系统及制备方法、应用。包括：1)树枝状有机配体的合成；2)有机配体和金属簇构筑金属有机框架递送系统的合成；3)递送系统通过生物矿化方法负载质粒，在细胞层面上，编辑内源性基因(血管内皮生长因子基因，VEGFA和DNA甲基化转移酶基因，DNMT1)，验证递送系统递送质粒和增强基因编辑能力；4)在动物层面上，递送系统递送质粒编辑VEGFA和DNMT1治疗肿瘤。本发明专利技术采用无机有机杂化的策略，基于金属有机框架材料的优点，合成高孔的递送系统材料。金属有机框架高孔的结构能提升递送系统的负载能力；金属有机框架的类酶活性能催化磷脂键的水解，从而增强基因编辑的效果。增强基因编辑的效果。增强基因编辑的效果。

【技术实现步骤摘要】
一种具有增强基因编辑效率的递送系统及制备方法、应用


[0001]本专利技术涉及基因编辑递送系统合成
，特别涉及一种具有增强基因编辑效率的递送系统及制备方法、应用。

技术介绍

[0002]基因编辑是近年来发展起来的高新技术，该技术通过crRNA来定位目标基因，通过内切酶(Cas9或Cpf1等)来水解DNA中的磷脂键，达到编辑DNA的目的。然而，如何将crRNA/Cpf1递送到细胞内，是该技术面临的难题之一；另一方面，该技术目前对内源性基因的编辑效率仍然比较低下。
[0003]已报道能的基因编辑递送系统为脂质体纳米颗粒(X.Gao,Y.Tao,V.Lamas,M.Huang,W.H.Yeh,B.Pan,Y.J.Hu,J.H.Hu,D.B.Thompson,Y.Shu,Nature,2018,553,217.J.A.Zuris,D.B.Thompson,Y.Shu,J.P.Guilinger,J.L.essen,J.H.Hu,M.L.Maeder,J.K.Joung,Z.Y.Chen,D.R.Liu,Nat.Biotechnol.201本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种具有增强基因编辑效率的递送系统的制备方法，其特征在于，包括：步骤1、树枝状有机配体的合成；步骤2、晶态金属有机框架材料合成：将4mL反应瓶中加入2.2mg所述树枝状有机配体,2.6mg ZrCl4,72mg苯甲酸和0.4mL N,N
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二乙基甲酰胺，120℃下反应3天即可得到100μm左右的晶态金属有机框架材料；步骤3、纳米级金属有机框架递送系统NPCN
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8908合成：将所述树枝状有机配体与0.1M的氢氧化钠水溶液反应，生成羧酸盐配体，将反应水溶液蒸干后在乙醇中回流1h，过滤，干燥后，固体粉末溶于水中，向其中加入ZrCl4水溶液和少许研磨的所述晶态金属有机框架材料，室温下静止4天，即可得到170nm左右粉末状固体的纳米级金属有机框架递送系统NPCN
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8908。2.根据权利要求1所述的一种具有增强基因编辑效率的递送系统的制备方法，其特征在于，所述树枝状有机配体合成由四溴代苯基甲烷与甲氧羰基联苯硼酸酯经过Suzuki
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Miyaura偶联反应后，再水解生成配体。3.根据权利要求1所述的一种具有增强基因编辑效率的递送系统的制备方法，其特征在于，还包括活化...

【专利技术属性】
技术研发人员：王征，王琳，刘志博，张红艳，汪洋，
申请(专利权)人：华中科技大学同济医学院附属协和医院，
类型：发明
国别省市：